夏枯草中熊果酸与齐墩果酸提取工艺研究

主要研究了响应面优化超声辅助提取夏枯草中熊果酸与齐墩果酸工艺。以熊果酸与齐墩果酸含量为指标,通过响应面分析法确定响应面优化超声辅助提取夏枯草中熊果酸与齐墩果酸工艺的最佳工艺条件,即液料比值为19.8(mL/g),超声波时间为29 min,超声波功率为260 W,乙醇体积分数为78%。在此条件下熊果酸与齐墩果酸含量为2.74 mg/g。     

响应面优化超声波提取猕猴桃根熊果酸工艺

为优化猕猴桃根熊果酸的超声波提取最佳工艺,在单因素试验基础上,选择乙醇体积分数、液料比、提取时间、提取温度为自变量,熊果酸得率为响应值,利用中心组合试验法和响应面分析法,研究各自变量交互作用及其对熊果酸得率的影响,模拟得到二次多项式回归方程的预测模型。结果表明：当超声功率225 W、超声频率40 kHz时,超声波提取熊果酸工艺最佳条件为乙醇体积分数73.8%、液料比7.80∶1（mL/g）、提取时间23.2 min、提取温度79.1 ℃。此提取条件下,熊果酸得率达到2.014%,与模型预测值之间具有较好的拟合性,且提取液中熊果酸的纯度为49.7%。     

响应面试验优化超声耦合双水相体系提取茶多酚工艺

采用超声耦合乙醇-硫酸铵组成的双水相体系提取茶多酚,以乙醇体积分数、硫酸铵质量浓度、液料比、超声时间、超声温度为影响因素,以茶多酚提取率为响应值,通过响应面分析法得出最佳提取工艺条件为乙醇体积分数50%、硫酸铵质量浓度0.25 g/mL、液料比70∶1（mL/g）、超声时间16 min、超声温度45 ℃,此时茶多酚提取率可达17.58%。     

超声波细胞破碎法辅助提取山黄皮果熊果酸的工艺优化

通过Box-Behnken响应面法优化超声波细胞破碎法辅助提取山黄皮果熊果酸工艺条件。在单因素试验基础上,选择料液比、乙醇浓度、超声功率和超声时间为影响因素,以熊果酸提取量为响应值进行响应面分析。结果表明,山黄皮果熊果酸的最佳提取工艺条件：料液比1∶27（g/mL）、乙醇浓度60%、超声功率234 W、超声时间60 min。通过验证,根据此工艺条件,山黄皮果熊果酸的提取量达5.15 mg/g,与预测值相近,试验预测准确,可为山黄皮果深加工产品开发提供参考。     

响应面法优化超声提取枇杷叶中熊果酸的工艺研究

在单因素试验的基础上,以熊果酸提取率为响应值,采用响应面法,对枇杷叶中熊果酸的超声波提取工艺条件进行了优化,得到最佳工艺条件为：乙醇浓度82%、液料比21：1（mL/g）、超声时间35min、超声温度69℃,在此条件下,熊果酸的提取率为3.567mg/g。     

Plackett-Burman设计及响应面优化蓝莓中总黄酮的超声提取工艺

在单因素试验基础上,采用Plackett-Burman设计筛选出乙醇体积分数、超声时间、超声温度和液料比值作为影响超声提取蓝莓中总黄酮提取率的重要因素。最陡爬坡试验接近最大响应区域后,采用Box-Behnken Design试验设计结合响应面分析法确定最佳提取工艺为:乙醇体积分数80%、超声时间55.95 min、超声温度63.85℃和液料比值30.00(mL/g)。最佳提取条件下黄酮提取率的试验值为45.40 mg/g,与理论值46.343 5 mg/g相比两者相差不大,表明超声法提取蓝莓中总黄酮的工艺条件可通过Plackett-Burman试验设计结合响应面分析得到较好的优化。     

