肥胖小鼠肠道菌群对半乳甘露聚糖的响应与筛选

半乳甘露聚糖具有改善肠道微生物及代谢性疾病的作用,但其低分子量产品在提高肠道中双歧杆菌的丰度和改善肥胖方面的机制尚不清晰。通过酶解瓜尔豆胶获得低分子量（2 kDa～10 kDa）的半乳甘露聚糖（galactomannopolysaccharide,GMPS）,单糖组成为甘露糖（M）和半乳糖（G）（M∶G=1.75∶1,摩尔比）。建立体外模拟肠道发酵模型,采用高通量测序技术探究GMPS对肥胖小鼠肠道菌群的多样性和组成结构的影响;通过16S rDNA鉴定及BOX-聚合酶链式反应（BOX-polymerase chain reaction,PCR）分型,从粪便样品中挖掘潜在靶点菌株。结果表明,GMPS的干预促进了粪便样品中菌群产生乙酸和丙酸等短链脂肪酸的水平,改变了肥胖小鼠肠道菌群的结构,显著提高了产乳酸的肠球菌属和双歧杆菌属的丰度,使假长双歧杆菌成为优势菌株,同时降低了梭菌属、气单胞菌属等条件致病菌的丰度（p＜0.05）;并从粪便样品中筛选出5株假长双歧杆菌,证明假长双歧杆菌是对GMPS高度响应的特征性菌株。揭示了GMPS对肥胖小鼠肠道菌群的影响,挖掘了作为GMPS潜在靶点的假长双歧杆菌菌株,为GMPS和假长双歧杆菌作为新型益生元和益生菌产品的开发提供依据     

海参内脏酶解粉主要成分的分析

为了评价海参内脏酶解粉的营养功效,对海参内脏酶解粉基本成分、氨基酸组成、脂肪酸组成、蛋白质分子量、体外模拟胃肠总消化试验进行分析和计算。结果表明,海参内脏酶解粉蛋白质含量为51.03%,脂肪及糖含量分别达到总质量的9.84%和6.7%。酶解粉中必需氨基酸含量占氨基酸总量的36.87%,不饱和脂肪酸含量占脂肪酸总量的75.64%,多不饱和脂肪酸中二十碳五烯酸(EPA),二十碳六烯酸(DHA),花生四烯酸(AA)含量丰富,占多不饱和脂肪酸总量的59.10%。海参内脏酶解粉中约76.03%的蛋白质的分子量分布在1 000~2 000 Da。体外模拟肠胃总消化试验结果显示,20 min后酶解粉肠胃总消化率趋于稳定,达88.76%。海参肠酶解粉含有丰富蛋白质、必需氨基酸、DHA、EPA等营养成分,具有较高的食用价值和保健功效,可作为一种优质的营养品供消费者食用。     

壳聚糖对牡蛎ACE抑制肽的脱腥工艺研究

运用单因素试验优化牡蛎肽的酶解制备工艺,添加0.6%中性蛋白酶在p H7.0、50℃条件下酶解3 h。应用1.0%壳聚糖溶液对优化后的牡蛎酶解液进行絮凝脱腥,4 800 r/min离心15 s即可达到显著的脱腥脱脂和杂质去除效果,固形物回收率80.5%,蛋白回收率79.5%,脂肪去除率达92.4%。得到透明无腥味的牡蛎多肽后,对多肽分子量进行分析,1 000 Da以下的占93.1%,500 Da以下的约占49.7%,对牡蛎多肽的血管紧张素转换酶(angiotensinconverting enzyme,ACE)抑制活性进行研究,IC_(50)为0.475 mg/mL,为开发制备低分子量、高ACE抑制活性的脱腥牡蛎肽提供理论支持。     

芽孢杆菌M-21产β-甘露聚糖酶发酵条件研究

从土壤中分离筛选出产β-甘露聚糖酶的芽孢杆菌(Bacillus sp.)M-21,通过单因素实验和正交优化实验,确定了其最佳发酵产酶条件。菌株的产酶最适培养基组成包括(g/L)碳源:瓜尔豆胶4,复合氮源:豆粉20、(NH4)2HPO45,其他无机盐组分:K2HPO4.3 H2O1、MgSO4.7 H2O 0.5、NaCl 0.5、CaCl20.1、FeSO4.7 H2O0.001。产酶最适培养条件:培养基初始pH8.0,接种量4%,装液量50 mL/250 mL三角瓶,32℃180 r/min振荡培养36 h。此条件下酶活力最高可达1 487 U/mL。     

枯草芽孢杆菌固态发酵产脂肽培养基优化及脂肽的初步鉴定

利用枯草芽孢杆菌N-2,以豆粕为主要基质,优化固态发酵产抗菌脂肽以提高脂肽产量。利用高效液相色谱法对发酵产生的抗菌物质进行初步鉴定;随后通过Plackett-Burman设计法和响应面优化,对枯草芽孢杆菌产脂肽的关键因子进行筛选并优化最佳培养基条件组合。结果表明,初步分析该抗菌物质主要成分为脂肽,其组分包括伊枯草菌素(m/z 1043.6、1057.5、1070.2、1084.0),丰原素(m/z 717.4、734.7);筛选确定MgSO_4、K_2HPO_4、FeSO_4添加量为3个影响发酵的显著性(p 0.05)因素,确定发酵培养基成分的最优组合为MgSO_4 0.39%、K_2HPO_4 1.70%、FeSO_4 0.13%,在其条件下脂肽的抑菌率达到75.62%±0.36%,该结果为脂肽的工业化生产奠定基础。     

