高选择性增菌培养基结合侧向层析免疫方法检测食品中沙门氏菌的有效性研究及评价

目的对高选择性增菌培养基结合侧向层析免疫方法 (Rapid Chek~?)快速筛选检测沙门氏菌方法的有效性进行研究及评价。方法参照GB 4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》、ISO 16140-2-2016《食品链的微生物学-可替代方法的验证方案》,对Rapid Chek~?方法检测食品中沙门氏菌进行了实验室内验证。结果 Rapid Chek~?方法与参照方法的相对准确性、相对特异性、相对灵敏度和相对检测限无差异。结论 Rapid Chek~?方法可以作为一种处理大量样本的日常快速检测方法。     

牛肉中孕酮的气相色谱/燃烧炉/同位素比质谱检测

建立了牛肉中孕酮的气相色谱/燃烧炉/同位素比质谱(GC/C/IRMS)检测方法。牛肉样品用乙腈振荡和超声辅助提取,经Na Cl脱水,有机相离心和旋转蒸发后以Zn Cl2脱脂,然后用LC-C18、LC-Si、LC-NH2固相萃取柱净化,过滤液经半制备液相色谱(Pre-HPLC)的C18柱纯化,最后分析物以GC/C/IRMS系统分析。牛肉中加标外源性孕酮δ13C值为-30.64±0.24‰(n=6),牛肉内源性孕酮δ13C值为-25.70±0.13‰(n=6),单因素方差分析(ANOVA,p值=2.23×10-140.05)显示,内源性孕酮和外源性孕酮的δ13C值存在显著差异性,且牛肉中加标外源性孕酮δ13C值与孕酮标准溶液的δ13C值无差异性。同时,经模拟实验可知,实际样品中内外源性孕酮混合物的δ13C值与外源性孕酮的δ13C值具有同源性。结果表明,本方法特异性和准确性好,GC/C/IRMS是鉴别激素来源的有效工具,该方法填补了国内鉴别激素来源技术空白。     

离子色谱法测定食品中的二氧化氯及其副产物

目的建立离子色谱法同步检测食品中消毒残留的二氧化氯及其副产物氯酸盐含量的分析方法。方法用超声波处理浸泡的水中的样品并振荡提取,经离心取上层液。采用离子色谱进行分析,采用AS-19色谱柱分离,20 mmol/L KOH溶液以1.0 mL/min流速等度淋洗,电导检测器检测,外标法定量。结果各化合物的质量浓度与其相应峰面积呈线性关系。检出限为0.05 mg/L。测定值的相对标准偏差为3.6%~8.9%(n=6),加标回收率在81.6%~92.5%之间(n=6)。结论利用离子色谱法检测食品中的二氧化氯及其副产物氯酸盐,方法准确、可靠、实用性强。     

2006~2016年山东口岸进境再生资源截获有害生物情况分析

目的 分析2006~2016年山东口岸进境再生资源疫情截获情况, 提出检疫监管的合理化建议。 方法 从截获有害生物年变化规律、再生资源类型、有害生物类别、来源地、分支局、检疫性有害生物等方面进行统计, 得出相关结论。结果 截获有害生物种次变化趋势分别呈现明显的两个高峰和低谷时间段。废纸、废塑料、废有色金属、废五金电器截获有害生物种类最多。昆虫、杂草截获种类最多, 昆虫截获种次最多。美国、日本、韩国、加拿大、英国位居截获来源地前5位。潍坊出入境检验检疫局、烟台出入境检验检疫局、淄博出入境检验检疫局、荣成出入境检验检疫局、黄岛出入境检验检疫局位居有截获记录分支局前5位。假高粱(及其杂交种)、豚草、三裂叶豚草、黑高粱、南方菟丝子、刺蒺藜草位居检疫性有害生物截获种次前6位。结论 山东口岸进境再生资源具有种类较多、来源较广、携带有害生物风险高且疫情复杂的特点, 建议综合运用多种手段提高再生资源有害生物疫情检出率, 有效保护国门生物安全。     

QuEChERS法-液相色谱-串联质谱法测定蔬菜中7种农药及其代谢物的残留量

样品经乙腈提取,C_(18)吸附剂和石墨化碳黑分散固相萃取净化,液相色谱-三重四极杆串联质谱在动态多反应监测模式下检测,基质匹配标准曲线外标法进行定量,建立了蔬菜中7种农药及其代谢物的多残留分析方法。在10、20μg/kg 7种农药及其添加物添加水平下,农药及其代谢物的平均回收率为71.9%~117.8%,相对标准偏差为0.8%~9.6%,定量限为0.2~10μg/kg。该方法简便、快速、灵敏,适用于蔬菜中多种农药及其代谢物的同时检测。     

