一种姜黄素类天然化合物的全合成研究

基于姜黄素类天然化合物1-(4′-羟基-3′-甲氧基苯基)-7-(4″-甲氧基)-5-羟基-3-庚酮的多种生物药理活性,对其合成方法进行了探索。以香草醛和和茴香醛为原料,经过Knoevenagel反应、还原、酯化、氧化和缩合等主要反应,合成了目标化合物,并针对各步反应条件进行了优化,反应总收率为12.1%;目标产物及中间体的结构均经过质谱和1 H NMR核磁共振波谱进行了表征。该合成方法具有原料廉价易得、操作简便等优点,具有较高的工业价值。     

姜黄素对采后马水桔保鲜效果的研究

目的 以阳春马水桔为试材, 研究了姜黄素保鲜剂对马水桔保鲜效果的影响。方法 将马水桔果实用姜黄素保鲜剂(含姜黄素0.05%, 黄原胶0.06%)浸果处理1?3 min后, 在贮藏库温度8±1 ℃及相对湿度85%~90%的条件下贮藏。结果 采用姜黄素保鲜剂处理的马水桔果实, 经90 d贮藏后, 果实病烂率为3.8%~4.1%, 失重率为3.76%~4.06%, 均显著低于对照, 果实主要营养成分总糖、可滴定酸、Vc及可溶性固形物的损失也明显低于对照。结论 该研究为姜黄素应用于采后果实的保鲜提供了依据。     

红曲霉提取姜黄素影响因子的设定研究

姜黄素是从姜黄根茎中提取的生物活性物质,具有抗氧化、抗炎、抗凝、降脂等多种功效.利用红曲霉发酵从姜黄粉末中提取姜黄素,通过对发酵过程中不同料液比、营养比、发酵时间、pH的研究,确定最佳工艺条件为:料液比为0.1∶50,营养比为1/4,发酵时间为4d,pH为5.5,培养温度为30℃,转速为70r/min,装液量为50mL/150mL,在此条件下产品得率为1.785％.     

姜黄素对转化生长因子-β1诱导的乳腺癌MDA-MB-231细胞基质金属蛋白酶-9表达及其侵袭能力的影响

目的研究姜黄素对转化生长因子-β1(Transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)诱导的人乳腺癌MDA-MB-231细胞基质金属蛋白酶-9(Matrix metallopeptidase-9,MMP-9)表达及其侵袭能力的影响,探讨姜黄素在防治TGF-β1诱导的乳腺癌侵袭转移中可能的作用机制。方法采用CCK-8法检测姜黄素对MDA-MB-231细胞的细胞毒性作用。将MDA-MB-231细胞分为阴性对照组(无血清RPMI1640培养基/DMSO)、TGF-β1处理组(无血清RPMI1640培养基/DMSO+10 ng/ml TGF-β1),姜黄素+TGF-β1处理组(无血清RPMI1640培养基+5、7.5、10μmol/L姜黄素+10 ng/ml TGF-β1)。处理24 h后,采用侵袭小室试验观察细胞的侵袭能力;处理不同时间后,采用Western blot法检测细胞MMP-9、p-Smad2、p-ERK1/2以及p-p38的表达,明胶酶谱法检测各组细胞上清液中MMP-9的活性变化;以ERK特异性抑制剂PD98059、p38特异性抑制剂SB202580、姜黄素和/或TGF-β1处理细胞48 h,采用Western blot和明胶酶谱法检测MMP-9的表达。结果低浓度姜黄素(≤10μmol/L)对MDA-MB-231细胞无明显的细胞毒性作用;姜黄素呈剂量依赖性明显减少了TGF-β1诱导的细胞穿膜数量(P<0.001);姜黄素可显著抑制TGF-β1诱导的MDA-MB-231细胞MMP-9、p-Smad2、p-ERK1/2及p-p38蛋白的表达,且呈浓度、时间依赖性(P<0.05);姜黄素随浓度的增加,对TGF-β1诱导的MDA-MB-231细胞MMP-9活性的抑制作用明显增强(P<0.05);PD98059抑制MMP-9蛋白表达及活性的作用与姜黄素相似,而SB202580对MMP-9无明显影响。结论姜黄素可能通过TGF-β/Smad、TGF-β/ERK信号通路下调TGF-β1诱导的MMP-9的表达及其活性,从而抑制肿瘤的侵袭能力。     

人松弛素H2类似物在毕赤酵母中的高效表达及其活性

目的利用毕赤酵母表达系统高效分泌表达人松弛素H2类似物(Human relaxin-2 analogue,HR2),并检测其生物活性。方法通过密码子优化合成HR2基因,构建重组表达质粒pPICZαA-HR2,转化毕赤酵母菌GS115,甲醇诱导表达,并对表达产物进行Tricine-SDS-PAGE和Western blot分析。表达产物经超滤和柱层析纯化后,切除人工C肽,检测其生物活性。结果经双酶切鉴定和测序证实,重组表达质粒pPICZαA-HR2构建正确;Tricine-SDS-PAGE分析显示,表达的重组蛋白相对分子质量约6 500,表达量占菌体总蛋白的47.6%,为451μg/ml,且为分泌表达;Western blot分析显示,重组蛋白具有良好的反应原性;纯化的重组蛋白纯度达96%;经检测C肽切除的重组HR2对THP-1细胞具有刺激活性。结论成功在毕赤酵母GS115中高效分泌表达了重组松弛素H2类似物,并具有一定的生物活性。     

