长白山区核桃青皮多糖分离纯化、鉴定及抗氧化活性分析

对核桃青皮多糖（polysaccharide of walnut green husks,JPs）进行分离纯化,并对得到的多糖进行单糖组成及体外抗氧化活性分析。利用超声波辅助提取JPs,经醇沉、除蛋白、透析等一系列处理后,先后利用DEAE-Sepharose和Sephadex?G-100柱色谱分离纯化JPs得到了两种均一多糖（JPs-1-1和JPs-2-1）;利用高效凝胶渗透色谱法测定两种均一多糖的分子质量分别为5.45×104、5.22×104?u;利用PMP-柱前衍生高效液相色谱法测定了两种均一多糖的单糖组成,均是由鼠李糖（Rha）、葡萄糖醛酸（GlcA）、半乳糖（Gal）、葡萄糖（Glc）、半乳糖醛酸（GalA）、木糖（Xyl）及阿拉伯糖（Ara）以不同的物质的量比组成。总抗氧化能力实验、1,1-二苯基-2-苦味基肼自由基和羟自由基清除实验结果表明JPs及分离纯化得到的两种均一多糖均具有较好的抗氧化活性,而且抗氧化活性的能力与样品的质量浓度呈正相关。     

6种活性多糖的结构、性质及其抗氧化活性的比较研究

为研究多糖的结构和性质对其抗氧化活性的影响,从真菌多糖和藻类多糖中共选出6种多糖,分别为地木耳多糖、葛仙米多糖、发菜多糖、螺旋藻多糖、香菇多糖和茯苓多糖。对6种多糖进行分离纯化,共得到8种均一性多糖组分。分别对纯化后多糖的特性黏度、分子量、红外光谱、单糖组成、三股螺旋结构等相关参数进行测定,进一步对比纯化多糖的体外抗氧化能力,并利用最小偏二乘分析（partial least squares,PLS）初步分析纯化后多糖的结构、性质对其体外抗氧化活性的影响。结果表明：多糖溶液特性黏度与分子量大小有关,香菇多糖对DPPH自由基的清除作用、ABTS+自由基的清除能力和还原能力最强,单糖组成（葡萄糖醛酸、半乳糖和葡萄糖）和分子量对多糖体外抗氧化生物活性影响较大。     

兰州肉苁蓉多糖的组成分析及抗氧化活性

对兰州肉苁蓉多糖进行组成分析和抗氧化活性研究。采用沙生植物兰州肉苁蓉肉质茎鲜样,使用传统水提醇沉法进行兰州肉苁蓉粗多糖（CLP）的提取,利用DEAE-纤维素阴离子交换色谱柱法对粗多糖CLP进行洗脱,得到中性糖CLP-1和酸性糖CLP-2。用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）和高效液相色谱法（HPLC）对其分子量和单糖组成进行测定,通过DPPH自由基清除实验和总抗氧化能力实验进行抗氧化活性测定。根据HPGPC对分子量测定得出兰州肉苁蓉多糖有多个洗脱峰,其多糖分子量主要分布在0~10 kDa之间,为不均一的小分子量杂多糖;经过分级得到的中性糖CLP-1和酸性糖CLP-2的单糖组成差异明显,CLP-1中较明显的单糖及占比分别为:甘露糖2.78%、半乳糖醛酸4.07%、葡萄糖88.62%、半乳糖1.80%、阿拉伯糖2.39%;CLP-2中为:鼠李糖5.79%、半乳糖醛酸7.78%、葡萄糖9.99%、半乳糖13.30%。根据抗氧化实验结果分析,CLP-1的抗氧化效果最好,2.0 mg/mL浓度下对DPPH自由基清除能力高达91.73%,IC₅₀为0.383 mg/mL,且同一浓度下总抗氧化能力高于CLP和CLP-2。本文对兰州肉苁蓉多糖进行初步分析,为兰州肉苁蓉的进一步研究提供基础的数据支撑。     

