田间烟草赤星病菌繁殖代数与其对杀菌剂敏感性的关系

为合理用药、提高防效,探讨了田间烟草赤星病菌繁殖代数与其对杀菌剂敏感性的关系。室内进行了在田间烟草不同生长时期采集的6个赤星病菌株对杀菌剂敏感性测定,并用聚类分析方法比较了各菌株对杀菌剂敏感性差异。结果表明,不同时期采集的不同繁殖代数烟草赤星病菌株对"菌核净"的敏感性差异显著,其中4号菌株对"菌核净"最不敏感,EC50为193 3644mg/L,已产生一定的抗药性,其次为1号菌株,EC50为102 3738mg/L,对"菌核净"最敏感的是2号和3号菌株,EC50分别为42 0390和58 4109mg/L。表明不论前期还是后期采集的菌株都有对"菌核净"敏感和不敏感的,烟草赤星病菌株的繁殖代数与其对"菌核净"的敏感性无一定规律性。从聚类分析树状图也可以看出这种敏感性的差异情况。     

烟草赤星病室内防治药剂筛选及田间防治效果

采用菌丝生长速率法和孢子萌发法,测定了10种杀菌剂对烟草赤星病菌(Alternaria alternata)的抑菌效果,采用田间小区试验对活性较好的4种杀菌剂进行防治效果比较。10种农药室内毒力试验结果显示,10%苯醚甲环唑水分散粒剂、10%多抗霉素可湿性粉剂、50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂、32.5%苯醚甲环唑·嘧菌酯悬浮剂、30%苯醚甲环唑·丙环唑悬浮剂和30%肟菌酯·戊唑醇悬浮剂抑制菌丝生长和孢子萌发的效果好;430 g/L戊唑醇悬浮剂抑制孢子萌发单一效果好;40%腈菌唑可湿性粉剂、40%菌核净可湿性粉剂和6%嘧肽霉素水剂对菌丝生长和孢子萌发的抑制效果都差。4种农药田间试验表明,10%苯醚甲环唑水分散粒剂、30%肟菌酯·戊唑醇悬浮剂、30%苯醚甲环唑·丙环唑悬浮剂和32.5%苯醚甲环唑·嘧菌酯悬浮剂对烟草赤星病的防效分别为90.60%、88.21%、87.21%和83.84%,均表现出良好的效果,推荐使用此4种杀菌剂用于生产上烟草赤星病的防控。     

烟草赤星病菌嘧菌酯抗性突变体的诱导及其生物学特性

为探究烟草赤星病菌对嘧菌酯的抗药性风险水平,通过对烟草赤星病菌在室内含药平板上的菌丝药剂驯服和分生孢子紫外诱变,进行突变体的生物学特性的研究,并对突变体靶标基因细胞色素b进行了测序分析。获得了4株嘧菌酯抗药性突变体。其中,菌丝药剂驯服未获得突变体;孢子紫外诱变获得4株突变体,突变率约为0.004%,突变体抗性倍数分别为42.50、282.50、515和107.50。4株突变体均降低了对嘧菌酯的敏感性。适合度研究表明,抗药性突变体具有同敏感菌株同样的分生孢子萌发能力和致病能力;菌丝生长速率较敏感菌株有所降低,3株突变体的分生孢子产量较敏感菌株增强,1株突变体较敏感菌株减弱。抗药性靶基因细胞色素b基因部分序列分析表明,突变体在129位和143位的碱基与敏感菌株完全相同,未发生任何突变。初步认为烟草赤星病菌对嘧菌酯的抗性风险水平较低。     

52%的菌核·锰锌对烟草赤星病菌的室内及田间毒力测定

室内采用孢子萌发抑制法测定菌核净、代森锰锌以及它们的复配剂52%菌核·锰锌对烟草赤星病菌的毒力,结果表明,菌核净和代森锰锌以适当的比例复配,可明显提高其对烟草赤星病菌孢子萌发的抑制率.计算复配剂共毒系数为385.081 9,表现出增效作用.田间防治试验亦表明,该复配剂可有效地控制赤星病的发生和危害.     