Ⅰ型聚酮类天然产物中利用点突变产生类似物的研究

点突变是指通过聚合酶链式反应（PCR）等方法向目的DNA片段中引入所需变化（通常是表征有利方向的变化）,包括碱基的添加、删除、改变等。通过构建发生突变的质粒利用遗传转移的方法同源重组到野生型基因组中,使得氨基酸改变从而引起蛋白功能发生变化,获得鉴定正确的突变株后发酵筛选结构类似物。聚酮类天然产物在生物合成过程中,其聚酮链会发生若干步氧化还原反应,通过点突变的方法失活该蛋白,从而跳过该步氧化还原反应的作用,产生PKS骨架上的改变,从而得到结构类似物。     

等离子体辅助处理对鹰嘴豆淀粉-姜黄素复合物结构和功能性质的影响

目的 探究等离子体辅助处理对鹰嘴豆淀粉-姜黄素复合物结构及功能性质的影响。方法 采用介质阻挡等离子体技术辅助制备了鹰嘴豆淀粉-姜黄素复合物,运用扫描电子显微镜、傅里叶红外光谱仪与X-射线衍射仪等仪器手段表征了复合物微观结构、淀粉双螺旋结构和晶体结构,采用体外模型研究了淀粉消化特性。 结果 随着等离子体改性时间的增加,淀粉与姜黄素的复合指数逐渐升高,在等离子体处理90 s（电压60.0 V、电流1.0 A）时二者的复合指数最高为28.69%±2.51%,远高于对照组（8.50%±0.78%）。红外光谱显示改性后的淀粉与姜黄素之间氢键作用力增强,且随着等离子体改性时间的延长,特定波数出峰比值R1022/995由0.98降低至0.88,表明改性淀粉与姜黄素复合后的淀粉双螺旋结构有序性逐渐增加;并且复合物的结晶度略有上升,预示着姜黄素的晶体结构在复合物中的占比增加。淀粉体外消化实验表明,与对照组相比,等离子体辅助制备的复合物中淀粉消化速率和程度明显降低,且随着姜黄素复合指数逐渐升高,一阶动力学拟合的消化速率k值由0.085大幅度下降至0.029,快消化淀粉含量下降,慢消化淀粉和抗性淀粉含量都显著升高。结论 介质阻挡放电等离子体辅助处理显著提高了鹰嘴豆淀粉与姜黄素的复合率,本研究拟为拓展等离子体改性技术在制备淀粉-多酚复合物中的应用提供理论基础。     

烯虫酯在储粮害虫防治中的研究和应用进展

储粮害虫对粮食及其制品造成的损失以减重、品质劣变为主。目前对储粮害虫防治主要使用熏蒸剂、防护剂等化学防治方法。随着害虫对化学杀虫剂的抗性不断增强,化学防治遇到前所未有的挑战。欧美国家已将昆虫生长调节剂引入害虫防控之中,其中包括保幼激素类似物-烯虫酯(methoprene)。本文综述了国内外对烯虫酯的研发历程、烯虫酯对储粮害虫的防控效果、昆虫的烯虫酯抗性对其防控效果的影响、保幼激素及其类似物作用机理、烯虫酯商业应用前景,以期为今后国内开展烯虫酯研究和应用提供参考。     

酒精诱导氧化应激小鼠模型建立及姜黄素抗氧化活性的初步研究

目的建立酒精诱导的氧化应激小鼠模型,对姜黄素的抗氧化活性进行初步评价,探讨补充生物活性因子的抗氧化功能评价方法。方法8周龄,昆明小鼠60只,动物房适应1周,按体重随机分为5组。实验周期内,每日按0.2ml/10g·BW给予各组实验小鼠连续灌服相应剂量受试物。实验结束时,处死全部小鼠,取血,测定肝脏相关生化指标。结果酒精模型组血浆和肝脏谷胱甘肽过氧化酶GPx的酶活性均显著低于正常对照组(P0.05);肝脏蛋白质羰基含量(PCO)显著高于正常对照组(P0.05)。结论长期摄入低浓度酒精,可以诱导建立氧化应激小鼠模型;实验中姜黄素的抗氧化活性得到初步证实;蛋白质羰基含量的测定显示,其可有效补充生物活性因子抗氧化功能评价方法。     

微波萃取-吸附分离法提取姜黄素的研究

介绍了采用微波辅助浸提和S-8大孔树脂吸附分离法从姜黄中提取姜黄素的新方法。研究表明,微波浸提的最佳工艺条件为：75％乙醇(体积分数)作为提取剂,料液比1：30(质量体积比),微波辐射功率360W,辐射时间60s,姜黄素提取率最高。采用S-8大孔树脂对姜黄浸提液进行进一步吸附分离,获得了纯度较高的天然色素产品姜黄素。