菲律宾蛤仔糖蛋白的分离纯化与理化性质的研究

对菲律宾蛤仔全脏器中的糖蛋白进行分离纯化,并分析其理化性质.菲律宾蛤仔全脏器经热水煮提、DEAE-52 纤维素柱层析及Sephadex G-100柱层析分离纯化,所得纯化组分用SDS-PAGE鉴定纯度并测定其相对分子质量;用HPLC检测糖链的单糖组成,再用IR分析其基团结构.结果表明:菲律宾蛤仔经柱层析纯化得到1种中性糖蛋白(NGP)和3种酸性糖蛋白(AGP,主要组分为AGP-Ⅲ).NGP的相对分子质量为35000, 总糖及总蛋白质量分数分别为60.5%和18.2%,糖链部分主要是由木糖、葡萄糖、半乳糖组成.AGP-Ⅲ的相对分子质量为43 000,总糖与蛋白的质量分数分别为57.4%和22.0%,糖链部分主要含有木糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等.IR分析表明,NGP和AGP-Ⅲ均含有多糖的-OH、-COO-、-NH、-C-O-C等特征基团.     

桉木预水解液中半纤维素多糖分离纯化及抗氧化活性研究

采用醇沉法从桉木预水解液中提取半纤维素粗多糖（PHLP）,并利用DEAE-650M离子交换柱对其进行分离纯化,对纯化得到的中性多糖PHLP-1和酸性多糖PHLP-2两种组分进行分析。单糖组分结果表明,PHLP-1和PHLP-2均由阿拉伯糖、木糖、半乳糖、甘露糖及葡萄糖组成,摩尔比分别为0.09∶1∶0.13∶0.07∶0.35和0.1∶1∶0.03∶0.09∶0.08。红外光谱测定表明,两种组分均具有多糖的特征吸收峰。扫描电子显微镜表明,PHLP-1和PHLP-2呈无序杂乱的结构形态。抗氧化实验结果表明,两种纯化的多糖组分均具有一定的抗氧化性且存在量效关系,抗氧化能力强弱顺序为：PHLP-2>PHLP-1>PHLP。     

猪肺管硫酸软骨素的提取分离与抗氧化活性研究

首先比较稀碱、全酶和稀碱-酶法结合提取猪肺管硫酸软骨素的工艺,探究猪肺管硫酸软骨素的最大得率,再采用乙醇沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析和Sephadex G-75分离纯化得到高纯度硫酸软骨素,然后采用紫外光谱、红外光谱和核磁共振技术对其进行结构鉴定,最后探讨其抗氧化活性。结果发现,全酶法提取硫酸软骨素得率最高,得率为22.10%。纯化后,97%纯度的硫酸软骨素得率28g/100g粗品。光谱、核磁共振和抗氧化数据显示,该硫酸软骨素结构与鸡胸软骨和猪喉软骨硫酸软骨素的结构和抗氧化活性相似。因此,猪肺气管软骨可以作为硫酸软骨素的优质大宗提取资源。     

MBR膜污染层中胞外多糖的分离纯化

探讨了MBR膜污染层胞外多糖的分离提取及纯化方法.结果表明,采用80 ℃水浴法提取物中胞外多糖含量为86.0%,粗多糖经酶解-Sevag法去除蛋白质,通过DEAE-纤维52、Sephacry-400 HR柱分离纯化得到多糖EPS-A1.紫外光谱分析多糖EPS-A1未见蛋白质与核酸的特征吸收峰,红外光谱分析其具有典型的多糖特征吸收峰.     

九华山黄精多糖的分离纯化及化学表征

采用传统方法、酶法、超声波提取以及酶法辅助超声等多种手段对九华山多花黄精多糖进行提取,并用DEAE-纤维素柱层析与交联葡聚糖分子筛法等对多糖进行纯化、分级以及相对分子质量测定,采用红外光谱以及气相色谱法等对多糖的构型和组成进行分析。结果表明：纤维素酶辅以超声提取方法最佳,多糖得率最高;多糖为杂多糖,其相对分子质量为8912,其组成为果糖:葡萄糖=8.7:1。     

超声辅助法制备的苜蓿多糖结构特征及抗氧化活性分析

以紫花苜蓿为原料,采用超声辅助法提取苜蓿粗多糖,利用DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-75凝胶柱层析分离纯化得到一种苜蓿均一多糖APSU-2a.通过高效凝胶渗透色谱、PMP柱前衍生化高效液相色谱、红外光谱和核磁共振波谱分析APSU-2a的结构特征,以DPPH、ABTS和羟自由基清除率评价APSU-2a的...     