紫苏叶多糖分离纯化及体外抗氧化活性

通过水提醇沉法得到紫苏叶粗多糖（Perilla frutescens leaf polysaccharides，PFP），并用DEAE-52纤维素层析法对其进行分离纯化，获得4个多糖组分PFP-1、PFP-2、PFP-3和PFP-4。PFP-1为中性低聚糖，但总糖含量较低；PFP-2重均分子量为4.7 kDa，峰位分子量为2.2 kDa，主要组成单糖为半乳糖醛酸；PFP-3主要由两种分子量段的多糖组成，主要峰位分子量为5.2 kDa和40.0 kDa，为杂多糖，所含单糖种类较多，主要含半乳糖醛酸和半乳糖；PFP-4分子量较小，主要组成单糖为半乳糖和阿拉伯糖。体外抗氧化活性试验表明，PFP的DPPH自由基清除能力、ABTS+自由基清除活性和Fe3+还原能力较强，具有良好的抗氧化活性，其中组分PFP-3和PFP-4抗氧化活性与PFP接近，是其发挥抗氧化作用的关键组分。     

冬枣多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的：分离纯化冬枣多糖,并研究其组分、结构特征和抗氧化活性。方法：采用水提醇沉、脱蛋白脱色、DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-100凝胶色谱柱分离纯化冬枣多糖;利用Sephadex G-100凝胶色谱柱进行纯度鉴定和分子质量的测定;通过紫外光谱、红外光谱、气相色谱法进行了初步结构分析;采用邻二氮菲法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）体系对纯化多糖进行抗氧化活性的研究。结果：冬枣多糖经DEAE-52分离和Sephadex G-100纯化得到2 个组分DPA和DPB,经Sephadex G-100鉴定均为均一组分,DPA和DPB分子质量分别为1.04×104、3.02×105 D,不含蛋白质和核酸,为吡喃型糖苷环骨架,DPA的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为6.66∶1.00∶6.75∶2.09;DPB的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为4.33∶10.90∶1.00∶3.25∶4.78;DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性,随着多糖质量浓度的增加,其抗氧化活性增强,在质量浓度为8 mg/mL时对羟自由基清除率分别为28.52%、78.79%,在质量浓度为0.4 mg/mL时对DPPH自由基清除率分别为9.97%、24.54%。结论：DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性。     

山茱萸籽多糖分离纯化、结构表征及抗氧化活性

为了对山茱萸籽多糖进行分离纯化、结构表征及抗氧化活性研究，本实验通过亚临界水萃取、体积分数30% H2O2脱色、Sevag法脱蛋白得到山茱萸籽多糖，并用DEAE-52纤维素层析法对其进行分离纯化得到了5 个多糖组分，即COSP-1、COSP-2、COSP-3、COSP-4和COSP-5，并采用Sephadex G-100凝胶色谱法对主要多糖组分COSP-4进一步纯化。凝胶色谱和单糖组成表明，COSP-4是分子质量约为2.03×104 Da的酸性均相多糖组分，由鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和木糖组成，物质的量之比为0.96∶0.18∶5.48∶0.28∶1∶10.70。甲基化反应和核磁共振表明COSP-4包含14 种甲基化糖，残基同时包含了α构型糖基和β构型糖基，含量最高的单糖结构为1,4,5-三乙酰基-2,3-二甲基木糖。扫描电子显微镜观察表明COSP-4呈不规则碎片结构，松散多孔，类似海绵结构。抗氧化活性实验表明，COSP-4对DPPH自由基、羟自由基和ABTS阳离子自由基具有较强的清除能力。COSP-4对DPPH自由基、羟自由基和ABTS阳离子自由基的半抑制质量浓度分别为（1.72±0.14）、（1.48±0.17）mg/mL和（2.87±0.27）mg/mL。综上，本实验为进一步研究山茱萸籽多糖的构效关系及促进其应用提供参考。     

