姜黄素衍生物对乙醛脱氢酶1的活性抑制及构象关系研究

该研究测试了姜黄素及姜黄素衍生物对乙醛脱氢酶1(ALDH1)的体外抑制活性。结果表明大部分化合物对ALDH1具有较好的抑制作用,其中化合物A2对乙醛脱氢酶1的抑制作用最强,IC_(50)为8.2μmol/L,与对照物二硫仑(IC_(50)2.91μmol/L)的抑制活性在同一数量级,且比姜黄素(36.9μmol/L)的活性高4.5倍。通过Surflex-dock对姜黄素衍生物与ALDH1的分子对接相互作用研究,发现母体为戊二烯酮结构的化合物,当增加两端苯环的氢键受体和吸电子取代基,以及增加戊二烯酮母体结构的氢键供体及疏水性时,抑制活性增强。姜黄素及其衍生物可成为ALDH1的新型抑制剂。     

警惕头孢菌素致双硫仑样反应

目的:分析头孢菌素致双硫仑样反应的临床表现、发生机制和处置措施,旨在提醒广大医务工作者警惕双硫仑样反应,避免临床误诊漏诊。方法:对2009年01月至2012年01月我科收治的31例头孢菌素致双硫仑样反应病例进行回顾性分析。结果:31例双硫仑样反应病例均发生在使用头孢菌素期间或用药后1周内。临床表现类醉酒样,面部潮红、头痛、心悸、气促、烦躁等。31例患者在治疗后病情恢复出院。结论:详细询问病史,结合临床表现尽早做出双硫仑样反应诊断,轻者给予休息、补液,重者再给予多巴胺、地塞米松、纳洛酮等治疗,病情可获得较快好转。     

酿酒酵母产乙醛脱氢酶发酵条件的研究

选择了一株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌As 2.399,通过单因素和正交实验得到酿酒酵母产乙醛脱氢酶(Aldehyde Dehydrogenase,ALDH)的最优发酵条件.结果表明,产ALDH的最优培养条件为温度30℃、pH值为6、通气量为200 mL、接种量为7%.液体发酵培养中pH值对ALDH活性的影响最大.     

巴氏醋酸杆菌AS1.41产醋酸关键酶研究

巴氏醋酸杆菌（Acetobacer pasteurianus）将乙醇氧化成醋酸的关键酶是乙醇脱氢酶（ADH）和乙醛脱氢酶（ALDH）。在不同初始乙醇含量条件下,ADH和ALDH的酶活呈现动态变化,乙醇含量为4%时,ADH和ALDH的酶活达到最大,分别为7.43 U/mg和7.18 U/mg。同时,酶活与产酸速率呈现出较高一致性：酶活越高,产酸速率越快。发酵温度为32 ℃时,菌体生长最为活跃,酶活最大,产酸最快;加入0.5%的乙酸后,ADH和ALDH的酶活分别由8.12 U/mg和7.06 U/mg提高到了9.43 U/mg和8.52 U/mg,产酸速率也得到相应提升。ALDH对乙醇、乙酸、温度的稳定性均高于ADH。     

人乙醛脱氢酶2与NusA的融合表达

通过将乙醛脱氢酶2（acetaldehyde dehydrogenase 2,ALDH2）与NusA-tag融合表达,以获得能够在大肠杆菌中可溶性表达并且具有较好活性的重组蛋白。首先,根据Aldh2的基因序列设计引物,引入EcoRI和XhoI的酶切位点,聚合酶链式反应扩增出Aldh2基因片段,连接到pMD19-T-simple载体,并转化到大肠杆菌DH5α菌株。测序正确后,双酶切处理,将Aldh2基因片段克隆到表达载体pET44b（＋）上NusA-tag下游的EcoRI和XhoI酶切位点之间,得到pET44b（＋）-NusA-Aldh2重组载体,转化入大肠杆菌BL21（DE3）菌株。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG）诱导,表达的融合蛋白具有良好的溶解性,主要存在于上清液中。融合蛋白的最优表达条件为IPTG浓度0.25 mmol/L、诱导温度37 ℃、诱导时间3 h。重组蛋白的最适反应温度为37 ℃,在pH 7.0时达到最好的催化效果。不同金属离子如Ca2＋、K＋、Na＋、Mg2＋、Mn2＋都对酶有激活作用,且Mg2＋效果最好,最佳的酶活性为1.64 U/mL。而野生型ALDH2在大肠杆菌中表达时完全以无活性的包涵体形式存在,复性后得到的酶活性为1.43 U/mL。本研究通过引入NusA进行融合表达,实现了ALDH2在大肠杆菌中的可溶性表达,且重组蛋白的活性优于包涵体复性蛋白。这些结果表明利用NusA进行融合表达是制备重组ALDH2的一个良好方法。     

