柑橘柠檬苦素大孔树脂分离纯化方法

以柑橘柠檬苦素为考察指标,研究大孔树脂分离纯化柠檬苦素的工艺条件。结果表明,D101大孔树脂对柑橘柠檬苦素有较好的吸附分离性能,是分离纯化柑橘柠檬苦素的适宜大孔树脂;D101大孔树脂分离纯化柑橘柠檬苦素的最佳工艺条件为：上样流速1 mL/min、上样质量浓度0.5 mg/mL、用 pH 6、80%的乙醇溶液作洗脱剂、洗脱流速2 mL/min。通过树脂回收重复使用,发现D101树脂通过再生处理后,其吸附性能未有明显降低,可以重复使用。采用上述方法得到D101大孔树脂对柠檬苦素的吸附率为88.53%,解吸率为93.47%,得率为82.75%。高效液相色谱检测可知,柠檬苦素的含量达到了92.79%。     

软腐猕猴桃果实真菌类病原菌的生物多样性分析

本文对湖南地区主要猕猴桃产区猕猴桃软腐果实真菌类病害的多样性分布规律进行系统分析,为猕猴桃软腐病原真菌多样性的深入研究提供基础数据和理论依据。采用IlluminaHi Seq高通量测序技术对5处软腐猕猴桃(A、B、C、D、E),15组果实样品中微生物ITS扩增子二代测序数据采集,进行生物信息学分析。5处软腐猕猴桃果实中真菌种类较为丰富,真菌丰富度指数和多样性指数较高,尤其是A、B、C处,相对于D、E处存在极显著差异(p<0.01)。在不同猕猴桃果实中得到了2个门的优势微生物。子囊菌门(Ascomycota)为最优势菌门,主要分布在D和E处,群类相对丰度为19.20%,且远远大于次优势菌门-担子菌门(Basidiomycota,6.80%,主要分布在A、B、C处),表现出非常明显的优势;间座壳属Diaporthe相对丰度最高,达到了14.00%,相对于其它属病原菌均具有极显著性差异(p<0.01),此菌在D、E组含量相对较高,在本组内达到了30%以上,其余3组几乎没有。布勒弹孢酵母属Bullera相对丰度为4.90%,此菌为各组共有的优势菌属,A、B、C组略高,在本组内达到了5.50%左右,D、E组则为3.50%左右。葡萄座腔菌属Neofusicoccum相对丰度为3.20%,此菌在E组含量相对较高,在本组内达到了15.00%以上,其余4组几乎没有。红菇属Russula相对丰度为0.60%,及其它较少的担子菌门菌属Tomentella、Phialocephala、oidiodendron、cenococcum等,此外,具有软腐猕猴桃果实潜力的菌属有茎点酶菌属(homa)、青霉属(penicillium)及拟青霉属(simplicillium)等。实验为猕猴桃软腐病的防治提供了一定理论基础,今后对猕猴桃果实软腐病防治时可针对性的杀灭间座壳属和葡萄座腔菌属微生物,以提高果实的耐贮性。     

刺葡萄皮色素的提取及性能测定

对刺葡萄果皮色素的溶剂法提取工艺在单因素水平基础上进行了研究,并对提取所得色素的理化性质进行了测定.结果表明,以80%的乙醇水溶液为提取剂,料液比为1∶5,在80℃条件下提取1.5 h,提取效果最好,提取得率为2.2%;对提取所得色素的理化性质进行的测定结果表明,所得色素色价高,耐酸性、耐光性好,Mg2 ,Cu2 ,K 等金属离子对其稳定性影响不大,具有很好的开发应用前景.     

软枣猕猴桃黄酮对过氧化氢诱导HaCaT细胞损伤的保护作用

研究软枣猕猴桃中黄酮类化合物对过氧化氢（H2O2）损伤人永生化表皮细胞（HaCaT细胞）的保护作用。 以湖南省浏阳市大围山软枣猕猴桃为实验材料,以体外培养的HaCaT细胞为实验对象。实验分为空白对照组、H2O2 模型组、阳性对照组（VC组）和黄酮处理组（软枣猕猴桃黄酮0.1～1.0 mg/mL预处理）,以细胞内超氧化物歧化酶 （superoxide dismutase,SOD）活力、活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平为综合评价指标,并以VC作 为阳性对照评价其抗氧化活性。实验结果表明：当H2O2浓度为30 μmol/L时,细胞相对存活率为40%左右,较好地 诱导了HaCaT细胞氧化损伤模型。当加入黄酮类化合物对细胞进行预保护后,质量浓度0.3、0.6 mg/mL的黄酮处理 组细胞相对存活率为60%左右,较模型组均提高了20%左右。0.3 mg/mL黄酮处理组细胞内SOD活力（6.33 U/mg） 较模型组升高了约1 倍,且存在明显差异（P＜0.05）;ROS水平显著下降,与模型组（677.80）相比下降了13%左 右。说明软枣猕猴桃中黄酮类化合物对H2O2造成的氧化损伤具有一定的预保护作用,可进一步将其开发成相应的天 然抗氧化剂产品投入市场。     