油菜菌核病菌对嘧菌环胺和不同杀菌剂敏感性的相关分析

为了明确油菜菌核病菌对新型杀菌剂嘧菌环胺的敏感性和该药剂与其它杀菌剂的交互抗性,采用菌丝生长速率法测定江苏省不同地区的53个油菜菌核病菌菌株对嘧菌环胺的敏感性,并测定对嘧菌环胺不同敏感性的10个菌株对菌核净、异菌脲、腐霉利、多菌灵、咪鲜胺和戊唑醇等杀菌剂的敏感性。结果表明,菌株间对嘧菌环胺的敏感性差异显著,EC50（抑制中浓度）值在0.0342～1.087 6μg/mL之间;通过EC50值相关性分析,油菜菌核病菌对嘧菌环胺与上述杀菌剂之间不存在交互抗性。     

荧光假单胞杆菌G20-9拮抗烟草赤星病菌研究

在室内测定了荧光假单胞杆菌菌株G20-9对烟草赤星病菌的拮抗作用.结果表明,G20-9菌株的无菌发酵液对烟草赤星病菌丝生长量有较强抑制作用,抑制效果为82.1%,稀释2倍的无菌发酵液对茵丝生长的抑制效果优于化学杀茵剂菌核净.应用双抗标记法测定了G20-9菌株在烟草叶面和根际的定殖情况,结果表明,该菌可以在烟草叶面和根际定殖.     

大理州烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性测定

采用含药平板法建立烟草黑胫病菌对杀菌剂烯酰吗啉的敏感基线,并测定了2013年从云南省大理州各烟区分离纯化的烟草黑胫病菌菌株对烯酰吗啉的敏感性。结果显示,烟草黑胫病菌的敏感基线为1.4656 μg/mL;68个田间菌株对烯酰吗啉的EC₅₀值在0.5857~2.5254 μg/mL之间,平均为1.1118 μg/mL。表明烯酰吗啉对烟草黑胫病菌的活性较高,大理州烟草黑胫病菌的抗药性风险较低。烯酰吗啉可用于大理州烟草黑胫病的有效防控,但应与其他杀菌剂进行合理的轮换使用。     

油菜菌核病菌对腐霉利的抗性诱变及抗药菌株的生物学特性

从江苏省镇江市和扬州市采集菌核病植株的茎,从中分离获得油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）单菌核菌株。32个野生型菌株药剂敏感性（EC50）频率分布数据显示,病菌对腐霉利的敏感基线EC50值为0．1981±0．0220μg／mL,MIC（最小抑菌浓度）值为1．1±0．1595μg／mL。实验未发现田间抗腐霉利菌株。通过室内紫外线和药剂诱导,获得多株高抗腐霉利突变体（EC50〉1000μg／mL）。这些抗性突变株经转管培养5～20代后抗药性稳定。它们对同类药剂异菌脲和有机磷类甲基立枯磷也表现高抗,但对苯并咪唑类多菌灵敏感。与野生型敏感菌株相比,抗腐霉利突变株菌丝生长较慢,对油菜茎秆和叶片的致病力均较弱。     

烟草赤星病菌对嘧菌酯及其添加水杨肟酸后的敏感性检测

为了解烟草赤星病菌对嘧菌酯的敏感性现状,采用菌丝生长速率法,检测了采自山东和湖北烟区的33株烟草赤星病菌对嘧菌酯的敏感性,分析了水杨肟酸协同下烟草赤星病菌对嘧菌酯敏感性的影响。结果表明:嘧菌酯对所有供试烟草赤星病菌的EC₅₀介于60.5230~111.7918 mg·L-1,平均为83.9068±2.4339 mg·L-1;嘧菌酯对采自山东烟区和湖北烟区的赤星病菌的平均EC₅₀分别为82.7986±2.5515 mg·L-1和88.0230±6.6785 mg·L-1。在水杨肟酸协同作用下,嘧菌酯对所有供试烟草赤星病菌毒力的EC₅₀介于19.9090~35.6684 mg·L-1,平均为29.2007±0.7801 mg·L-1,比嘧菌酯单独作用毒力提高了0.70~2.98倍,平均提高了1.87倍;添加水杨肟酸的嘧菌酯对采自山东和湖北烟区的赤星病菌毒力的平均EC₅₀分别为28.5494±0.8914 mg·L-1和31.6197±1.3290 mg·L-1,与嘧菌酯单独作用相比,毒力分别提高了1.90和1.78倍。研究表明,嘧菌酯对烟草赤星病菌的菌丝生长具有一定的抑制作用,添加水杨肟酸能够显著提高嘧菌酯对烟草赤星病菌的毒力,但不同菌株之间的提高倍数有差异。      

