普通烟草NAC转录因子家族抗逆基因筛选与表达分析

[背景和目的]NAC(NAM/ATAF/CUS2)家族是植物特有且最大的转录因子家族之一,广泛参与植物的生长发育调控和逆境胁迫应答.为筛选烟草抗逆NAC目标基因.[方法]以公开的普通烟草品种K326的注释蛋白序列为参考,与拟南芥NAC蛋白序列同源比对,结合功能域分析,进行普通烟草的NAC转录因子鉴定,并利用生物信息学软...     

烟草白粉病抗性连锁分子标记开发及育种利用

  目的  提高烟草白粉病抗病育种效率,有效防止抗性丢失。  方法  通过烟草种质资源白粉病抗性鉴定获得抗源材料,利用F2和BCF1分离群体进行白粉病抗性遗传规律和分子标记连锁分析,开发与烟草白粉病抗性紧密连锁的分子标记。  结果  获得白粉病抗源材料2份,分别为台烟7号和KE1,其中台烟7号的白粉病抗性符合双基因隐性遗传规律。根据抗感亲本的NtMLO基因的差异开发了分子标记,利用分离群体证明该标记与白粉病抗性共分离,并应用于主栽品种的抗性回交改良。  结论  开发了与烟草Ntmlo白粉病抗性共分离的分子标记,可显著提高烟草白粉病抗病育种效率。      

间接免疫荧光法检测冠心病患者外周血单个核细胞PP65抗原

目的：了解冠心病患者外周血单个核细胞巨细胞病毒活动感染情况,并探讨动脉粥样硬化与HCMV感染的关系。方法：运用间接免疫荧光的方法,对29例冠心病患者、39例其他心血管病患者以及42例正常对照组外周血单个核细胞巨细胞病毒PP65抗原进行检测,并运用免疫散射比浊法对各组CRP进行测定。结果：29例冠心病患者中巨细胞病毒pp65抗原阳性者7例,占24．1％;与其他心血管患者中巨细胞病毒pp65抗原阳性率（5．1％）以及正常对照组巨细胞病毒pp65抗原阳性率（2．4%）相比明显升高,29例冠心病患者CRP水平（5．06±1．79mg/L）也明显高于其它两组（P〈0.05）。结论：冠心病患者外周血单个核细胞巨细胞病毒活动感染可能在动脉粥样硬化的发展过程中有重要作用。     

基于焓湿图的被动式建筑设计策略分析

利用Weather tool工具中的焓湿图对佳木斯地区的气象数据进行分析,数据为CSWD(Chinese Standard Weather Data)。通过焓湿图的分析,确定出适合佳木斯地区的具体被动式设计策略,主要有被动式太阳能采暖、使用围护结构的蓄热材料和自然通风,为建筑师在建筑方案设计阶段提供有效的参考。     

液压支架支撑座损坏的分析与处理

通过对支架平衡顶后支撑座大面积开焊损坏的各种原因的分析，找出了有在井下处理支架损坏的最佳方案，并对老架型的改造、修理及使用提出了应注意的问题。     

烟草转基因研究常用遗传元件筛查策略

通过检索国内外近10年烟草转基因研究的相关文献,建立了转基因烟草常用转化遗传元件的数据库,统计了每个遗传元件及组合元件的使用频率后,发现利用7种遗传元件,包括:启动子P-35S、标记基因NPT II、HPT、Bar和aadA、报告基因GUS及终止子T-NOS作为靶标元件组合,能使目前烟草转基因事件的理论筛查率达到100%,从而构建出转基因烟草的优化筛查策略,为行业转基因烟草检测提供依据。      

烟草NtMHX1和NtMHX2基因的克隆及不同金属离子胁迫下的表达模式分析

  目的  研究Magnesium proton exchangers（MHX）基因在烟草（Nicotiana tabacum）中的特性与功能。  方法  采用同源克隆方法，从栽培烟草K326中克隆MHX基因，对其编码蛋白进行了生物信息学分析，采用实时荧光定量PCR检测MHX基因在不同烟草组织及金属离子处理0 d、1 d、2 d、4 d、6 d的表达模式。  结果  获得2个NtMHX基因序列，分别命名为NtMHX1和NtMHX2，开放阅读框全长分别是1623 bp和1641 bp，编码540和546个氨基酸残基，相对分子质量为60382.99 Da和60977.72 Da，均为包含11个跨膜结构域的酸性蛋白质，与野生番茄（Solanum pennellii）和马铃薯（Solanum tuberosum）的MHX蛋白相似度最高。NtMHX1和NtMHX2基因在根、茎、叶、花中均有表达，且均在茎中的表达水平最高。NtMHX基因的表达受到Mg2+、Mn2+、Ca2+、K+、Na+、Zn2+和Cu2+的诱导，并受到Cd2+的抑制。  结论  克隆得到2个栽培烟草MHX基因，在烟草不同组织中均有表达，并受到多种金属离子的胁迫诱导。      

烟草牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶小亚基基因的克隆及组织表达谱

为揭示牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(GGPPS)小亚基在烟草(Nicotiana tabacum)中的生理功能,采用电子克隆的方法,结合RT-PCR和SMART RACE技术,从烟草中克隆到1个牛儿基牛儿基焦磷酸合成酶小亚基基因的cDNA序列,命名为NtGGPPS5(GenBank登陆号:KF316932)。该基因全长1320 bp,编码332个氨基酸,与番茄(Solanum lycopersicum,XP_004246572)及其野生种(Solanum pennellii,ADZ24721)的GGPPS小亚基的氨基酸序列一致性均为92%,具有一个特征性的异戊二烯合成酶保守的天门冬氨酸富集区。进化分析表明,植物GGPPS分为大亚基和小亚基两个分支,而且NtGGPPS5属于小亚基。实时荧光定量PCR试验表明,NtGGPPS5基因在烟草根、茎、叶和芽中均有表达,表达量为芽叶茎根。