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目的:建立一种快速、高效、可视化的细菌多黏菌素耐药基因mcr-1检测方法,为其基层检测的展开提供依据和便利。方法:利用重组酶聚合酶扩增结合胶体金侧向流试纸条技术(Recombinase polymerase amplification combined with a lateral flow dipstick,RPA-LFD),辅以手持式胶体金读数仪;根据mcr-1基因保守序列设计合成一对特异性RPA引物,通过对反应条件和体系的优化,以及特异性试验、灵敏度试验、模拟食样试验和实际样品试验,成功建立了可视化定量检测细菌多黏菌素耐药基因mcr-1的RPA-LFD方法。结果:在引物浓度400 nmol/L,引物比例1:1时,该方法最佳反应条件为Mg2+浓度14.0 mmol/L,反应温度37℃,反应时间20 min;灵敏度好,标准曲线方程为y=0.117x+0.051,定量限为101~108 copies/μL,检出限为101 copies/μL,比PCR法低一个数量级且模拟样品检出结果与PCR法一致。利... 相似文献
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基于Open SEES有限元分析计算平台,建立了能够考虑装配施工缝影响的装配式钢-混凝土组合剪力墙结构的分段纤维模型,通过与足尺装配式钢-混凝土组合剪力墙的试验研究结果对比,得出数值分析结果与试验结果吻合较好,验证了该模型各关键参数的合理性。通过进一步参数分析,研究了钢筋黏结滑移、剪切效应、约束混凝土面积减小等因素对装配式钢-混凝土组合剪力墙结构抗震性能的影响,通过该因素使得建模过程中体现了"装配式建造"因素。计算结果表明,上述因素对结构抗震性能影响不显著,建议在进行此类结构的抗震性能分析中可以忽略。 相似文献