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为确定嗜水气单胞菌中可用于Western Blot的适宜内参蛋白,考察了重组酶RecA和3-磷酸甘油醛脱氢酶Gap-2在该菌不同培养阶段及培养条件下的表达稳定性.以嗜水气单胞菌基因组为模板扩增recA和gap-2基因,并对蛋白进行异源表达.利用亲和层析和凝胶过滤层析技术纯化蛋白,制备多克隆抗体.通过Western Blot技术研究了RecA和Gap-2蛋白在嗜水气单胞菌不同培养时间、不同培养温度和培养环境中铁离子浓度差异条件下的表达情况.结果显示,重组表达载体pET-28a-recA和pET-28a-gap-2构建成功,可与His标签融合表达.纯化后得到了纯度较高的RecA和Gap-2,以二者为抗原制备的多克隆抗体效价均达到1:512000.Western Blot结果表明,RecA在细菌生长稳定期表达情况与前期有所差异,而Gap-2蛋白在该菌不同培养时期、温度及铁离子浓度差异的环境中表达较为恒定.研究表明,Gap-2更适合作为嗜水气单胞菌Western Blot检测用内参蛋白. 相似文献
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目的 探究不同预冷温度对采后甜樱桃果实生理品质的影响,找出最适宜的预冷温度,进而推动甜樱桃产业化发展。方法 本实验分别将采后甜樱桃分别预冷至15、12、9、6、3、0℃后回温至室温,以不进行预冷处理为对照组,比较6种处理方式果实预冷和回温过程中的温度变化,并分别测定回温前后果实的色差、呼吸强度及乙烯释放量、硬度、可溶性固形物(TSS)、风味、感官评价,总酚、类黄酮、花色苷、维生素C(Vc)、可溶性蛋白、丙二醛(MDA)含量以及超氧阴离子产生速率(O2-)。结果不同预冷温度均可较好地保持果实外观及风味,能够降低甜樱桃果实呼吸强度与乙烯释放量,抑制果实TSS、MDA含量和O2-产生速率的上升,延缓甜樱桃果实硬度的下降,从而保持甜樱桃果实的外观品质,且有利于维持甜樱桃果实中的Vc、可溶性蛋白和花色苷含量,以0℃预冷效果最佳,感官评分最高。结论 预冷能够有效维持甜樱桃果实采后的品质,达到增加甜樱桃果实经济价值的作用。 相似文献
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《Planning》2015,(25)
基于生态位理论,界定了民族高等院校就业生态位的内涵,结合民族高等院校的班导师工作的实践,总结了民族高等院校人才培养过程中以"就业生态位"为核心的班导师工作实践的几点经验,提出了民族高等院校就业生态位定位选择策略。 相似文献
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本文建立同时检测海水鱼中腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤的高效液相色谱检测方法。对部分海水鱼可食用部分及内脏中的4种嘌呤含量进行检测。结果表明,当使用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以水-甲醇-冰乙酸-20%四丁基氢氧化铵(V/V/V/V=879/100/15/6)为流动相,设置流速为0.8 mL/min,柱温30℃,检测波长254 nm,进样量10μL时,4种嘌呤可完全分离且峰型较好。经方法学验证,得出此方法在0.1~400 mg/L范围线性关系良好,相关系数(R)在0.9998~1.0000之间,方法检出限范围0.0465~0.1056 mg/L。高效液相色谱检测方法精密度RSD在0.0200%~0.7000%之间,样品处理重复性腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤依次为1.2421%,0.9711%,0.8836%,1.9727%。加标回收率在94.2888%~102.9188%之间,适用于海水鱼中4种嘌呤的测定。经检测,不同种类海水鱼可食用部分(鱼眼睛、腹部鱼肉、背部鱼肉、鱼皮)嘌呤总含量由高到低依次为海鲈鱼、大菱鲆、金仓鱼、黄花鱼、美国红鱼、踏板鱼、鳕鱼。 相似文献
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研究大米米粉、糙米米粉、高钙菜糙米米粉和辣木糙米米粉的蒸煮特性、体外模拟环境下葡萄糖释放量及小鼠餐后血糖反应的差异。结果表明,相比于大米米粉,配方为100%的糙米粉的米粉,无论是在米粉品质方面还是在血糖控制方面都较优于大米米粉,其最终葡萄糖释放量要比大米米粉的葡萄糖释放量减少约40mg,而添加了辣木、高钙菜等含有功能性成分物质的糙米米粉对小鼠的餐后血糖值也有降低作用,其最终的葡萄糖释放量分别比大米米粉的葡萄糖释放量减少约11mg和33mg,且更能维持米粉的结构完整性,说明添加功能性成分对降低餐后血糖也有一定的作用;但是添加2%辣木和4%高钙菜的含量可能较少,与100%糙米米粉相比,其减缓葡萄糖释放的效果略不显著,100%糙米米粉更有利于人体血糖的调控。 相似文献
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目的研究不同浓度的氯化钙处理对室温下贮藏的鲜切芹菜生理品质的影响。方法分别采用化学滴定法、紫外分光光度法、称重法分析测定了鲜切芹菜可滴定酸、可溶性蛋白、还原糖、总糖、Vc、失重率等多项生理生化指标。结果芹菜经切割后在室温贮藏期间,可滴定酸、可溶性蛋白、还原糖、总糖、Vc含量呈现前期上升后期下降的趋势,失重率随贮藏期的延长逐渐上升;较低浓度氯化钙处理的可滴定酸、还原糖、总糖、Vc含量明显地高于对照和其他处理组,可溶性蛋白含量、失重率却低于对照组。结论氯化钙处理有效地保持了鲜切芹菜良好的生理品质,是一种简单、安全、有效的果蔬保鲜方法。 相似文献
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α-淀粉酶广泛分布于动物、植物和微生物中,能水解淀粉产生糊精、麦芽糖、低聚糖和葡萄糖等,是食品工业中应用最为广泛的酶制剂之一。从东北三省传统的家庭自制豆酱上获得纯培养真菌389株,通过可溶性淀粉平板初筛获得具有α-淀粉酶活性的菌株34株,其中曲霉属的真菌14株、青霉12株、毛霉2株、镰孢菌2株、帚霉1株、犁头霉1株、木霉2株。米曲霉(Aspergillus oryzae)、橘灰青霉(Penicillium aurantiogriseum)和疣状青霉(Penicillium verrucosum)出现频率较高,是豆酱发酵过程中产生α-淀粉酶的优势种群。 相似文献