苦瓜果实中多糖的分离纯化及性质分析

以苦瓜果实为材料,经热水抽提、乙醇沉淀和Sevag 法去蛋白后获得了苦瓜果实粗多糖(MCP)。MCP 经DEAE- 纤维素柱离子交换柱层析分离得到4 个级分MCP-A、MCP-B、MCP-C 和MCP-D。MCP-A 经Superdex G-100 柱进一步纯化得到苦瓜果实多糖MCP-A1 组分。MCP-A1 经高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定为均一组分,测定其平均分子量为93577D。经过对其理化性质鉴定表明,MCP-A1 不含蛋白质、核酸,含有糖醛酸,为非淀粉类多糖。红外光谱扫描结果表明,其具有典型的多糖吸收峰。     

花生非淀粉多糖的纯化技术研究

以冷榨花生粕为原料,采用高温热水提取花生多糖(PPS)。通过正交实验优化酶解法去除花生粗多糖中淀粉的最佳工艺条件,并利用DEAE-52纤维素离子交换柱层析对花生多糖进行分离纯化。结果表明:在最佳工艺条件下,耐高温α-淀粉酶和糖化酶酶解除淀粉后的花生多糖纯度明显提高;DEAE-52柱层析主要得到中性多糖PPS-1和酸性多糖PPS-2,其含量分别为17.79%和66.93%;紫外扫描结果显示PPS-1和PPS-2均不含核酸,PPS-1含有少量的蛋白。     

毛竹竹叶多糖分离与纯化技术研究

对毛竹叶采用超声波提取法获得的竹叶多糖粗提取物,采用Sevag法脱蛋白质、乙醇分级沉淀、冷冻干燥后得到粗多糖,进一步用DEAE-52纤维素柱层析、Sephadex葡聚糖凝胶柱层析等方法分离纯化.结果表明:Sevag法脱蛋白3次可脱除97.2%的蛋白质;50%浓度的乙醇沉淀多糖得率最高,为37.6%;DEAE-52纤维素柱层析柱水沈脱的得牢最高,为46.4%;DEAE-52纤维素柱层析柱2次水洗脱获得的竹叶多糖经G-75柱层析和G-100柱层析可得到白色粉末状的中性多糖.选择水和NaCl溶液为洗脱剂的温和条件分离纯化多糖效果较好.     

鱿鱼眼透明质酸的酶法提取与分离纯化

目的:分离纯化鱿鱼眼透明质酸,为利用鱿鱼加工废弃物提供理论依据。方法:以北太鱿鱼眼为原料,通过正交试验考察酶解时间、温度、酶用量对透明质酸提取率的影响,优化酶法提取透明质酸工艺条件;以离子交换层析分离纯化,用紫外光谱和凝胶过滤层析鉴定透明质酸的纯度及其分子质量,并用红外光谱分析其结构。结果:1)枯草杆菌蛋白酶提取透明质酸的最适条件为酶解时间1h,温度60℃,酶用量4%,鱿鱼眼透明质酸的提取率达14.10%;2)利用H2O和NaCl溶液分步洗脱,DEAE-Sephadex A-25离子交换层析纯化得到2个透明质酸组分HA-1和HA-2,得率分别为5.22%和84.37%;3)HA-1和HA-2组分的相对分子质量分别为6.77×105、1.73×106,均显示为单一洗脱峰,无蛋白、核酸杂质;红外图谱显示其具有透明质酸标准品的吸收峰。结论:鱿鱼眼透明质酸酶法提取率14.10%,纯化得到的透明质酸分子质量分别为6.77×105和1.73×106。     