鼠尾藻岩藻黄素超声辅助提取及其纯化工艺优化

以鼠尾藻为原料,运用超声辅助提取法对鼠尾藻中岩藻黄素的提取工艺进行研究,通过单因素实验法和响应曲面法确定了工艺参数。通过高效液相色谱法(HPLC)和电喷雾质谱法(ESI/MS)对经过硅胶层析柱分离纯化后的岩藻黄素样品进行分析。实验结果表明,超声提取的最佳工艺是:乙醇体积分数为80%(v/v),超声时间32 min,超声起始温度52 ℃,液料比10 mL/g,L-抗坏血酸的添加量0.8%,在此条件下提取2次,岩藻黄素粗品得率为(0.455±0.046) mg/g。经硅胶层析柱纯化后的岩藻黄素纯度约86.88%±1.34%,得率为(0.048±0.002) mg/g。采用该法制备高纯度的岩藻黄素工艺简单,产物得率高,为其今后的综合利用提供了实验基础和技术支持。     

体外分析一些寡糖的益生元作用

目的:通过体外静置培养,分析褐藻胶寡糖(AOS)、来自Klebsiella的微生物寡糖(KOS)、瓜尔豆胶寡糖(GOS)、魔芋胶寡糖(KGO)以及不同分子量的卡拉胶寡糖(COSa和COSb)的益生元活性.方法:取三位健康志愿者新鲜粪便,分别制成菌悬液,按10%的体积接入静置培养基,厌氧发酵.分别在不同时间取样,测定不同肠道菌及总菌教的变化,以计算益生元指教(PI值);同时分析产气情况及短链脂肪酸(SCFA)含量,综合判断不同寡糖的益生元作用.结果:益生元作用分析中,AOS的PI值最高,依次为AOS＞KOS＞GOS＞KGO;产气量测定中,COSb最高,其它均低于葡萄糖;SCFA测定中,AOS和GOS最高,COSa最低.结论:AOS、GOS、KGO、KOS均可作为益生元;COSa的益生元作用不明显;COSb不宜作为益生元.     

超高压处理对太平洋牡蛎（Crassostrea gigas）肠道菌群的影响

为研究超高压（ultra-high pressure,UHP）处理对太平洋牡蛎（Crassostrea gigas）肠道菌群的影响,该研究通过16S rRNA测序的方法,分析100、200、400 MPa超高压处理5 min后牡蛎肠道菌群结构的变化。鲜活牡蛎肠道菌群主要以弧菌属（Vibrio）、支原体属（Mycoplasma）、葡萄球菌属（Staphylococcus）、Roseimarinus、丙酸菌属（Propionigenium）、Psychrilyobacter、气单胞菌属（Aeromonas）、油螺旋菌属（Oleispira）和黄单胞菌属（Xanthomonas）为主。超高压处理后,牡蛎肠道菌群的Chao1指数和ACE指数有所提高,而Shannon指数有所下降;葡萄球菌属、气单胞菌属、类香味菌属（Myroides）、肠球菌属（Enterococcus）和气球菌属（Aerococcus）的丰度显著降低;而黄杆菌科（Flavobacteriaceae）和红杆菌科（Rhodobacteraceae）的海洋特色菌属的丰度显著增加,如400 MPa处理后,牡蛎肠道菌群主要由黄杆菌科组成,占比超过70%。此外,超高压处理能有效消除牡蛎肠道中常见腐败菌,如交替假单胞菌属（Pseudoalteromonas）和希瓦氏菌属（Shewanella）。这些结果表明,超高压处理可显著降低牡蛎肠道菌群的数量和多样性,并能有效减少牡蛎肠道中致病微生物菌属的丰度,使菌群结构的安全风险降低。     

碱性脂肪酶高产菌株Fusariumsp.N4-2的筛选与产酶条件研究

从碱湖鱼内脏中分离筛选出1株碱性脂肪酶的高产菌株N4-2,初步鉴定为镰孢霉属(Fusarium)。摇瓶产酶实验表明,该菌株最适产酶培养基的组成为(g/L):橄榄油30,酵母膏5,(NH4)2SO43,MgSO40·75,CaCl20·2,K2HPO44。最适产酶温度30℃,最佳产酶pH为10·0,生长高峰出现在第43h,产酶高峰出现在第52h,碱性脂肪酶的活力高达605·15U/mL,此菌株生长周期短,产酶活力较高,在洗涤制剂、印染、制革等行业有良好的应用前景。     

臭氧冰在大黄鱼保鲜中的应用

为研究在室温下用臭氧冰保鲜大黄鱼期间的品质变化,以菌落总数、感官评分、K值、挥发性盐基氮（total volatile base nitrogen,TVB-N）值、蒸煮损失率、硬度、咀嚼性为评价指标,对比用普通冰、臭氧冰和臭氧水淋洗后臭氧冰保鲜的大黄鱼在贮藏期间的品质变化。结果表明,臭氧冰保鲜组大黄鱼的感官评分明显优于普通冰保鲜组;第15天时,臭氧冰保鲜组比普通冰保鲜组的K值、TVB-N值和菌落总数分别低10%、8.0 mg/100 g、2.5 lg(CFU/g);从蒸煮损失率、硬度和咀嚼性的变化来看,臭氧冰保鲜的大黄鱼口感更佳;且在本批臭氧冰保鲜的大黄鱼中并未检测到溴酸盐,证明臭氧冰处理无溴酸盐毒害风险;臭氧冰保鲜与普通冰保鲜相比可延长3 d～5 d货架期。