胶网藻多糖分离纯化、化学组成及其抗氧化活性

研究胶网藻（Dictyosphaerium sp.1A10）多糖的抗氧化活性并分析多糖的基本结构特征。采用超声辅助提取法对胶网藻多糖进行提取，并用DEAE-52纤维素柱层析和Sepharose CL-6B凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化，测定其 2，2-二苯基-1-苦基肼 [2，2-diphenyl-1-picrylhydrazyl，DPPH]、2，2''-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸 [2，2''-Azinobis-（3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate），ABTS]、羟自由基清除率和还原能力，通过紫外光谱（ultraviolet spectrum，UV）、红外光谱（infrared spectrum，IR）、高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）和高效凝胶色谱（high performance gel permeation chromatography，HPGPC）等技术进行基本结构分析。结果表明：（1）经过DEAE-52纤维素柱层析分离得到4个组分PC-1、PC-2、PC-3和PC-4，对抗氧化活性较高的多糖组分PC-4进行Sepharose CL-6B凝胶柱层析进一步纯化得到PCP-4；（2）胶网藻纯化多糖组分PC-4、PCP-4均具有一定的抗氧化能力；（3）胶网藻纯化多糖组分PCP-4的重均分子量（weight average molecular weight，Mw）为121 762 Da。多糖组分PCP-4含有吡喃糖和硫酸基。多糖组分PCP-4主要由鼠李糖、甘露糖和半乳糖醛酸组成，还有少量的葡萄糖醛酸、葡萄糖和半乳糖。     

油橄榄叶多糖的提取工艺优化及其理化性质和抗氧化活性

为增加油橄榄叶多糖的开发利用价值,以油橄榄叶为实验材料,采用正交试验优化油橄榄叶多糖（OLP）的提取工艺,高效凝胶渗透色谱-多角度激光光散射仪联用（HPGPC-MALLS）测定分子量,PMP柱前衍生高效液相色谱法分析OLP的单糖组成,并评价其抗氧化活性。结果显示,OLP的最佳提取工艺条件为料液比1:27.5 g/mL,温度95 ℃,提取时间3.5 h,在此条件下OLP的得率为2.75%;OLP的重均分子量（Mw）为25.36 kDa,数均分子量（Mn）为19.32 kDa,多分散系数为1.313;OLP主要由葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）和氨基半乳糖（GalN）组成,还含有鼠李糖（Rha）、阿拉伯糖（Ara）、木糖（Xyl）、甘露糖（Man）和氨基葡萄糖（GlcN）等单糖,各单糖的相对摩尔比为56.2:15.9:10.3:8.3:5.9:2.6:0.5:0.3;抗氧化活性实验结果发现,OLP具有较好的抗氧化活性,对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为0.422、0.302和0.268 mg/mL。本研究所得油橄榄叶多糖的提取工艺简单、得率高、抗氧化活性好,为油橄榄叶多糖的进一步研究和开发利用提供了重要参考。     

骏枣多糖提取工艺优化及其抗氧化活性

研究新疆阿克苏骏枣多糖的提取工艺条件及其抗氧化活性,采用超声波预处理（功率120W、时间30 min、温度60 ℃）辅助热水提取法提取骏枣多糖,以Box-Behnken试验设计结合响应面分析法优化了提取工艺条件,确定最佳工艺参数为热水提取温度83 ℃、液固比17∶1（mL/g）、提取时间4 h。此优化条件下,骏枣粗多糖得率为9.51%。骏枣粗多糖具有清除自由基的作用,当质量浓度为5.0 mg/mL时,对2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐自由基和1,1-二苯基-2-苦基肼基自由基的清除率分别达到54.29%和51.43%。     

竹叶多糖的组分及抗氧化活性分析

竹叶粉碎后经过高温水提醇沉得竹叶多糖粗品.用DEAE琼脂糖凝胶FF和丙烯葡聚糖凝胶S-100分离纯化出两种均一多糖BLP30-1、BLP30-2,并对这二种多糖进行组分分析.气相分析结果表明,两者都由岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖五种糖组成.采用尺寸排除色谱和激光光散射联用仪(SEC-LLS)测定分子量分别为2.9×1 04、2.1×l04u.对两种多糖进行抗氧化活性研究表明,其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基均有较高的抑制活性.     