玉竹糖蛋白的分离纯化及理化性质的研究

采用DEAE-52离子交换和Sephadex G-100柱层析法分离纯化玉竹糖蛋白粗品,得到了两种糖蛋白组分PDGP’-1和PDGP’-2,并对两种组分的理化性质进行了研究。结果表明,两种组分均为酸性糖蛋白,糖含量分别为75.22%和75.13%,蛋白质含量分别为16.35%和18.42%。红外光谱分析表明PDGP’-1中含鼠李糖、半乳糖和葡萄糖,PDGP’-2中含半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖和果糖。两种糖蛋白分子都含有吡喃糖环。     

灵芝子实体和孢子粉纯化多糖体外抗氧化活性研究

为研究同源灵芝子实体和灵芝孢子粉纯化多糖的体外抗氧化活性,利用DEAE-650离子交换树脂,对提取获得灵芝子实体粗多糖(GLP)和灵芝孢子粉粗多糖(GLSP)进行分离纯化,GLP水洗脱得到GLP-1,0.2 mol/L NaCl洗脱得到GLP-2,GLSP水洗脱得到GLSP-1,0.2 mol/L NaCl洗脱得到GLSP-2。分别考察了4种纯化多糖的ABTS+自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力和还原能力,结果表明,不同灵芝纯化多糖的抗氧化能力不同,GLP-2的4种抗氧化活性均最高,四种抗氧化能力最高,分别为98.09%、75.88%、81.55%和0.728。     

菲律宾蛤仔氨基多糖的分离提取及其抗肿瘤活性的初步研究

以湛江地区盛产的菲律宾蛤仔全脏器为原料,经酶解、脱色、离心去蛋白后醇沉、干燥等工序得到氨基多糖粗制品(CRG),再将所得的CRG经一次纯化(吸附、透析)、二次纯化(CTAB络合)、醇沉等方法进行纯化,得到菲律宾蛤仔纯化产物(PRG)。PRG含有氨基已糖、乙糖醛酸、硫酸基和少量的岩藻糖(Fuc)、半乳糖(Gal),琼脂糖凝胶电 泳可分为F—1、F—2两个级分。红外光谱与CS—6相似。体外抗肿瘤实验表明,1.0mg/mL菲律宾蛤仔CRG具有显著的抗肿瘤活性,24h内对HL—60细胞的抑制率达59.8％。     

菲律宾蛤仔蒸煮液多糖回收工艺及微胶囊化

目的 回收菲律宾蛤仔蒸煮液中的多糖并采用微胶囊包埋技术对多糖进行脱腥和保护。方法 采用超滤醇沉工艺回收菲律宾蛤仔蒸煮液多糖, 以该多糖为芯材, 大豆蛋白和麦芽糊精为壁材, 采用喷雾干燥法制备微胶囊, 通过单因素和正交试验优化制备工艺。结果 菲律宾蛤仔蒸煮液多糖回收工艺为: 蒸煮液固形物含量调整为10%, 3万分子量超滤膜除杂, 透过液加入3倍体积乙醇, 室温醇沉24 h, 沉淀冻干得菲律宾蛤仔蒸煮液多糖粗品, 总糖含量大于80%, 回收率高于70%; 喷雾干燥法制备菲律宾蛤仔蒸煮液多糖微胶囊工艺参数为: 乳化剂用量0.1%、多糖浓度10 mg/mL、壁材比例3:1、均质时间3 min, 得到的微胶囊的包埋率达到68.63%。结论 超滤醇沉工艺适用于菲律宾蛤仔蒸煮液中多糖的回收, 该多糖采用喷雾干燥法微胶囊化包埋处理, 能够很好地掩盖其腥味, 并起到保护作用。该研究为菲律宾蛤仔蒸煮液的综合开发利用提供思路。     

波纹巴非蛤氨基多糖的分离纯化及其理化性质的初步研究

以波纹巴非蛤全脏器为原料,经酶解、脱色、离心去蛋白、醇沉、干燥等工序得到氨基多糖粗制品(波纹巴非蛤CPG),CPG再经吸附、透析、CTAB络合等方法进行纯化,得到波纹巴非蛤氨基多糖较纯级分(波纹巴非蛤GAG-2)。成分分析表明:波纹巴非蛤GAG-2含有氨基己糖、己糖醛酸、硫酸基和少量的岩藻糖(Fuc)、半乳糖(Gal)。波纹巴非蛤GAG-2经琼脂糖凝胶电泳可再分为F-1、F-2两个级分;红外光谱与CS-6相似;体外抗肿瘤试验表明:0·5mg/mL波纹巴非蛤CPG对HL-60细胞的抑制率可达32·3%,与抗癌药物5-Fu合用时可使抑瘤率提高到56·7%,具显著增敏作用。     

