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本文研究建立了一种蛋白质纯化分析仪的校准方法,确定了蛋白质纯化分析仪的主要计量特性包括泵系统的流量设定值误差SS、流量稳定性极差SR、紫外-可见检测器的基线噪声和基线漂移、仪器整机性能的定性、定量测量重复性、pH和电导测定重复性等。介绍了采用人生长激素溶液标准物质、氯化钾电导率标准溶液和pH标准溶液对仪器主要计量特性指标进行校准的过程,并对流量设定值误差的不确定度评定进行了讨论。本研究工作有助于保证蛋白质纯化分析仪测定结果的准确性和溯源性,并为蛋白质纯化分析仪校准规范的制定奠定基础。 相似文献
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复杂基质中低丰度蛋白质的准确定量分析一直是蛋白质研究的重点和难点。随着质谱技术的飞速发展,同位素稀释质谱法成为血清中低丰度蛋白质准确定量分析的重要方法。本研究以同位素标记的人生长激素为内标,通过C12和C4色谱柱两次分离收集目标馏分,建立了基于离线二维高效液相色谱分离血清样本的新方法。然后,结合高效液相色谱 同位素稀释质谱法,准确定量了人血清低丰度蛋白质生长激素的含量。通过对模拟样品(空白血清添加已知质量生长激素标准物质,理论含量为12.00 ng/g)和国际比对样品中生长激素(浓度未知)的测量及不确定度计算,定量结果分别为(11.45±2.33) ng/g和(12.84±1.46) ng/g。该方法准确性高、重复性好,为复杂基质低丰度蛋白质的准确定量分析提供了一种有效的测量方法和可溯源的分析结果。 相似文献
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同时建立了人血清白蛋白(:HSA)纯品含量质量平衡测定方法和同位素稀释质谱测定方法。质量平衡法首先采用高效液相色谱法测定了人血清白蛋白的纯度,然后分别采用卡尔费休法和灼烧残渣法测定其水分和灰分,计算得到HSA的含量为0.861 g/g。在同位素稀释质谱法中,HSA经酸水解后,采用液相色谱-同位素稀释质谱联用法测定了水解液中的Pro、Val和Phe3种氨基酸,进一步计算得出HSA纯品的含量。在最优条件下,HSA含量测定结果为0.853 g/g,相对标准偏差为0.8%,扩展不确定度为0.015 g/g(k=2),检出限和定量限分别为1.37×10~(-5)g/g和4.55×10~(-5)g/g。与质量平衡法测定结果相比,同位素稀释质谱方法测定结果只有0.9%的相对偏差。 相似文献
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建立一种人转铁蛋白(hTRF)纯品含量同位素稀释质谱测定方法.人转铁蛋白经酸水解后,以水(含0.8mmoI/L全氟庚酸和0.1%三氟乙酸)和乙腈为流动相,以氨基酸国家标准物质为标准,同位素标记氨基酸为内标,采用高效液相色谱-同位素稀释联用法对水解液中的脯氨酸、缬氨酸和苯丙氨酸进行测定,并进一步计算得出蛋白纯品的含量.同时采用质量平衡法测定人转铁蛋白的含量,验证所建方法的可行性.在优化的条件下,人转铁蛋白含量测定结果为0.830 g/g,相对标准偏差为0.6%,扩展不确定度为0.014 g/g(k=2),检出限和定量限分别为3.78×10-5 g/g和1.26×10-4 g/g.所建方法准确度高、溯源清晰,可作为人转铁蛋白纯品标准物质的定值方法,对于建立我国人转铁蛋白测定结果的量值溯源传递体系具有积极的意义. 相似文献
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胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1),是一种由70个氨基酸组成的肽类激素。临床研究发现,IGF-1与内分泌疾病、心脑血管疾病、癌症肿瘤、大脑与神经系统相关疾病、皮肤病、肝病等多种疾病都有着十分密切的联系。在新冠肺炎的研究中,IGF-1也扮演了重要角色。因此,可通过准确检测血清中IGF-1含量的变化作为相关疾病的辅助诊断指标之一。目前,临床上针对IGF-1的含量检测方法主要有基于抗原抗体特异性结合的免疫学分析方法和基于质谱技术的分析方法,这些方法具有不同的检测特性,测量准确性也不尽一致。通过对IGF-1的相关研究进展进行综述,总结IGF-1在临床检测应用中的功能作用,讨论其检测方法的特性和应用场景,为进一步提升IGF-1的检测能力提出了建议。 相似文献
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