辛酸TSEPIP荧光衍生物制备及荧光光谱研究与分析应用

合成了荧光衍生试剂1-[2-(对甲苯磺酸酯)乙基]-2-苯基咪唑[4,5-f]9,10-菲(TSEPIP),经衍生化和固相萃取制得了TSEPIP的辛酸衍生物(TSEPIP-C8)。研究了TSEPIP-C8在包括溶剂极性、温度、卤素离子、重金属离子等不同的溶液环境因素影响下的荧光光谱性质,为高效液相色谱荧光分析检测提供了依据。在EclipseXDB-C8反相色谱柱上,在380nm检测波长下采用梯度洗脱,实现了26种脂肪酸(FFA)TSEPIP衍生物的基线分离,应用该法完成了丹参中脂肪酸的含量分析。借助柱后串联质谱APCI大气压化学电离源正离子模式,能够实现各组分的快速定性。26种脂肪酸的线性回归系数均>0.9996,检出限为3.824～47.13fmol(进样量10μL,信噪比为3:1)。     

Semi-LC/MS技术快速定量分析黄芪样品中黄芪甲苷含量

为了测定黄芪中的黄芪甲苷含量,应用半高效液相色谱-质谱串联技术（Semi-LC/MS）,以薯蓣皂苷为内标化合物,仅用一段色谱保护柱分离掉大部分干扰性成分,同时使目标化合物富集,采用Waters公司的多反应监测（MRM）扫描模式检测。结果表明：黄芪甲苷在2.85~57.0 mg/L的范围内线性关系良好,稳定性和重复性实验RSD<3%,样品回收率达98.9%。Semi-LC/MS方法可以对黄芪样品中黄芪甲苷进行快速定量分析,是一种黄芪甲苷的简单、高效、灵敏的定量检测方法。     

新型荧光衍生试剂2-(2-(1-芘基)-苯并咪唑)-乙基对甲苯磺酸酯的制备及应用研究

合成表征了标题化合物(PBITS)。在DMF溶剂中以K2CO3作催化剂,PBITS与脂肪酸在90℃条件下反应40 min,可获得稳定的荧光产物。以PBITS为柱前衍生试剂,建立了20种饱和脂肪酸的高效液相色谱分析方法。激发和发射波长分别为350和402 nm,各脂肪酸检出限为11.4~29.3 fmol。对瑞香狼毒根中游离脂肪酸测定结果满意。     

超声辅助提取-高效液相色谱法测定荷叶中的生物碱

采用超声提取法提取荷叶中的O-去甲荷叶碱、N-去甲荷叶碱、荷叶碱和莲碱4种主要的生物碱,建立HPLC分析方法进行评价,为荷叶及相关产品的质量控制提供参考。选用Welch Materials C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(含0.1%三乙胺)为流动相进行梯度洗脱,实现了O-去甲荷叶碱、N-去甲荷叶碱、荷叶碱和莲碱4种生物碱的同时基线分离。在0.1～50μg/mL范围内,O-去甲荷叶碱(R=0.999 8)、N-去甲荷叶碱(R=0.999 9)、荷叶碱(R=0.999 8)和莲碱(R=0.999 8)具有良好的线性关系,检出限分别为1.87、2.22、2.34和1.88 ng/mL(S/N=3∶1)。     

10-乙基吖啶酮-2-磺酰氯的合成工艺改进

以N-苯基邻氨基苯甲酸为原料,经环化、烷基化、磺化三步反应制得柱前衍生化试剂10-乙基吖啶酮-2-磺酰氯。总收率为53．4％。重点探讨了10-乙基吖啶酮-2-磺酰氯纯化方法和重结晶溶剂的选择。目标化合物的结构经核磁、红外、质谱分析确证。     

花椒游离脂肪酸的微波快速提取与衍生化HPLC荧光检测方法研究

建立了花椒中游离脂肪酸的微波快速提取技术,并采用苯并[b]吖啶酮-5-乙基对甲苯磺酸酯(BAETS)作为柱前衍生试剂,建立了19种长链饱和与不饱和游离脂肪酸的衍生化HPLC荧光检测分析方法.微波提取功率700W,溶剂为体积比1∶1的氯仿/甲醇,70℃提取10min,可达近100％提取率.采用色谱柱Eclipse XDB-C8(4.6mm× 150mm,5μm),酸性乙腈/水流动相进行梯度洗脱,HPLC荧光激发和发射波长分别为273nm和505nm.同时进行在线质谱辅助鉴定(APCI-MS),更提高了HPLC荧光定量的准确度.结果表明,微波提取快速高效,分析方法线性良好,线性范围14.286～0.0139μmol/L,最低检出限为0.636nmol/L,回收率在87.60％～ 106.59％之间.本方法快速、准确、高灵敏,可作为花椒相关样品的标准化检测方法.     