烟草青枯病菌对4种杀菌剂的敏感性及复配药剂联合毒力评价

为筛选出对烟草青枯病菌具有抑制作用的高效药剂,以链霉素为对照,采用生长曲线测定仪检测了烟草青枯病菌对氟啶胺、双苯菌胺、噻霉酮和春雷霉素的敏感性,并利用Wadley方法对氟啶胺与纳米硫、纳米铜、纳米银的9种复配比例进行联合毒力评价。结果表明,双苯菌胺和氟啶胺对烟草青枯病菌的平均EC₅₀分别为0.037 8 μg/mL和0.305 0 μg/mL,EC₅₀分布范围分别为0.018 7~0.053 4 μg/mL和0.147 1~0.890 4 μg/mL,链霉素、噻霉酮和春雷霉素对烟草青枯病菌的平均EC₅₀分别为0.546 3 μg/mL、2.429 9 μg/mL和9.927 3 μg/mL,说明杀真菌药剂氟啶胺、双苯菌胺可有效抑制青枯病菌生长,且抑菌效果优于链霉素等药剂。5种药剂对烟草青枯病菌的敏感基线均呈正态分布,为连续的单峰曲线,可用于田间烟草青枯病菌抗性菌株监测。氟啶胺与纳米农药按不同比例复配后的EC₅₀均小于纳米农药单剂的EC₅₀。当氟啶胺与纳米硫按体积比1 ∶ 40复配时具有增效作用,增效系数为1.60;氟啶胺与纳米铜按体积比80 ∶ 1复配时,相加作用最为明显（EC₅₀=0.142 2 μg/mL）;氟啶胺与纳米银的复配比例（体积比）为1 ∶ 20时,增效系数最高达1.41,具有相加作用。      

吉林省和黑龙江省烟草赤星病病原鉴定

为明确吉林省和黑龙江省烟草赤星病病原菌的种类,对吉林省15个烟区和黑龙江省7个烟区的烟草赤星病病原菌进行了分离鉴定,共分离获得312株致病菌株。通过形态学和分子生物学鉴定,共鉴定出4种链格孢属真菌,其中链格孢（Alternaria alternata）230株,细极链格孢（Alternaria tenuissima）78株,鸭梨链格孢（Alternaria yaliinficiens）2株,长柄链格孢（Alternaria longipes）2株。其中吉林省烟区鉴定出了链格孢、细极链格孢和鸭梨链格孢3种,黑龙江省烟区鉴定出了长柄链格孢、链格孢和细极链格孢3种。两个省区的优势种均为链格孢。此外,本试验利用5种基因序列片段（ITS、GDP、ACT、EF、RPB2）进行烟草赤星病菌的分子生物学鉴定,其中GDP基因仅能鉴定出链格孢和细极链格孢2种,RPB2基因能鉴定出4种链格孢,而ITS、EF、ACT基因序列比较保守,不适合区分这些链格孢种。本研究明确了吉林省和黑龙江省烟区引起烟草赤星病的病原菌种类,为下一步的定向防控奠定了基础。     

多壁碳纳米管固相萃取/气相色谱-质谱测定蔬菜中的苯醚甲环唑农药残留

以多壁碳纳米管(MWCNTs)为固相萃取材料,建立了蔬菜中苯醚甲环唑农药残留的气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析方法。样品经乙酸乙酯匀浆提取后,以MWCNTs固相萃取柱净化,用GC-MS进行检测。研究了不同提取溶剂和MWCNTs的量对提取净化效率的影响。结果表明:在最优实验条件下,苯醚甲环唑在0.005~2.0 μg/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9997,检出限为0.001 mg/kg,空白蔬菜样品在0.01、0.10、1.00 μg/mL 3个加标水平下的回收率在84.2%~111.3%之间,相对标准偏差(n=5)为5.3%~11.9%。该方法灵敏度高,选择性好,抗干扰能力强,适合蔬菜中苯醚甲环唑残留量的定性确证分析和定量分析。     

Sensitivity of Penicillium expansum field isolates to tebuconazole, iprodione, fludioxonil and cyprodinil and characterization of fitness parameters and patulin production

