呋喃西林代谢物酶联免疫吸附测定方法的建立及性能测定

建立动物源性食品中呋喃西林代谢物酶联免疫吸附测定方法。采用自制的呋喃西林代谢物抗原、抗体为基础原料,通过优化反应条件,建立间接竞争酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)检测方法,并对方法的性能进行测定。结果表明:建立的检测方法在0.03μg/L^2.43μg/L范围内呈线性,检测灵敏度为0.03μg/kg,鱼肉组织样本、虾肉组织样本的检测限分别为0.236、0.229μg/kg,回收率均在75%~120%之间,批内、批间变异系数均在15%以下,通过与标准方法液相色谱-串联质谱(high performance liquid chromatography-mass spectrum/mass spectrum,LC-MS/MS)对比验证,两种方法用于鱼肉样本的检测呈现较好的相关性,相关系数R2为0.9944。建立的呋喃西林代谢物酶联免疫吸附测定方法的灵敏度、准确度和精密度等参数均符合我国动物源性食品中兽药残留检测方法的规定。     

呋喃西林代谢物单克隆抗体的制备及免疫学特性鉴定

为建立呋喃西林代谢物氨基脲（semicarbazide，SEM）的免疫学检测方法，采用碳化二亚胺法成功合成人工免疫抗原SEM-牛血清白蛋白（bovine serum albumen，BSA）（SEM-BSA），并用该抗原免疫BALB/c小鼠，采用聚乙二醇介导的细胞融合技术制备SEM的单克隆抗体（SEM mAb），采用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单抗，并对其效价、敏感性、特异性和亲和力等免疫学特性进行鉴定。结果表明：成功制备SEM单克隆抗体SEM-3D9，抗体效价达到1∶5×106，敏感性半抑制质量浓度为0.42 μg/L，亚型为IgG1，亲和常数Ka=2.1×108 L/mol，与呋喃唑酮代谢物2-NP-3-氨基-2-恶唑酮、呋喃它酮代谢物2-NP-5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮类似物的交叉反应率（cross reaction，CR）均小于0.01%，与呋喃妥因代谢物2-NP-1-氨基-2-乙内酰的CR为0.016 8%，特异性良好。     

甲壳类水产品中氨基脲产生及控制方法研究进展

氨基脲(semicarbazide,SEM)用作代谢标记物以指示抗生素呋喃西林的使用,也可以在非呋喃西林来源中检测到。本研究综述了水产甲壳动物及其产品中氨基脲的毒害性、产生途径及检测方法,对防控甲壳类水产品中氨基脲污染提供了方法建议,应加强兽药监督管理,科学精确检测SEM,控制非呋喃西林源SEM污染,同时加强SEM产生机制研究,以期对甲壳类水产品中呋喃西林使用情况作出客观监控。