虎杖中高效转化白藜芦醇苷的内生真菌筛选和鉴定

从虎杖根部分离获得8株内生真菌,经液态培养基发酵后进行HPLC检测,以白藜芦醇苷转化率为指标,从中筛选出具有高效转化能力的2株内生真菌G8和G10,其转化率分别达到64.2%和58.1%,将虎杖中的白藜芦醇含量提高到原来的3.84倍和3.57倍。结合ITS测序与Genback中rDNA同源序列对比,鉴定G8和G10分别为青霉菌RF3(Penicillium sp.RF3)和青霉菌ST008(Penicillium sp.isolate ST008)。     

刺葡萄籽中原花青素的提取与成分分析

对刺葡萄籽中原花青素的提取和纯化工艺做了初步的研究。采用传统的溶剂提取法,对影响提取效果的4个主要因素——提取剂浓度、料液比、提取温度和提取时间进行了研究,通过正交分析得出最佳提取工艺：提取剂为70%乙醇,料液比（w/v）为1∶7,提取温度为60℃,提取时间为2h。并用有机溶剂萃取法初步分离出低聚原花青素和高聚原花青素。通过HPLC对原花青素低聚物进行了成分分析,结果表明,所提取的产品与原花青素标准品成分基本一致。     

超声强化超临界CO_2萃取柑橘落果中辛弗林

对超声强化超临界CO2萃取柑橘落果中活性成分辛弗林进行研究,并对不同方法的萃取物进行比较。结果表明:超声强化超临界CO2萃取柑橘落果中辛弗林的最佳工艺条件为:超声功率250 W、萃取温度45℃、萃取压力20 MPa、流体流量9 L/h、夹带剂含量12%、萃取时间4.5 h,辛弗林萃取率达到43.9%。其萃取物中辛弗林的含量为51.2%,高于超临界CO2法萃取物中辛弗林的含量(44.7%),远高于溶剂法萃取物中辛弗林的含量(4.6%)。     

糖枣多糖的单糖组成分析

研究糖枣多糖的单糖组成。以3 a生糖枣为试材,采用糖腈乙酸酯衍生化法,利用气相色谱仪对5个枣多糖组分进行单糖成分测定。结果表明,在糖枣多糖的单糖组成中,以木糖醇、葡萄糖、半乳糖所含比例较高,分别占单糖总含量的19.4%、18.5%、24.2%(组分DTC中葡萄糖比例高达36.4%);鼠李糖、核糖、阿拉伯糖和甘露糖,所占含量次之,分别为7.1%、6.5%、8.1%、7.9%;岩藻糖、木糖含量较低,分别只占总单糖质量的5.0%、3.4%(组分DTB1中岩藻糖只占0.80%,组分DTB2中木糖只占0.70%)。由此可知,糖枣多糖中单糖组成的差异性大。     

亚精胺处理对猕猴桃呼吸强度及PG活性的影响

以不耐贮藏的中华猕猴桃品系(湘源81-2)为试材,进行了不同时期、不同结合方式的亚精胺处理,以确定亚精胺处理的适宜时期。结果表明:亚精胺处理明显抑制了猕猴桃果实的呼吸强度和果肉PG活性,有效保持了果肉硬度。亚精胺处理宜在采后进行,Spd NAA 结合处理的贮藏效果最好。     

灵芝多糖联合5-FU对人结肠癌HCT-116细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨灵芝多糖(GLP)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人结肠癌HCT-116细胞增殖抑制及凋亡的影响。方法：采用MTT法测定单独和联用GLP与5-FU对人结肠癌HCT-116细胞的协同抑制作用,应用联合指数法分析两药物之间相互作用,Hoechst33258荧光染色观察细胞的形态学改变,碘化吡啶(PI)标记流式细胞术(FCM)检测GLP联合5-FU对HCT-116细胞周期和凋亡抑制率的变化。结果：MTT法测定结果显示GLP和5-FU单独用药均能显著抑制HCT-116细胞增殖。GLP(＞659μg/mL)联用5-FU(＞1.6μg/mL)联用呈协同效应(CI＜1),与5-FU单独用药组相比有极显著差异(P＜0.01),并呈时间依赖性。给药48h后,Hoechst33258荧光染色可见典型的凋亡形态学特征。FCM检测凋亡显示两药联合作用24h后,5mg/mL GLP联合50μg/mL 5-FU的凋亡率为36.14%,高于5-FU(50μg/mL)单独用药组(26.07%);1.25mg/mL GLP联合12.5μg/mL 5-FU、2.5mg/mL GLP联合25μg/mL 5-FU、5mg/mL GLP联合50μg/mL 5-FU作用48h后,凋亡率分别为20.95%、32.87%、30.01%,均高于5-FU(50μg/mL)单独用药组(14.51%)。联合用药组可使HCT-116细胞阻滞于S期。结论：较高质量浓度的GLP与5-FU联用具有协同抑制人结肠癌细胞株HCT-116细胞增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期作用。