基于香气活力值分析白酒风味化合物对乙醇代谢关键酶的影响

以香气活力值（OAV）为基础,通过体外酶学实验研究了浓香型白酒中酯类、醇类物质对乙醇脱氢酶（ADH）和乙醛脱氢酶活性（ALDH）的影响。结果表明,浓香型白酒中己酸乙酯香气活力值最大（OAV≥7 284）,其次分别为戊酸乙酯（OAV≥1 276）和丁酸乙酯（OAV≥845）;白酒中风味化合物对两种酶活性的影响差异很大,醇类和酯类的加入会抑制ADH活性,其中正戊醇、异丁醇和戊酸乙酯的抑制率最高,分别为27.64%、29.32%和26.72%,且具有剂量依赖性（R2＞0.9）;然而,除了正丙醇,大部分醇类和酯类的加入会不同程度的促进ALDH活性。     

影响浓香型白酒醉酒程度的风味物质特异性分析

为研究影响浓香型白酒醉酒程度的关键成分,通过动物行为学和酒精代谢生物标志物,对八款市售浓香型白酒醉酒程度进行评价,结合酒体成分主成分分析（PCA）影响浓香型白酒醉酒程度的主要成分,并通过体外酶学实验探究其对乙醛脱氢酶（ALDH）的影响。结果表明,异戊醇和正丙醇对醉酒程度有负面影响,异戊醇质量浓度为20～310 mg/L范围时,乙醛脱氢酶活力随着异戊醇质量浓度的升高而降低;正丙醇质量浓度在30～500 mg/L范围时,乙醛脱氢酶活力随着正丙醇质量浓度的升高而降低。由此推断,异戊醇、正丙醇含量过高会降低乙醛脱氢酶活力,使得乙醛在体内累积,从而影响浓香型白酒醉酒程度。     

表没食子儿茶素没食子酸酯与L-茶氨酸对乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性的体外协同作用

目的 探究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechingallate,EGCG)与L-茶氨酸对乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase, ADH)和乙醛脱氢酶(acetaldehyde dehydrogenase, ALDH)活性的体外协同作用。方法 设置不同浓度及组分,以0μg/mL实验组为对照,先后进行单因素实验和最优组合验证实验,通过对ADH、ALDH活性的检测,确认EGCG、L-茶氨酸不同剂量的解酒效果并探究其最佳配比。结果 单因素实验中,样品质量浓度为200、300μg/mL实验组相较于0μg/mL浓度组,随着EGCG和L-茶氨酸的添加, ADH和ALDH活性显著高于空白组(P<0.05);最优组合验证实验中,11组不同配比组合物对ADH和ALDH活性均具有促进作用,且协同组比单因素组激活效果要更好。其中,当配比组合物为7:3时, ADH、ALDH的活性最高。结论 EGCG、L-茶氨酸解酒组合物最佳配比为7:3时ADH与ALDH活性最高,研究结果为EGCG、L-茶氨酸组合物用于抗醉酒药物研发提供科学依据。     

从废弃啤酒酵母提取乙醛脱氢酶的研究

用冻融与超声提取相结合的工艺从废弃的啤酒酵母细胞中提取乙醛脱氢酶,探讨了料液比、超声强度、超声时间、提取液pH、提取液浓度以及提取次数对提取的影响,确定了提取的最佳工艺条件：以0.05 Mp、H 8.5的磷酸缓冲液为提取液,按料液比1∶3、超声强度350 W、超声时间32 min对10 g废酵母进行2次提取,所得酶活力达11.2 U.     

喝酒脸红 萝卜解毒

在日常生活中,常见到许多人喝完酒以后脸红,但是,也有脸不红的。经研究发现,喝酒爱脸红的人,身体内缺少一种可以帮助代谢酒精的乙醛脱氢酶。由于缺少酶的作用,乙醛就会在体内迅速累积,迟迟不能代谢,长期作用于食管黏膜,久而久之还可能引发食道癌。因此,那些喝酒容易脸红的人,应该多吃一些可以保护食管的食物,而白萝卜就是不错的选择。白萝卜性凉,味辛、甘,可消食、解毒、化痰热,对喝酒的人来说,是最好的食物。