酶解和冻融辅助超声提取光合细菌中辅酶Q10的研究

研究了酶解及冻融辅助超声提取光合细茵中辅酶Q10的最佳工艺条件,建立了辅酶Q10高产光合菌株的快速筛选方法.结果表明,超声可有效破碎细胞,以提取胞内辅酶Q10,而结合酶解及冻融可以达到更好的效果,在优化条件下,辅酶Q10的提取率分别提高5.1%和9.4%.     

HPLC法监控辅酶Q_0生产的氧化反应

利用反相HPLC法监控氧化反应中辅酶Q0的含量,从而确定氧化反应终点。色谱条件采用C18反相柱,甲醇-水(8∶2)为流动相,检测波长237 nm,流速0.8 mL/min,柱温35℃,外标法定量。通过跟踪监测,发现3,4,5-三甲氧基甲苯氧化反应1 h即达反应终点。本法快速、准确、选择性好,可实现对生产的监控。     

辅酶Q10的波谱学特征和结构确证

对辅酶Q10的红外(IR)、紫外(UV)、质谱(MS)、氢氢相关谱(1H-1HCOSY)、碳谱(13CNMR,DEPT)、碳氢相关谱(HMQC)、碳氢远程相关谱(HMBC)予以解析并进行了报道,对所有的1HNMR和13CNMR谱信号进行了归属;讨论了红外特征吸收峰所对应的官能团的振动形式.     

抗衰老保健食品中白藜芦醇和辅酶Q10的含量测定

建立了同时测定抗衰老保健食品中白藜芦醇和辅酶Q10的含量的HPLC方法。采用Welch materials C18液相色谱柱,甲醇∶异丙醇(55∶45)为流动相,流速设定为1 mL·min-1,检测波长为PDA定时波长(0.00,306.0)(6.00,306.0)(6.01,275.0)(20.00,275.0),实现了白藜芦醇和辅酶Q10的良好分离分析。白藜芦醇的线性范围为0.52～156.00μg·mL-1,r=0.9999;辅酶Q10的线性范围为0.49～195.52μg.mL-1,r=0.9999。平均加标回收率及RSD分别为97.70%(RSD 0.6%)和97.40%(RSD 0.4%)。本方法灵敏度高、选择性好、操作简单,可方便地用于检测抗衰老类保健食品中白藜芦醇和辅酶Q10的含量。     

硬脂酰辅酶A去饱和酶1基因表达对草原安格斯牛血液脂肪酸组成的影响

研究硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-coenzyme A desaturase 1,SCD1)基因表达对草原安格斯牛血液脂肪酸组成的影响,采集38头平均体质量(698±34)?kg、48月龄草原安格斯牛血液样品,测定其脂肪酸组成与含量,采用实时荧光定量聚合酶链式反应测定SCD1基因表达量,一代测序技术检测SC...     

补料发酵生产辅酶Q10的研究

目的研究酵母菌HY-05发酵生产辅酶Q10提高产量的方法。方法研究不同初糖浓度及补加方式，补加玉米浆和控制溶氧对酵母菌发酵过程中菌体量和辅酶Q10产量的影响，确定辅酶Q10补料分批发酵的最佳条件。结果酵母菌HY-05产辅酶Q10的量达到156．2mg／L，与不补料相比产量提高了58．1％。结论此法能提高酵母菌HY-05发酵生产辅酶Q10的产量。     

不同的壁材对辅酶Q_(10)纳米脂质体包埋效果的影响

辅酶Q10是一种膳食补充剂或营养品,在人体细胞呼吸链的电子传递中起重要作用,采用纳米胶囊技术制备辅酶Q10纳米脂质体可提高其生物利用率。本文以包封率、产率、透光率(T500nm)和贮存稳定性(包括产品T500nm的变化以及芯材辅酶Q10的保留率)为评定指标,选用乙醇注入-超声法制备了包埋效果和贮存稳定性都较好的辅酶Q10纳米脂质体。结果表明,以蛋黄磷脂作为主要壁材制得产品的包埋效果及贮存稳定性均优于大豆磷脂,适量胆固醇以及吐温80的添加可显著改善包埋效果,壁材的最佳配比为:磷脂:胆固醇:吐温80=25:4:18(W/W),在最佳配比下将辅酶Q10与磷脂比提高至20:25(W/W,相应载量为40%)可制得包封率及保留率均高于95%的产品。     

复方林蛙油辅酶Q10口服液制备工艺研究

目的：研究林蛙油的水解工艺和辅酶Q10的纳米化工艺,制备出质量稳定、口味适宜的复方林蛙油辅酶Q10保健口服液。方法：通过正交试验,确定胰蛋白酶和胃蛋白酶水解林蛙油的最佳工艺;采用纳米微乳制剂,增加辅酶Q10的水溶性。结果：将含量为1%的林蛙油经过溶胀、匀浆、煮沸等预处理,通过三因素三水平正交试验,得到了双酶法水解林蛙油的最佳工艺条件,即：以1∶20的酶与底物比加入胰蛋白酶,50℃、水解5h后,以1∶10的酶与底物比加入胃蛋白酶,60℃、p H=3.5,水解8h后,加入辅酶Q10的纳米化制剂,最终进行口味调配。结论：该双酶法水解工艺可最大限度地水解林蛙油组织蛋白,并提高林蛙油的溶解性。与辅酶Q10纳米乳剂调配后制备的口服液溶解性好、澄明度佳、口味适宜、工艺稳定,适合大规模生产。     

热带假丝酵母生产辅酶Q10酵工艺的优化

以热带假丝酵母(Candida tropicalis)AS 2.1387为出发菌株,对发酵培养基组分和发酵条件进行优化,得到了最佳的培养基组成为葡萄糖35g/L,酵母膏6g/L,蛋白胨4g/L,硫酸铵1.0g/L;最佳发酵条件为发酵温度30℃、发酵时间48h,装液量60mL/250 mL,初始pH值为6.0.同时,还研究了对羟基苯甲酸、胡萝卜汁和番茄汁对酵母菌AS 2.1387生物量和辅酶Q10合成的影响,当添加0.15%对羟基苯甲酸、0.6%胡萝卜汁、0.4%番茄汁时,能大幅度促进辅酶Q10的合成,最终使辅酶Q10达到15.533mgL,比优化前提高了15.28%.     

甲酸脱氢酶基因在大肠杆菌Rosetta中的高效表达

甲酸脱氢酶是氧化还原酶辅酶NAD(P)~+和NAD(P)H再生循环体系中的关键酶。实验中,用PCR方法扩增了假丝酵母Candida boidinii中甲酸脱氢酶基因(fdh),分别构建了诱导型表达载体pUC-dh和pET- fdh,以E.coli Rosetta为表达宿主,获得了能够高效表达甲酸脱氢酶的重组菌。经诱导后重组菌Rosetta/pET- fdh的FDH比酶活为0.399U/mg(蛋白),Rosetta/pUC-fdh的FDH比酶活为0.163U/mg(蛋白)。经SDS- PAGE分析,Rosetta/pET-fdh和Rosetta/pUC-fdh表达的FDH蛋白分别占菌体可溶性总蛋白的17%和10%,实现了fdh基因在Rosetta中的高效表达。研究中所构建的重组菌为氧化还原反应中的辅酶再生奠定了良好的基础。