自噬在米诺环素保护PC12细胞氧糖剥夺-复糖复氧中的作用

目的: 探讨自噬在米诺环素保护PC12细胞氧糖剥夺-复糖复氧中的作用。方法: 构建PC12细胞氧糖剥夺-复糖复氧模型,采用米诺环素(MC,1、10、100 μmol/L)或3-甲基腺嘌呤(3-MA,5 mmol/L)进行干预,MTT检测细胞活力,单丹磺酰戊二胺(MDC)染色观察自噬泡,Western blot检测自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白轻链3(LC3Ⅱ)、泛素结合蛋白P62/SQSTM l的表达。结果: 氧糖剥夺处理后,1 μmol/L 和 10 μmol/L的MC能显著提高PC12细胞的存活率,而 100 μmol/L 则会加重细胞的损伤。蛋白LC3Ⅱ和Beclin1的表达与MC的浓度呈正相关性,自噬抑制剂3-MA能够降低LC3Ⅱ和Beclin1,增加P62/SQSTM l的表达逆转MC的保护作用。结论: 低剂量(1、10 μmol/L)MC能够通过增加LC3Ⅱ和Beclin1的表达,诱导PC12细胞产生自噬从而保护氧糖剥夺-复糖复氧处理后的PC12细胞。     

自噬在米诺环素保护大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用研究

目的:探讨自噬在米诺环素保护脑缺血再灌注损伤中的作用。方法:制备大鼠脑中动脉栓塞(MCAO)模型后,注射米诺环素或3-MA进行干预,对大鼠神经功能进行评分;采用TTC法测定脑梗死体积;透射电镜法观察大脑皮层细胞的超微结构及其自噬小体数目的变化;Western blot检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3Ⅱ、p62的表达。结果:22.5 mg/kg和45 mg/kg米诺环素组能够显著降低大鼠神经功能评分,减少脑梗死体积,提高LC3Ⅱ和Beclin1的表达,增加p62的降解;高剂量米诺环素（90 mg/kg）组能够进一步提高LC3Ⅱ和Beclin1的表达,然而其大鼠神经功能评分和脑梗死体积却显著增加;自噬小体数也显著增多;当同时给予自噬抑制剂3-MA后,能显著逆转米诺环素（45 mg/kg）的神经保护作用。结论:低剂量米诺环素能够通过增加LC3Ⅱ和Beclin1的表达、促进p62的降解,诱导自噬从而减轻大鼠脑缺血再灌注损伤;而高剂量米诺环素可能是因为其过度激活自噬导致大鼠脑缺血再灌注损伤加重。     

三文鱼皮的成分分析

为开发利用三文鱼皮,我们对其成分进行了分析:每百克三文鱼皮中含蛋白质58.28g;氨基酸55.89g,其中必需氨基酸17.45g、甘氨酸8.36g、羟脯氨酸0.60g;脂肪24.31g、不饱和脂肪酸占77.0%、其中单不饱脂肪酸37.0%、多不饱和脂肪酸40.0%、必需脂肪酸3.1%、EPA和DHA 29.0%;维生素E0.19mg;碳水化合物11.34g;灰分3.50g;还含铁、锌、锰、钴、硒等微量元素.     

真空水解测定鱼皮胶原蛋白制品中的羟脯氨酸

采用0.75%氯化亚锡、6M盐酸于真空安瓿中115℃、24h水解鱼皮胶原蛋白制品中的羟脯氨酸,用对二甲胺基苯甲醛显色,560 nm比色测定羟脯氨酸含量,测定结果鱼皮胶原蛋白寡肽的羟脯氨酸含量为2.57%,鱼皮胶原蛋白颗粒的羟脯氨酸含量为1.50%,回收率97.8%-103.2%,真空水解方法简便,测定结果稳定,重复性好,一次可水解批量样品,提高工作效率.     

舒尼替尼药代动力学和脑肾组织分布特征

目的：建立HPLC-UV法测定大鼠血浆和小鼠组织中舒尼替尼，研究舒尼替尼在大鼠体内药代动力学和小鼠脑肾组织分布特征。方法：采用蛋白沉淀法处理血浆和组织样品，Waters XBridgeTM C18（4.6 mm×250 mm, 5 μm）色谱柱，流动相为甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钠（70∶30）；进样量：30 μL；流速：1.0 mL/min；检测波长310 nm；柱温：25 ℃。结果： 舒尼替尼大鼠血浆浓度在0.019 2～15.34 μg/mL范围内，小鼠脑、肾组织浓度在0.038 3～11.50和0.038 3～69.00 μg/mL范围内线性关系良好。大鼠口服灌服舒尼替尼20 mg/kg，Tmax=9.0 h，Cmax=0.194 mg/L，t1/2=18.4 h，AUC(0-∞)=6.8 mg·L-1·h，绝对生物利用度为47.1%；舒尼替尼可以透过血脑屏障，但在脑组织中浓度较低，在肾组织中有较高浓度。结论：建立了大鼠血浆及小鼠组织中舒尼替尼的HPLC-UV测定方法，此方法简便、快速，结果准确可靠，为舒尼替尼的临床应用提供参考。     

自噬在米诺环素保护肾缺血再灌注损伤中的作用

目的: 研究米诺环素对肾缺血再灌注损伤后自噬的影响,探讨自噬在米诺环素保护肾缺血再灌注损伤中的作用。方法: 建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,采用米诺环素及自噬抑制剂干预,观察大鼠肾脏指数、肾功能变化;HE染色评价肾组织病理学变化;Western blot法检测肾组织自噬相关蛋白LC3、Beclin 1、p62的表达。结果: 米诺环素可以显著改善肾缺血再灌注损伤后的肾脏损伤,而自噬抑制剂氯喹能部分逆转米诺环素的肾保护作用。Western blot结果显示,米诺环素可上调缺血再灌注损伤肾组织LC3并下调p62的表达水平,而氯喹能部分逆转米诺环素的自噬诱导作用。结论: 米诺环素对肾缺血再灌注损伤具有显著的保护作用,其机制可能是通过激活自噬实现的。     

珍珠明目滴眼液改善兔眼球结膜微循环的实验研究

目的: 观察珍珠明目滴眼液对兔眼微循环的影响。方法: 采用静脉注射高分子右旋糖苷(Dextran T 500)复制家兔眼球结膜微循环障碍模型,利用动物微循环仪观察并分析珍珠明目滴眼液对兔眼微循环的改善作用。结果: 珍珠明目滴眼液给药5、15和 30 min 能明显加快球结膜微动脉和微静脉血流速度,改善血液流态,降低血液流态积分。结论: 珍珠明目滴眼液对家兔眼球结膜微循环障碍有良好的改善作用。