碱蓬多糖SSP1-1的分离纯化及其抗肿瘤活性

目的:本实验对水溶性碱蓬(Suaeda salsa)多糖SSP1-1进行分离纯化并对其抗肿瘤活性进行初步研究。方法:采用水提醇沉法提取碱蓬粗多糖,通过DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-75葡聚糖凝胶柱分离纯化碱蓬粗多糖,得到单一碱蓬多糖SSP1-1,利用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)对其纯度及分子量进行分析,利用MTT、Hoechst 33342染色,Western blot方法对碱蓬多糖SSP1-1的抗肿瘤活性进行研究。结果:SSP1-1分子量为60.32 kDa;SSP1-1具有时间-剂量依赖性抑制肿瘤细胞增殖作用,当SSP1-1浓度为500 μg/mL时,HepG2细胞在24和48 h的细胞活力分别为52.8%和50.2%,Hoechst 33342染色实验观察到SSP1-1可引起HepG2细胞核出现典型的细胞凋亡特征;Western blot证明SSP1-1可以降低Bcl-2的蛋白表达,提高Bax和Caspase-3的蛋白表达,各组蛋白含量与对照组相比均具有显著性(P<0.05)。结论:SSP1-1为均一组分多糖,并对肿瘤细胞具有显著的抑制作用,为进一步开发利用碱蓬多糖奠定了基础。     

萝种子生物碱提取工艺优化及其抑菌活性

目的:优化萝藦种子总生物碱的最佳提取工艺,并对其抑菌活性进行研究。方法:以总生物碱得率为指标,在单因素实验的基础上,使用正交试验优化萝藦种子总生物碱提取工艺,并通过牛津杯法和两倍稀释法评价其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的抑菌作用。结果:萝藦种子总生物碱最佳提取工艺为:盐酸水溶液pH为2,料液比1∶20 g/m L,提取温度70℃,提取时间2.0 h。在此条件下,萝藦种子总生物碱平均得率为2.91%。萝藦种子总生物碱对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有抑菌活性,其最低抑菌浓度分别为0.2、0.4 mg/m L,对大肠杆菌没有抑菌活性。结论:该优化提取工艺具有良好可行性,萝藦种子总生物碱具有一定的抑菌作用。     

响应面分析法优化碱蓬多糖的脱色工艺

为了优化活性炭对碱蓬多糖的脱色工艺条件,在单因素实验基础上,选取碱蓬多糖脱色过程中的活性炭用量、脱色温度、脱色时间和pH为影响因素,根据Box-Behnken中心组合设计原理,进行响应面法分析,确定碱蓬多糖的最佳脱色工艺条件为:活性炭用量3.3%,脱色温度53 ℃,脱色时间43 min,pH5.4,脱色率为65.38%,RSD为1.74%。该优化工艺简单、稳定、具有良好的可行性。     

碱蓬草总生物碱提取工艺优化及其对高脂饮食小鼠的体内抗氧化活性

目的:优化碱蓬草总生物碱的提取工艺,研究碱蓬草总生物碱对高脂饮食小鼠的体内抗氧化性。方法:以碱蓬草总生物碱的提取量作为指标,在单因素实验的基础上,进行正交分析。利用碱蓬草的总生物碱对高脂饮食小鼠进行灌胃,定期监测小鼠的衰老指标。结果:碱蓬草总生物碱的最佳提取工艺:超声时间20 min、超声温度45 ℃、乙醇浓度85%、料液比1:10,在此条件下,总生物碱的提取量为（0.65 ± 0.02）mg/g。抗氧化活性实验表明,碱蓬草总生物碱的低（2 mg/kg）、中（4 mg/kg）、高剂量（8 mg/kg）组均可以显著降低小鼠肝脏中MDA的含量（P<0.05）,同时碱蓬草总生物碱的低、中、高剂量组均可以显著增加肝脏中的CAT和GSH-Px（P<0.05）。结论:本实验的优化工艺具有良好的可行性,碱蓬草总生物碱具有抗氧化活性,可作为碱蓬草食品及医药方向的研究基础。     

天浆壳生物碱的提取分离纯化及对舌癌Tca8113细胞的增殖抑制作用

目的:从天浆壳中提取分离纯化得到生物碱,并研究其对人舌癌Tca8113细胞的增殖抑制作用。方法:采用醇提法提取天浆壳中总生物碱,硅胶柱色谱分离纯化得到单一生物碱化合物,通过核磁共振光谱和质谱对其化学结构进行分析。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定生物碱对Tca8113细胞增殖的抑制率,Hoechst 33342染色法观察细胞形态变化。结果:从天浆壳中分离出secu'amamine D、securinine、securitinine三种生物碱;MTT结果表明,三种生物碱均能明显抑制Tca8113细胞的增殖;Hoechst 33342染色结果显示,三种生物碱均能使Tca8113细胞发生凋亡形态学改变,且与浓度正相关。结论:首次从天浆壳中分离出secu'amamine D、securinine、securitinine三种生物碱,三种生物碱均能抑制Tca8113细胞增殖并促使其凋亡。     

响应面法优化碱蓬根总生物碱的提取工艺及其抑菌活性

为优化碱蓬根总生物碱的提取工艺,并研究其抑菌活性,以碱蓬根为原料,在单因素实验基础上,采用响应面法确定碱蓬根总生物碱的最佳提取条件,管碟法及两倍稀释法检测碱蓬根总生物碱提取物对三种常见致病菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)的抑制效果。结果表明,当料液比为1:25 g/mL,乙醇浓度86%,提取温度78 ℃,提取时间2.1 h时,总生物碱得率最高为0.521%±0.04%。碱蓬根总生物碱对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌有一定的抑菌效果,最低抑菌浓度为0.4 mg/mL,对枯草芽孢杆菌无抑菌性。该提取工艺高效可行,可用于碱蓬根中总生物碱的提取,同时提取物具有一定的抑菌性。