5(6)-cFDA 标记乳酸菌细胞的影响因素

选用常规发酵乳菌种,探讨不同溶剂、不同浓度的羧基荧光素二醋酸酯(5-(6)-Carboxyfluorescein diacetate,5(6)-cFDA)标记乳酸菌细胞的影响因素。结果显示：水、PBS 和二甲基亚砜(DMSO)配制的5(6)-cFDA 标记初期,细胞标记率分别为94.8%、95.2% 和99.77%,放置30d 后细胞标记效果分别下降到51.53%、55.6% 和96.7%;每毫升菌悬液加60μL 的5mg/mL 5(6)-cFDA(相当于终浓度为6.52 × 10-7mol/L),其荧光强度与5(6)-cFDA 浓度成正比,且标记效果最理想。实验还证实了1 × 106～1 × 107cells/mL 是流式细胞仪检测细胞活性较适合的浓度,且标记率较高;在pH7.0 的条件下对细胞活性和发光强度影响最小,其标记率达到98.3%。     

OBJ格式3D模型应用于DirectX编程的分析

本文分析了OBJ格式3D模型数据特点及Direct X SDK下编程OBJ文件数据加载的实现方法。OBJ格式用于Direct X SDK编程简单易行,在用3ds Max导出OBJ格式模型时,需正确设置导出选项;OBJ格式模型数据加载模型速度慢,不适合大型模型的编程。     

HPLC测定中添加剂前处理方法的探讨

探讨了HPLC测定酸奶中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的前处理方法,选用在文献中曾用的4种化学沉淀剂,通过实验与传统的蛋白质沉淀剂相对比后,得出无水乙醇可替代质量浓度106 g/L亚铁氰化钾溶液-219 g/L乙酸锌溶液的结论。采用C18反相柱,以甲醇∶乙酸铵(质量浓度1.54 g/L)=5∶95为流动相,紫外检测器在230 nm处检测。通过对两种乳制品的对比实验,用无水乙醇沉淀蛋白质效果好,测定结果与传统方法最相近,苯甲酸、山梨酸、糖精钠的相对标准偏差分别是1.091%,1.314%,1.019%,平均加标回收率分别是98.7%,102.7%,98.4%。实验结果表明,该方法操作简便、快速,精密度和准确度较好。     

流式细胞术分析与评价酸奶菌种对模拟胃酸和胆汁盐的耐受力

研究传统酸奶菌种对人体胃酸和胆汁盐的耐受性,对评价酸奶的益生性具有重要意义。实验选取普通酸奶中的嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌作为研究对象,模拟胃肠环境以探讨所选两种菌株在不同pH 值和不同质量浓度脱胆盐下的耐受力,用流式细胞仪(FCM)结合羧基荧光素二醋酸酯(5-(6)-carboxyfluorescein diacetate,5(6)-cFDA)和碘化丙锭(propidium iodide,PI)两种荧光染料评价其活力。结果表明：pH2.0 时,菌体细胞活性较低,其活细胞标记率仅为41.8%,在pH3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 时,活细胞标记率越来越高,对其抑制性的影响逐渐减弱;在1g/100mL 的脱胆盐(DBS)中,活细胞标记率为48.7%,而在0.5、0.25、0.1、0.05g/100mL 的DBS 中时,活细胞的标记率越来越高;同时比较FCM 与平板菌落计数法检测菌体细胞的耐受水平。实验证实酸奶菌种能耐受pH 值为5.0～7.0 的胃酸和0.05～0.5g/100mL 的DBS;FCM 检测的菌体细胞的状况更能恰当地反映发酵酸奶品质的优劣。