微孔草籽油脂肪酸的HPLC-MS分析

采用柱前衍生-高效液相色谱荧光检测法(HPLC-FLD)分析了超临界CO2萃取得到的微孔草籽油的脂肪酸成分。用荧光衍生试剂1-[2-(对甲苯磺酸酯)乙基]-2-苯基咪唑[4,5-f]9,10-菲(TSPP)作为柱前衍生试剂,对39种饱和与不饱和脂肪酸标准品进行衍生,经梯度洗脱实现了39种脂肪酸衍生物完全分离,使用外标法定量,建立了同时测定17种脂肪酸绝对含量的方法。结果表明,微孔草籽油中油酸、亚油酸、亚麻酸相对含量分别是29.09%、23.85%、20.25%;不饱和脂肪酸占总脂肪酸的相对含量为73.19%。     

10种芳香化合物的分离及紫外和荧光光谱研究

采用反相高效液相色谱梯度洗脱,在SinoChrom ODS-BP型色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm)上,实现了包括5种荧光衍生试剂母体分子(咔唑、1,2-苯并-3,4-二氢咔唑、吖啶酮、2-苯基-1-氢-菲[9,10-d]咪唑、吡唑并[3,4-b]-7-甲基喹啉)在内的10种含氮芳香化合物的基线分离。通过测定每种物质的紫外吸收曲线,得到了它们的最大紫外吸收波长和摩尔吸光系数(ε),并探讨了分子结构、摩尔吸光系数(ε)和灵敏度之间的关系。扫描了它们的荧光激发和发射光谱,得出了它们的最大激发波长和发射波长。     

毛细管气相色谱内标法测定沙棘油中的脂肪酸

建立了以十七烷酸甲酯为内标物,用毛细管气相色谱同时测定沙棘油中六种脂肪酸（棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸）的方法。样品经氢氧化钾-甲醇皂化、三氟化硼-甲醇酯化后使生成相应的脂肪酸甲酯,以DM—FFAP毛细管柱分离,火焰离子化检测器测定。用保留时间定性,内标法定量。结果表明,在所选择的色谱条件下,上述脂肪酸在10min内获得较好的分离;六种脂肪酸的峰面积与其质量浓度有良好的线性关系,相关系数均大于0．9998;样品加标回收率（n=6）为92．1％～101．4％;相对标准偏差为2．37％～4．19％;最低检出限为4．0mg／L。该方法操作简便、快速、准确,适合批量样品的测定。     

深海鱼油中脂肪酸的柱前衍生-高效液相色谱串联质谱分析

用1-2-(对甲苯磺酸酯)乙基-2-苯基咪唑4,5-f9,10-菲(TSEPIP)作为柱前荧光衍生试剂,在EclipseXDB-C8(4.6×150mm,5μm,Agilent)反相色谱柱上,采用梯度洗脱在检测波长为380nm(激发波长为260nm)的条件下,实现了阿拉斯加深海鱼油中饱和脂肪酸含量的外标法定量测定。26种饱和脂肪酸的线性范围是200.0pmol～48.83fmol,线性相关系数均大于0.9996,检测限为3.824～47.13fmol(信噪比为3:1测得,S/N3:1)。经柱后串联质谱大气压化学电离源(APCI)正离子模式实现了各种饱和与不饱和脂肪酸衍生物的质谱鉴定,进而通过峰面积归一化法得出了所有饱和与不饱和脂肪酸的相对含量。结果表明,深海鱼油主要含有C12～C22的脂肪酸,共鉴定出25种脂肪酸,其中不饱和脂肪酸含量占69.71%(峰面积百分比,下同),特别是具有重要生理作用的多不饱和脂肪酸,如C20:5:5,8,11,14,17-二十碳五烯酸(5,8,11,14,17-eicosapentaenoicacid,EPA,16.62%),C22:6:2,5,8,11,14,17-二十二碳六烯酸(2,5,8,11,14,17-docosahexenoicacid,DHA,12.31%)。