红枣多糖羧甲基化修饰及其抗氧化活性研究

本研究对红枣多糖进行羧甲基化修饰,探究羧甲基化修饰红枣多糖的结构特征及抗氧化活性变化。以红枣粗多糖为原料,采用Sevage法脱蛋白,大孔树脂AB-8脱色处理,对除杂后的多糖进行羧甲基化修饰。以羧甲基取代度为指标,通过单因素和响应面试验对NaOH浓度、一氯乙酸添加量及温度进行优化,以修饰前后多糖对DPPH、羟基自由基的清除能力及其还原力和对Fe2+的螯合能力为指标,探究羧甲基化修饰对红枣多糖抗氧化特性的影响。结果显示,羧甲基化修饰最佳工艺参数为:反应温度70 ℃,一氯乙酸添加量3.5%,NaOH浓度3 mol/L,此条件下羧甲基化红枣多糖分子修饰取代度高达1.157。浓度5 mg/mL时,羧甲基化修饰的红枣多糖DPPH和羟基自由基清除率达93.83%和44.7%,还原力和对Fe2+的螯合能力分别为0.462和44.05%。红枣多糖抗氧化性的显著提升表明羧甲基化修饰可改善多糖的抗氧化性,可为红枣多糖的深入研究提供一定的理论依据。     

木枣多糖ZJP2的初步结构特征及抗氧化活性研究

本文经水提、醇沉、脱蛋白和脱色等工艺提取木枣粗多糖(CP),经DEAE-52离子交换层析和Sephadex G-100柱层析纯化得到单一木枣多糖组分(ZJP2),并对CP和ZJP2进行初级结构分析及抗氧化活性测定。结果表明:CP和ZJP2的酯化度分别为38.40%和47.10%,糖含量分别为71.95和91.29%,糖醛酸含量分别为51.05%和58.27%,分子量分别为59.1 ku和13.7 ku;化学衍生化结合GC分析表明ZJP2由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、半乳糖和半乳糖醛酸5种单糖组成,其相对摩尔比为4.5:26.1:1.4:11.9:18.1;碘-碘化钾试验和红外光谱分析证明ZJP2具有典型的多糖类结构特征,并且可能有较多的侧链和分支;体外抗氧化分析表明ZJP2的DPPH自由基和羟自由基清除力均强于CP,在样品浓度为6.0 mg/m L时,ZJP2的DPPH自由基清除率为71.34%,羟自由基清除率为75.45%,清除力与样品浓度呈明显的量效关系。     

新疆芜菁酸性多糖分离纯化、抗氧化活性研究及红外表征

目的 检测分离纯化的芜菁酸性多糖(Brassica rapaL.acidic polysaccharide,BRAP)的含量和纯度,并对其进行抗氧化能力检测和红外表征。方法 (1)经阴离子交换柱DEAE-650M、HW-55F色谱柱以及Sephacryl S-300色谱柱洗脱分离纯化芜菁多糖;(2)采取紫外-可见分光光度法及苯酚-硫酸法测定芜菁酸性多糖的含量;(3)经由测定芜菁酸性多糖羟基自由基(·OH)清除能力,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基(·DPPH)清除能力、金属Cu²⁺还原能力来评价其抗氧化活性,并与VC抗氧化能力进行对比;(4)应用红外光谱分析芜菁酸性多糖的化学键或官能团信息,通过高效凝胶渗透色谱法对芜菁酸性多糖的均一性分析。结果 芜菁酸性多糖的含量为55.47%;芜菁酸性多糖对·DPPH和·OH有一定清除能力,对金属Cu²⁺也有还原能力,但均比VC弱,红外光谱分析显示,芜菁酸性多糖中有多羟基醛糖的特征吸收峰以及与抗氧化活性相关的羟基。高效凝胶渗透色谱图显示芜菁酸性多糖为高纯度多糖。结论 新疆芜菁中有含量较为丰富且纯度较高的酸性多糖组分,且该成分具有较好的抗氧化活性。     

油茶饼粕多糖的分级及其抗氧化性评价

为探究油茶饼粕多糖的抗氧化活性,以12年生油茶果(饼粕)为试材提取油茶饼粕多糖,采用纤维素柱层析和葡聚糖凝胶柱层析方法分离多糖,并对各组分多糖进行抗氧化分析,选出抗氧化活性最佳的多糖,并将其与V_C、V_E进行复配,分析复配物的抗氧化活性。结果表明:在分离得到DT_A、DT_B、DT_C1、DT_C2、DT_D5个多糖组分中,DT_C1的分子量在10万Dal左右,且综合抗氧化能力最强。当其浓度为2.0 mg/mL时,DPPH自由基清除率可达80%以上。由Isobologram分析图可知,多糖(DT_C1)与V_C(1:0.162)、V_E(1:0.319)复配后,对DPPH自由基清除率的3个效应点都在相加线及95%可信限的左侧,理论IC_50add值与实验IC_{50 mix}值有显著性差异,并且相互作用指数都小于1,证实多糖(DT_C1)与V_C、V_E之间存在协同抗氧化效应,且两者均在1:1时复配效果最好。     