A total of 236 Penicillium expansum field isolates from decayed apple fruit collected from packinghouses and processing industries located in the region of Imathia, Northern Greece were tested for their sensitivity to tebuconazole, fludioxonil, iprodione and cyprodinil. Preliminary fungitoxicity tests on the response of the isolates showed several phenotypes, distinguished according to their sensitivity to fungicides tested. The EC₅₀ values ranged from 0.64 to 5 (average = 0.98) μg/ml for iprodione, 0.9 to 7.3 (average = 2.66) μg/ml for tebuconazole, 0.008 to 1.28 (average = 0.55) μg/ml for cyprodinil and from 0.013 to 0.47 (average = 0.08) μg/ml for fludioxonil. A bimodal distribution of the EC₅₀ values of isolates with distinct sensitive and resistant populations to fludioxonil and tebuconazole were observed. In the case of cyprodinil, a much broader, hundred-fold, range of sensitivity was found, probably indicating that some isolates are relatively insensitive to cyprodinil compared to the most sensitive ones. Isolates exhibiting simultaneously reduced sensitivity to tebuconazole and fludioxonil or tebuconazole and iprodione or to tebuconazole and cyprodinil were also observed at low frequencies. A small portion of the population (7.5%) showed multiple resistance to tebuconazole, fludioxonil and iprodione. Study of fitness determining parameters showed that the resistance to tebuconazole, fludioxonil and iprodione had a significant adverse effect on mycelial growth rate and pathogenicity. Contrary to that, these fitness parameters were not affected in the isolates showing reduced sensitivity to cyprodinil. Analysis of patulin production on YES-agar growth medium and on artificially inoculated apple fruit showed that all isolates were mycotoxigenic. Most of the cyprodinil-insensitive isolates produced patulin at concentrations similar to or relatively higher (up to 1.5-fold on growth medium) than the sensitive ones. In contrast, a significant reduction (up to 98% of multiple resistant isolates) in patulin production was observed in all other phenotypes, indicating an adverse effect of fitness penalties on the mycotoxigenic ability of resistant isolates. The above mentioned data clearly show a considerable risk for the selection of P. expansum isolates resistant to fludioxonil, iprodione, tebuconazole and cyprodinil. The potential risk of increased patulin contamination of apples and their byproducts by the appearance and predominance of highly mycotoxigenic isolates of P. expansum resistant to the anilinopyrimidines is discussed.     

二氧化氯气体对葡萄链格孢菌的抑制作用

该文研究了二氧化氯气体(ClO 2)对链格孢菌的抑制作用,为降低采后葡萄贮藏过程中交链孢霉腐病带来的损失提供依据。用1.5、3.0、4.5、6.0、7.5、9.0μg/L ClO 2分别对离体链格孢菌处理10、20、30 min,以不做任何处理为对照组,通过测定菌落生长、孢子形成、芽管伸长抑制率及倒置显微镜观察菌丝形态来探究ClO 2对其抑制效果。并用3.0、6.0、9.0μg/L ClO 2对接种了链格孢菌的葡萄处理30 min,置于28℃的培养箱中贮藏,通过测定病斑直径、发病率及相关酶活性来探索ClO 2对交链孢霉腐病的抑制作用。结果表明,离体实验中,与对照组相比,ClO 2处理组均能显著抑制链格孢菌菌落生长、孢子形成及芽管伸长。且接种了链格孢菌的活体实验中,ClO 2处理组均能抑制果实的病斑直径及腐烂率,延缓果实中丙二醛含量的积累,维持较高的抗氧化活性,其中采用9.0μg/L ClO 2处理果实30 min效果最好。     

反相高效液相色谱法同时测定马铃薯块茎中酚酸类物质

目的：运用反相高效液相色谱法同时测定马铃薯中的绿原酸、咖啡酸、对香豆酸和阿魏酸。方法：色谱柱为YMC-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(30:70:1,V/V)等度洗脱,柱温25℃,检测波长327nm。结果：绿原酸、咖啡酸、对香豆酸和阿魏酸在进样质量浓度分别为7.80～1000、0.78～100、0.312～40、0.078～10μg/mL范围内线性关系良好(r值范围0.9968～0.9999),平均回收率为92.38%～101.73%。结论：本法分析快速准确、灵敏度高、重现性好,江西、北京和新疆3个地域的环境条件对马铃薯的酚酸含量有一定的影响。