竞争化学发光酶免疫检测动物源性食品中四环素残留

目的:建立一种准确度高、重复性好的检测四环素(tetracycline,TC)残留的竞争化学发光酶免疫测定法(competitive chemiluminescence enzyme immunity,CLEIA)。方法:通过选择适宜的偶联载体蛋白,优化反应温度、时间等条件,建立了一种测定四环素的竞争化学发光酶免疫测定法(TC-CLEIA)。结果:该方法的检测范围为0.0259~95.9478 μg/L,相关系数r为0.9998,检测限为0.0133 μg/L,准确度为99.17%,灵敏度为0.7305 μg/L,变异系数<10%,对氯霉素、青霉素具有极低的交叉反应;向空白猪肉、鱼肉、鸡肝中添加三种不同浓度的四环素标准品时,检测结果具有较高的准确度和重复性;建立的TC-CLEIA测定法检测了四环素小鼠中毒模型中肝脏、肾脏和肌肉中四环素残留的浓度,浓度大小依次为:肾脏 > 肝脏 > 肌肉。结论:本研究建立的TC-CLEIA检测法简便,检测限低,准确度、重复性、特异性均很好,适用于动物源性食品中四环素残留的检测。     

多重qPCR法鉴定麦卢卡蜂蜜

目的运用新西兰政府初级产业部(Ministry of Primary Industry, MPI)提出的多重qPCR方法鉴定麦卢卡蜂蜜。方法参照MPI提出的多重qPCR方法,建立麦卢卡标准曲线,提取15个未知来源的蜂蜜样品样品中的花粉DNA,进行样品多重qPCR检测分析。结果建立麦卢卡标准曲线获得Manuka通道的阈值范围,可以用于今后蜂蜜样品的麦卢卡特异性分析。M2-4蜂蜜样品中的花粉DNA不来自麦卢卡树Leptospermum scoparium。结论本研究对MPI提出的鉴定麦卢卡蜂蜜方法起到很好的推动及指导作用。     

红棕榈油的短期毒性试验研究

为评价红棕榈油作为烹调用油的安全性,按照GB 15193.22—2014《食品安全国家标准28天经口毒性试验》对马来西亚产红棕榈油进行短期毒性试验。将100只SD大鼠分为5组,按照人体摄入量的5.12、10.24、20.48倍设置红棕榈油低、中、高剂量组,同时设置溶剂对照组(玉米油组)和阴性对照组(棕榈油组)。采用掺入饲料和经口灌胃两种方式同时连续给予大鼠红棕榈油28 d,每天观察大鼠临床表现,每周记录体质量、摄食量,计算食物利用率等指标,试验前和结束时对大鼠进行眼部检查,结束时进行血液学、血生化、尿常规检测,并进行大体解剖,计算脏器系数并进行组织病理学检查。结果表明,红棕榈油以雌性2.04、4.11、8.31 g/kg,雄性2.12、4.23、8.45 g/kg的实际剂量给予大鼠28 d,受试大鼠临床表现良好,体质量、食物利用率、脏器质量、脏器系数均无异常改变;血液学、血生化及尿常规指标均在正常范围;各脏器病理组织学检查均未见与受试样品有关的病理改变。短期毒性试验结果表明红棕榈油未对大鼠产生毒性效应,短期经口食用是安全的。     

Vero细胞无血清培养基的优化

目的通过试验设计(design of experiments,DOE)方法和统计学分析快速优化Vero细胞无血清培养基。方法以DMEM/F12为基础培养基,通过Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和Box-Behnken试验考察7种添加物胰岛素、人转铁蛋白、透明质酸、牛血清白蛋白、亚硒酸钠、表皮生长因子和高密度脂蛋白对Vero细胞生长的影响,以CCK-8测定的吸光度值(A490)为响应值,优化Vero细胞无血清培养基。用最优化的因子浓度配制的Vero细胞无血清培养基培养Vero细胞,对优化结果进行验证。结果通过Plackett-Burman试验筛选出胰岛素、牛血清白蛋白和人转铁蛋白对Vero细胞生长影响较大;采用最陡爬坡试验和Box-Behnken试验进一步优化,Design-Expert 8.06软件进行回归分析,得到胰岛素、人转铁蛋白和牛血清白蛋白的最佳浓度分别为5.625μg/ml、14.034μg/ml和3.92 mg/ml,在此优化条件下的A490值为2.3,较基础培养基提高了3.41倍。用最优的胰岛素、人转铁蛋白和牛血清白蛋白浓度配制的Vero细胞无血清培养基培养Vero细胞的A490值为2.148,为预测值的93.4%,符合度较高。结论应用DOE方法快速高效地优化了Vero细胞无血清培养基,为无血清培养基的研制奠定了基础。     

食品中诺氟沙星残留管式化学发光免疫测定法的研究

目的 建立检测食品中诺氟沙星(norfloxacin, NFLX)残留的管式化学发光免疫测定法(chemiluminescence immunoassay, CLIA)。方法 以磁性微粒为固相载体, 通过优化抗原包被浓度、磁微粒稀释度、反应时间及pH值, 建立一种可以检测食品中诺氟沙星残留的管式化学发光免疫测定法。结果 该方法的检测范围为0.1668~68.6804 ng/mL, 检测限为0.1161 ng/mL, 准确度为94.52%, 灵敏度为1.8717 ng/mL, 变异系数<10%, NFLX与洛美沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星交叉反应极低。结论 本研究建立的NFLX-CLIA测定法特异性、灵敏度、准确度、重复性均符合要求, 样本前处理简单, 检测时间短, 适用于食品中诺氟沙星残留的检测。