黔产皂角米多糖提取动力学及抗氧化活性研究

目的:以皂角米为原料,研究皂角米多糖的提取动力学及其抗氧化活性。方法:以Fick第一定律为基础,建立皂角米多糖的提取动力学模型,采用红外光谱对皂角米多糖进行结构分析,通过测定皂角米多糖对ABTS自由基、羟基自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、超氧阴离子自由基的清除能力来评价其抗氧化活性。结果:建立的皂角米多糖提取动力学模型计算值与实际测得数据吻合良好,符合一级提取动力学模型,其活化能为15.023 kJ/mol;红外图谱显示皂角米多糖含有甘露糖,为β-型吡喃多糖。抗氧化结果表明,皂角米多糖的抗氧化活性随着浓度的增大而增强。当浓度为5 mg/mL时,皂角米多糖对ABTS阳离子自由基清除率为71.82%,对羟基自由基清除率为83.36%,对DPPH清除率为84.00%,对超氧阴离子自由基清除率为86.11%。结论:建立了皂角米多糖提取的动力学模型,皂角米多糖具有较好的抗氧化活性。     

硫酸化修饰对红枣多糖结构及抗氧化活性的影响

目的：探究纯化红枣多糖ZJP-1和硫酸化红枣多糖S-ZJP-1的结构和抗氧化活性之间的关系。方法：以残次红枣为原料,经热水浸提、DEAE-52离子交换色谱及Sephadex-200葡聚糖凝胶柱层析纯化得到纯化红枣多糖(ZJP-1),通过氯磺酸—吡啶法硫酸化修饰获得红枣多糖硫酸化衍生物(S-ZJP-1)。结果：ZJP-1和S-ZJP-1均由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖3种单糖组成,但是比例有所不同。两种多糖具有多糖特征吸收峰,S-ZJP-1具有硫酸基的特征吸收峰,表示硫酸化修饰成功。ZJP-1和S-ZJP-1不具有三股螺旋结构,表观呈片状结构。活性试验结果证实多糖ZJP-1和S-ZJP-1对DPPH自由基具有显著的清除活性,并具有一定的还原力,当多糖质量浓度达到0.5 mg/mL时,DPPH自由基清除活性分别为40.4%和47.6%,还原力分别为0.419和0.531。结论：硫酸化修饰的红枣多糖抗氧化活性更高,是一种良好的天然抗氧化剂。     

桦褐孔菌多糖的分离纯化及其抗氧化活性测定

以桦褐孔菌为原料,测定其化学组分,并采用水提醇沉法提取桦褐孔菌粗多糖（IOP）。将获取的桦褐孔菌粗多糖进行脱蛋白、脱色素的初步纯化,然后利用DEAE-52纤维素层析柱及Sephadex-100凝胶柱对多糖提取液进行分离纯化,通过抗氧化活性筛选出活性较高的多糖组分,并通过高效液相色谱分析多糖组分的纯度。实验结果表明,桦褐孔菌子实体的化学成分组成丰富,其中多糖13.10%±0.31%、还原糖4.21%±0.40%、蛋白质2.70%±0.71%、灰分9.60%±0.31%。通过对桦褐孔菌粗多糖脱蛋白、脱色素的试验方法进行筛选,得到聚酰胺层析法为最佳的脱除方法。蛋白质的脱除率为93.1%、脱色率为75.8%,多糖的保留率为90.3%。IOP经过DEAE-52纤维素柱层析后得到四个单糖组分:IOP-1、IOP-2、IOP-3、IOP-4。对四个多糖组分进行抗氧化实验发现,IOP-2对DPPH自由基的清除率最高,清除率为81.9%。IOP-2经过Sephadex-100层析柱后获得两个多糖组分:IOP-2a、IOP-2b。对比其抗氧化活性,筛选出活性较高的多糖组分为IOP-2a。采用高效液相色谱法鉴定多糖组分IOP-2a,只检查出一个对称峰,说明IOP-2a为均一性多糖。