响应面法优化红蚂蚁抗菌物质提取工艺

以长白山野生红蚂蚁为原料,提取红蚂蚁体内有效抗菌活性物质并进行抑菌效果评价。通过单因素试验和响应面分析法研究乙醇体积分数、料液比、离心转速对红蚂蚁提取物抑制大肠杆菌的影响,结果表明：最佳浸提条件为乙醇体积分数63%、料液比1∶26（g/mL）、离心转速7 230 r/min,对大肠杆菌抑菌圈直径为2.59 cm。     

中心组合试验设计响应面分析法优化蜂胶总多酚提取工艺

利用星点设计-响应面分析法(CCD-RSM)优化蜂胶总多酚的超声提取工艺。在单因素试验基础上,选取超声时间、液料比和乙醇体积分数为影响因素,以Folin-Ciocalteus法测定总多酚含量作为响应值进行响应面分析,确定最佳提取条件。结果表明:超声提取时间24.0min、乙醇体积分数77.0%、料液比1:14(g/mL)时,在此条件蜂胶总多酚提取量为3.34mg/100mg。该提取方法简单快速有效,提高了蜂胶中总多酚的提取率。     

响应面法优化提取苦豆子生物碱及其抑菌性

试验旨在优化苦豆子生物碱提取的最佳工艺条件,并且研究其体外抑菌活性。利用单因素试验考察了乙醇体积分数、料液比、超声时间对生物碱得率的影响,并根据中心组合试验设计对提取条件进行优化。采用抑菌圈法和最低抑菌浓度试验考察其抑菌活性。结果表明,苦豆子生物碱的最佳提取工艺条件为乙醇体积分数67%、料液比1︰17 (g/mL)、超声时间30 min,此条件下生物碱得率为2.97%。中心组合试验结果表明3个因素对苦豆子生物碱得率均有显著影响,且其显著性顺序是料液比乙醇体积分数超声时间。苦豆子中生物碱对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有明显的抑制作用,最小抑菌质量浓度分别为2.5, 1.25和1.25 mg/mL。响应面法能够提高超声波提取苦豆子生物碱的得率,苦豆子生物碱具有体外抑菌活性。     

刺楸树皮中总皂苷的提取工艺优化及其抑菌活性

对刺楸树皮中总皂苷的提取工艺进行优化,并评价其抑菌活性。选用乙醇回流法,以刺楸树皮为原料,总皂苷得率为评价指标,考察提取时间、提取温度、乙醇体积分数、料液比对总皂苷得率的影响。在单因素试验基础上,利用响应面分析法优化刺楸树皮中总皂苷的提取工艺。结果表明：最佳提取条件为提取温度70 ℃、提取时间1.5 h、乙醇体积分数70%、料液比1∶15（g∶mL）。该条件下刺楸树皮总皂苷得率为3.33%。抑菌试验结果表明,刺楸树皮中总皂苷对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coli）、酵母菌均有抑制作用,且在1.0 mg/mL的质量浓度下对细菌的抑制作用更强。     

超声辅助提取山茱萸熊果酸工艺优化及其抗氧化和抑菌性

在7种单因素实验的基础上,采用正交试验优化了山茱萸熊果酸超声辅助提取工艺,并通过还原能力、DPPH·、·OH和猪油氧化抑制实验进行抗氧化活性评价测定,采用琼脂扩散法和对倍稀释法,测定了山茱萸熊果酸对5种食品领域常见的病原菌的体外抑菌活性。结果表明:山茱萸熊果酸超声辅助提取最佳工艺为:超声浸提时间25 min,溶剂中乙醇浓度50%,超声功率225 W,超声工作/间歇比8 s/5 s,提取次数2次,提取温度40 ℃,料液比1:25 (g/mL),在此条件下平均得率可达13.16%;山茱萸熊果酸具有良好的抗氧化和抑菌能力,当浓度为 0.1 mg/mL时,对DPPH·清除率最大为88.1%,对·OH的清除率最大为68.6%;当添加量达到0.75%对猪油的抗氧化能力与0.25%的V_C接近;抑菌能力大小为:大肠杆菌>金黄色葡萄球菌>枯草杆菌>变形杆菌>黑曲霉菌;对大肠杆菌的MIC 为6.25 mg/mL,对金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的MIC为12.5 mg/mL,对变形杆菌、黑曲霉 MIC 为 25 mg/mL。     

