淀粉为主原料L-苹果酸发酵的较佳培养基研究

讨论了以淀粉基质为主原料发酵生产L—苹果酸的条件。通过正交试验,得到了一较佳的培养基:淀粉122%,豆饼粉1.0%,玉米粉2%,FeSO_4·7H_2O·700ppm,装液量(500毫升)70毫升。在此条件下,经5天发酵,L—苹果酸的积累量为7～7.6克/100毫升。     

酒中致癌物氨基甲酸乙酯的研究

<正> 早在1943年和1968年Nattleship和Mirvish等人先后提出了氨基甲酸乙酯具有致癌作用。在当时,这一结论没有受到人们的普遍关注。七十年代,Ough等人开展了这方面的研究工作,并先后发表了几篇论文,但仍未引起国际社会的重视。直到1985年后期,证实酒精饮料中氨基甲酸乙酯的致癌作用才受到世界卫生组织及加拿大、法国、意大利、日本等国的极大重视,并对此开展了广泛的研究。研究结果表明,在未经微生物发酵的食品中没检出氨基甲酸乙酯;而经微生物发酵的各种酒中都不同程度地     

麦汁高温煮沸对啤酒风味的影响

麦汁高温煮沸是在一个小型实验工厂中进行的,该工艺需配有一个平衡槽,二台板式换热器,一套蛇状保温管及一个“闪式”蒸发槽。其控制条件是:温度120～150℃,煮沸时间1～15分钟,蒸发量0～10%。最初选择135℃、煮沸6分钟的操作条件与100℃一次煮沸60分钟的麦汁苦味相当。高温煮沸的麦汁凝结性氮较低,颗粒沉淀增加,而多酚含量和α—酸的利用大致相同。啤酒贮存期正常。出乎意料的是缩短煮沸时间,     

古细菌Pyrococcus furiosus高嗜热α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的分泌表达

该文将大肠杆菌表达载体pKK223—3中含tac启动子的片段以BamH I、EcoR I酶切后接入表达载体pET28a中，构建成新的表达载体pE tac，通过PCR扩增获得p.furiosus胞外α-淀粉酶完整结构基因，接入PEtac中，转化大肠杆菌JM109。在IPTG诱导下，转化子周质中能测出明显酶活，证明Pyrococcus furiosus的胞外α-淀粉酶能在自身信号肽引导下分泌到大肠杆菌细胞周质中。重组酶最适pH为4．5，最适温度为95℃，重组酶经121℃保温1h，酶活仍能保持50%以上，性质与由p.furiosus自身分泌的胞外α-淀粉酶相似。     

饮料酒中氨基甲酸乙酯测定方法的研究

本研究用GC/MS法分离和测定了饮料酒中的氨基甲酸乙酯。样品用二氯甲烷、乙酸乙酯萃取,经脱水浓缩后进GC/Ms分析。在DX-1柱上用多离子检测(MID)法楚性和定量。本方法有较高的选择性和灵敏度,回收率高,重复性好。     

热稳定性过氧化氢酶工程菌株发酵条件的研究

重组大肠杆菌UM2 1携带来自嗜热脂肪芽孢杆菌过氧化氢酶的基因 ,在以IPTG作为诱导物时 ,在IPTG浓度为 0 75mmol/L、起始 pH6 5、装液量 5 0mL/2 5 0mL三角瓶的条件下 3 7℃诱导 3h ,酶的表达水平最佳 ;在以乳糖作为诱导物时 ,在乳糖质量浓度为 10 g/L、起始 pH7 5、装液量 5 0mL/2 5 0mL三角瓶的条件下 ,3 7℃诱导 5h ,酶的活力最高。乙酸的存在能够抑制酶的表达。工程菌在最适条件下酶活力可达 3 0 0 0 0～ 3 5 0 0 0U/L以上 ,约是原始菌株嗜热脂肪芽孢杆菌的 10倍。工程菌在无选择压力的条件下连续传代 60代 ,基本保持稳定 ,连续传代 10 0代 ,仍有 80 %左右的菌株携带重组质粒。     

重组过氧化氢酶与一种商品过氧化氢酶的性质比较

将重组过氧化氢酶和市售一种商品过氧化氢酶的性质进行了比较。重组酶的最适温度为70℃，某商品过氧化氢酶的最适温度为40℃；与这种商品过氧化氢酶相比，重组酶的热稳定性更好。重组过氧化氢酶和这种商品过氧化氢酶的最适pH都是7．0；重组酶和这种商品过氧化氢酶在pH3-8的范围内均较为稳定；重组酶在室温放置1个月后酶活力基本保持不变，而此种商品过氧化氢酶活力损失约70％；金属离子对重组酶和这种商品过氧化氢酶都有抑制作用，抑制程度有所不同；EDTA抑制这种商品过氧化氢酶的活性，但不抑制重组酶的活性。     

耐热过氧化氢酶基因工程菌的构建及其发酵条件

利用PCR扩增技术以嗜热脂肪芽孢杆菌IAM11001染色体DNA为模板，扩增得到嗜热脂肪芽孢杆菌过氧化氢酶编码基因perA。再与经EcoRⅠ酶切的温控表达载体pBV220连接，构建重组质粒，并转化宿主大肠杆菌JM109，得到耐热过氧化氢酶基因工程菌，然后对该工程菌在LB培养基和半合成培养基中的发酵条件进行了优化。结果表明：在LB培养基中，诱导时期和酶合成最佳诱导时间均为5h，最大产酶量达到72．9U／mL；在半合成培养基中，于30℃培养4h，再于42℃诱导培养6h，产酶量最高达到131U／mL。