红毛菜多糖的分离、纯化及纯度鉴定

将红毛菜经过脱脂后用热水抽提可溶性多糖,经脱蛋白后得粗多糖,用DEAE-32纤维素和SephadaxG-100对粗多糖进行柱层析分离提纯,得组分PY1和PY2;利用紫外光谱和红外光谱,对组分进行鉴定纯度。     

合浦珠母贝糖胺聚糖的分离纯化及理化性质分析

研究合浦珠母贝糖胺聚糖粗品经分离纯化得到的精制品的理化性质,通过琼脂糖凝胶电泳鉴定样品分离情况,并对样品进行红外分析。经枯草杆菌蛋白酶与胰蛋白酶双酶酶解提取糖胺聚糖粗制品后,将粗制品利用DEAE-52离子交换柱进行纯化,纯化时分别用0.5 mol/L Na Ac(p H=6.0)和1.5 mol/L Na Cl进行洗脱,得到精制品GAG_1和GAG_2。利用苯酚-硫酸法、Bradford法、明胶-氯化钡法、Orcinol法、Wagner法、红外光谱法分析GAG_1和GAG_2的理化性质。通过各实验结果,可以初步猜测GAG_1为肝素钠,GAG_2为硫酸软骨素。     

胶网藻多糖分离纯化、化学组成及其抗氧化活性

研究胶网藻（Dictyosphaerium sp.1A10）多糖的抗氧化活性并分析多糖的基本结构特征。采用超声辅助提取法对胶网藻多糖进行提取，并用DEAE-52纤维素柱层析和Sepharose CL-6B凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化，测定其 2，2-二苯基-1-苦基肼 [2，2-diphenyl-1-picrylhydrazyl，DPPH]、2，2''-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸 [2，2''-Azinobis-（3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate），ABTS]、羟自由基清除率和还原能力，通过紫外光谱（ultraviolet spectrum，UV）、红外光谱（infrared spectrum，IR）、高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）和高效凝胶色谱（high performance gel permeation chromatography，HPGPC）等技术进行基本结构分析。结果表明：（1）经过DEAE-52纤维素柱层析分离得到4个组分PC-1、PC-2、PC-3和PC-4，对抗氧化活性较高的多糖组分PC-4进行Sepharose CL-6B凝胶柱层析进一步纯化得到PCP-4；（2）胶网藻纯化多糖组分PC-4、PCP-4均具有一定的抗氧化能力；（3）胶网藻纯化多糖组分PCP-4的重均分子量（weight average molecular weight，Mw）为121 762 Da。多糖组分PCP-4含有吡喃糖和硫酸基。多糖组分PCP-4主要由鼠李糖、甘露糖和半乳糖醛酸组成，还有少量的葡萄糖醛酸、葡萄糖和半乳糖。     

人工培养冬虫夏草胞外多糖的分离纯化研究

本文以乙醇沉淀法提取得到的人工培养冬虫夏草(Cs-HK1)粗胞外多糖为研究对象,采用DEAE-52纤维素(Cl-)离子交换柱层析和Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱层析进行分离、纯化得到一水溶性胞外多糖分EPS-1A。紫外光谱、比旋光度和凝胶渗透色谱法研究表明该多糖为相对均一组分,中性糖含量为99.0%,重均相对分子质量为4.0×104。多糖特征反应表明该多糖为非淀粉类,不含单糖、糖醛酸、蛋白质、核酸和多酚类物质的中性多糖。     

红毛菜多糖的分离、纯化及纯度鉴定

将红毛菜经过脱脂后用热水抽提可溶性多糖，经脱蛋白后得粗多糖，用DEAE-32纤维素和ScphadaxG-100对粗多糖进行柱层析分离提纯，得组分PY1和PY2；利用紫外光谱和红外光谱，对组分进行鉴定纯度。