乌梅乙醇提取物抑菌作用及其抑菌成分分析

研究乌梅乙醇提取物(以下简称醇提物)的抑菌活性以及热处理和pH值对抑菌活性的影响,并通过薄层层析-生物自显影技术对醇提物的主要抑菌成分进行分析。结果表明:乌梅醇提物对蜡状芽孢杆菌和假单胞菌等有很强的抑制作用,最小抑菌质量浓度(MIC)在2.5～5.5mg/mL之间,最适pH值为5～6,对热稳定。当薄层层析的展开剂为氯仿、甲醇(体积比5:1)时,通过与柠檬酸、碱中和为pH7的乌梅醇提物比较,初步确定乌梅醇提物中起主要抑菌作用的是有机酸。     

响应面法优化微波辅助提取女贞子中熊果酸工艺

为优化微波辅助提取女贞子中熊果酸的最佳工艺。在单因素实验基础上,选择乙醇浓度(V/V)、微波功率、料液比及浸提时间为影响因素,以女贞子中熊果酸提取量为响应值进行响应面分析。结果表明,女贞子中熊果酸的微波辅助提取最佳工艺为:乙醇浓度88%、微波功率480 W、料液比1:23 g/mL、微波浸提时间166 s。在此提取条件下,熊果酸提取量为(4.653±0.087) mg/g,是模型预测值的99.53%。     

响应面试验优化海蓬子外种皮水溶性多糖提取工艺及其抗菌活性

对海蓬子外种皮多糖提取工艺进行研究,以干枯的海蓬子外种皮为原料,水提醇沉法获得多糖,考察提取时间、提取温度、料液比对多糖提取量的影响,通过单因素试验和响应面法对影响海蓬子外种皮多糖提取量的主要因素进行分析优化,微孔-平板法测定粗多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的最小抑菌浓度（minimal inhibitoryconcentration,MIC）。结果表明：影响海蓬子外种皮多糖提取量工艺的因素按主次顺序排列为提取温度＞料液比＞提取时间;确定海蓬子外种皮多糖水提取的最佳工艺条件为提取温度87 ℃、提取时间5 h、料液比1∶57（g/mL）,在该条件下,海蓬子外种皮多糖的提取量为（13.03±0.63） mg/g,与预测值12.42 mg/g接近,粗多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的MIC值分别为50、100 mg/mL,由此表明,响应面模型与实际情况拟合良好,能较好地预测海蓬子外种皮多糖的提取量,海蓬子外种皮粗多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌抑制作用。     

酸性蛋白酶制备花椒籽蛋白抗菌肽的研究

利用酸性蛋白酶酶解花椒籽蛋白制备抗菌肽,以底物质量浓度、酶与底物比、pH值、酶解温度、酶解时间为影响因子,在单因素试验结果的基础上,应用Box-Behnken方法进行三因素三水平的试验设计,以对大肠杆菌的抑菌率为响应值,应用响应面法对花椒籽蛋白制备抗菌肽工艺进行优化。其最佳工艺条件为：底物质量浓度30 mg/mL、酶与底物比3.0%、酶解pH 4.0、酶解温度51.2 ℃、酶解时间4.7 h,此条件下酶解产生的抗菌肽复合物的水解度为9.05%,对大肠杆菌的抑菌率为56.98%。     