玉米细菌性枯萎病菌EGase内切葡聚糖酶蛋白纯化研究初探

目的研究玉米细菌性枯萎病菌EGase内切葡聚糖酶蛋白纯化的方法。方法以玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartii subsp.stewartii)菌株为材料,分离纯化其内切葡聚糖酶Egase。制备EGase浓缩液,浓缩液经Sephradex~(TM)G-75凝胶过滤层析和DEAE-Sephorose Fast Flow阴离子交换柱层析等提纯步骤,获得了凝胶电泳均一的内切葡聚糖酶。结果经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测为一条电泳带,纯化后的EGase是单体蛋白,分子量约为72.3 k Da。Egase酶反应的最适温度是60℃,最适pH为5.0。结论本研究从玉米细菌性枯萎病菌中分离得到了一种新的内切葡聚合糖酶,对其部分性质进行了表述,为后续EGase基因的克隆及表达研究提供了研究基础。     

快速检测卡和酶联免疫试剂盒检测动物性食品中3种β-兴奋剂

目的评价快速检测卡和酶联免疫试剂盒检测动物性食品中3种β-兴奋剂的准确性。方法分别采用快速检测卡和酶联免疫吸附法检测动物性食品中盐酸克伦特罗(CLB)、莱克多巴胺(RAC)和沙丁胺醇(SAL)3种β-兴奋剂残留,并与液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)进行比较评价。结果盐酸克伦特罗速测卡和克伦特罗-莱克多巴胺-沙丁胺醇三联速测卡的检测结果与LC-MS/MS的符合率分别为83.3%和87.5%(CLB)、12.5%(RAC)、100%(SAL),CLB、RAC、SAL和β-兴奋剂ELISA试剂盒的检测结果与液相色谱-串联质谱法的符合率分别为94%、94%、76.2%和75%。结论试剂盒的准确度相对较高,但部分试剂盒的假阳性和假阴性情况明显。速测卡检测限较高,准确度较差,不满足一般检测要求。     

食品过敏原的分类及安全管理

本文综述了食品过敏原的分类及管理研究现状。介绍了食物过敏和食品过敏原的定义、食品过敏原的分类、国内外食品过敏原的安全管理措施等三个方面的研究进展, 并对加强食品过敏原管理提出建议。     

高效液相色谱-串联质谱法研究克伦特罗在 猪毛发中残留及蓄积代谢规律

目的 建立一种检测动物毛发中克伦特罗含量的高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, HPLC-MS/MS)并研究克伦特罗在毛发中的残留及蓄积代谢规律。 方法 选择成长期白猪(平均体质量50 kg), 饲喂克伦特罗日粮, 喂药周期为35 d, 停药32 d。分别于喂药后的d 2、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、32、35, 每个时间点随机采毛发样品3份, l.0 moL/L氢氧化钠溶液溶解, 叔丁醇:乙酸乙酯(3:7, v:v)震荡萃取, 过阳离子交换(mixed-mode cationic exchange, MCX)固相萃取柱净化后用LC-MS/MS法检测克伦特罗残留量。于休药后的d 0、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、26、27、30、32, 每个时间点简单随机直抽法处死3只白猪, 取毛发样品处理后用HPLC-MS/MS法检测克伦特罗残留量。结果 克伦特罗在毛发中的残留浓度随用药增加呈上升趋势(喂药d 35为866.75 μg/kg); 克伦特罗在毛发中的残留在休药后浓度先升高后慢慢降低, 休药d 32仍能够检出量为87 μg/kg。 结论 该方法操作简单、重复性好、回收率高, 适于检测动物毛发中的克伦特罗含量, 可为食用动物饲养过程的有效监管提供技术依据。     

解旋恒温基因扩增技术在螨虫鉴定中的应用前景

螨虫种类多,分布广,危害多样,已成为人们关注的对象。随着进出口植物、植物产品和食品的增加,其携带螨虫的风险越来越高,许多国家把螨虫作为检疫对象设置技术壁垒。由于螨虫体型微小,形态鉴定比较困难,一直是口岸检疫的一大难点。随着现代分子技术的发展,迫切需要建立快速、灵敏、准确的螨类检测方法。解旋酶恒温基因扩增技术(HDA)是一种简便、快速、高效、灵敏度高的体外恒温基因扩增技术。该技术依靠DNA解旋酶解开双链DNA、单链DNA结合蛋白(SSB)维持单链状态、DNA聚合酶催化靶片段的扩增。HDA不需要昂贵的仪器设备,适用于基层实验室。HAD能扩增微生物基因组DNA、病原菌DNA、质粒DNA和c DNA等,从其灵敏性、准确性和可操作性几方面来看,该方法适用于螨虫鉴定。