超声波辅助酶法提取黑莓酒渣中花色苷工艺优化及其生物活性

利用响应面法对超声波辅助果胶酶提取黑莓酒渣中花色苷的条件进行了优化,并通过测定所提花色苷的抗氧化能力和对细菌生长的影响,评价其生物活性。结果显示,当料液比1∶15（g/mL）、超声波功率300 W、pH 4.5时,最佳提取条件为加酶量0.30%、提取温度48 ℃、提取时间20 min,此条件下花色苷提取量为4.70 mg/g,比酸化乙醇法提高了14.08%;所提花色苷具有一定的抗猪油氧化能力、羟自由基清除能力和较强的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力,并可有效抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长。     

重组谷氨酸脱羧酶大肠杆菌合成γ-氨基丁酸条件的优化

研究重组谷氨酸脱羧酶大肠杆菌合成γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的适宜条件。检测温度、p H值、表面活性剂、金属离子、底物与菌体质量比以及反应体系体积对GABA转化效率的影响。结果表明:最优转化条件为:转化体系5 m L、底物L-谷氨酸钠浓度0.1 mol/L、重组大肠杆菌细胞6.4 mg(干质量)、Triton-100体积分数0.06%、Ca2+浓度0.6 mmol/L,转化温度45℃、反应体系p H 4.5。在该体系下反应7 h,GABA合成量达到26.1 g/L,GABA转化效率在1 h时达到最高,为13.8 g/(g h),较优化前提高1.5 倍。     

响应面试验优化双水相萃取大吴风草总黄酮工艺及抑菌活性测定

目的：优化大吴风草总黄酮（total flavonoids of Farfugium,TFF）双水相萃取体系并研究其抑菌活性。方法：超声波辅助C2H5OH-(NH4)2SO4双水相萃取TFF,依据Box-Behnken试验设计原理,采用三因素三水平响应面分析法,以TFF萃取率为响应值进行方差分析,获取多元二次线性回归方程;采用K-B纸片扩散法测定6 种供试菌种的抑菌圈直径,对比最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）和最小杀菌浓度（minimumbactericidal concentration,MBC）确定其抑菌活性。结果：24% C2H5OH-18% (NH4)2SO4双水相萃取体系条件下TFF萃取率最高,响应面试验方差分析表明,粗提液质量分数显著影响TFF萃取率（P=0.023 9＜0.05）,而pH值和NaCl质量分数对萃取率的影响不显著;最佳双水相萃取条件为粗提液质量分数20%、pH 7.64、NaCl质量分数2.68%,萃取率模型预测最大值为96.366 7%（P=0.994）;TFF对枯草芽孢杆菌抑制作用最强,高剂量作用下抑菌率可达98.67%,MIC为1.56 mg/mL;对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌抑制作用次之,对青霉和黑曲霉抑制作用最弱。结论：粗提液质量分数对萃取率影响较大,pH值和NaCl质量分数对萃取率的影响较小;TFF对6 种供试菌种均表现出较强的抑菌活性,抑菌率与TFF质量浓度呈正相关,TFF对细菌的抑制效果相对强于真菌。     

嗜酸乳杆菌细菌素Lactobacillin XH2抑制大肠杆菌作用机理的探讨

将离子交换色谱纯化获得的抑菌效价为380.60 AU/mL的嗜酸乳杆菌细菌素Lactobacillin XH2作用于大肠杆菌（Escherichia coli）,从死亡率、细胞膜损伤及引起胞内物质外泄方面,探讨Lactobacillin XH2抑制大肠杆菌的机理。结果表明：Lactobacillin XH2作用于大肠杆菌后,在3 h内大肠杆菌死亡率达96%,菌体细胞变形并出现孔洞,菌体短小且不规整。进一步分析发现,细胞膜通透性增大,胞内K+快速大量泄露,膜电位紊乱失衡;胞内紫外吸收物质、乳酸脱氢酶等生命大分子物质大量流失;同时导致了大肠杆菌胞内三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）外泄,细胞物质代谢、能量代谢失常,最终导致了菌体死亡。这些现象表明,孔道形成（pore formation）理论可能同样适用于Lactobacillin XH2对革兰氏阴性菌大肠杆菌的作用机理。