啤酒酵母原生质体融合株GR8的中试研究

啤酒酵母原生质体融合株GR8的中试表明:融合株GR8凝絮性较强(本斯值为3.0);以12oBx麦芽汁为培养基,用500L发酵罐在12℃下发酵15d,发酵度为69.6%;发酵液中的双乙酰、乙醛、总高级醇、乙酸乙酯和乙酸异戊酯的含量分别为0.0390mg/L,3.26mg/L,84.7mg/L,11.14mg/L和0.99mg/L。     

啤酒酿造酵母原生质体融合株GR5的中试

报道了啤酒酵母原生质体融合株GR5的中试结果。融合株GR5的凝絮性较强 (本斯值为 2 .7) ,以12°Bx麦芽汁为培养基 ,用 5 0 0L发酵罐在 12℃下发酵 ,发酵至第 8d菌株GR5的发酵度为 6 9.2 % ,发酵液中的双乙酰含量为 0 .0 4 98mg/L、乙醛含量为 6 .34mg/L ,总高级醇含量为 74 .4mg/L ,该菌株生产的啤酒 ,口感柔和、协调 ,略带酯香味。融合株GR5的遗传性稳定 ,是一株具有工业应用前景的啤酒酿造酵母菌株     

双亲灭活原生质体融合选育高性能酒精酵母菌的研究

为了选育高性能的酒精酵母菌,利用双亲灭活和PEG诱导,对酿酒酵母GGFS16和GJ2008单倍体细胞进行了原生质体融合。从42株融合子中筛选得到了2株融合菌株RH3和RH5,分别适合于木薯粉和甘蔗汁酒精发酵,且较好的保持了亲本的特性。其中RH3在耐酸能力上,RH5在酒精耐受能力上要优于亲本,RH3的遗传稳定性要优于RH5。     

双亲灭活米曲霉原生质体融合中原生质体制备的研究

对双亲灭活米曲霉原生质体融合育种中原生质体制备的条件进行了研究,将菌丝的预处理与细胞壁的酶解合为一步,并讨论了DTT的加入量。结果表明,原生质体制备的最佳破壁酶为纤维素酶、溶壁酶、蜗牛酶3种酶混合浓度比为5:3:1;菌丝培养15h;酶解时加入3mol/L DTT;酶解2.5h;0.8mol/L NaCl作为渗压稳定剂。所得双亲菌株原生质体的融合率为3.31%。     

啤酒酵母融合株GR8发酵特性的初步研究

研究了啤酒酵母原生质体融合株GR8的主要发酵特性。以12°Bx麦芽汁为三角瓶发酵培养基,在12℃下发酵8d,融合株GR8的发酵度为66.5%,凝絮性(本斯值)为3.0mL;发酵液中的双乙酰、乙醛、高级醇和乙酸乙酯等风味物质的含量分别为0.0583mg/L、9.66mg/L、91.20mg/L和22.8mg/L。从主要发酵特性的指标和口感品评以及遗传稳定性的结果表明,融合株GR8是一株具有工业应用前景的啤酒酿造酵母菌株。     

啤酒酵母融合株QSB—Ⅺ6中试研究

将新选育的酵母融合株ＳａｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＱＳＢ－Ⅺ６,同本厂生产中使用的酵母菌种ＳａｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＬＱ１６在２３０Ｌ发酵罐中做对比性发酵试验。试验酒的各项理化指标均已达到国家优质酒标准,其中双乙酰值在００８ｍｇ／ｌ以下,真正发酵度平均为７０２０％,酒体泡沫丰富,清亮透明。口味纯正,风味独特,为使该菌种能更好地应用于生产,奠定了基础。     

热-紫外灭活双亲原生质体融合选育米曲霉新菌株的研究

对米曲霉（AS3．951）GIM3．13和CICC2339的原生质体分别进行热灭活及紫外灭活,然后对灭活双亲用PEG（6000）作融合剂进行原生质体融合。融合实验最佳PEG（6000）浓度为35％,溶液pH值为7．5,融合率为4．24％。从融合子中选出17株生长速度快、菌落直径大的融合株,接种到酪素平板上测其Hc值,并与亲本菌株进行比较。结果发现,其中8株融合株的Hc值明显比生长速度快而产酶量低的亲本菌株GIM3．13大,菌株16号的Hc值还超过了产酶量高的亲本菌株CICC2339。     

原生质体融合构建耐高温酵母菌株

通过原生质体融合选育耐高温的酵母 ,以解决在纤维素类物质同步发酵过程中酵母发酵温度同纤维素酶酶解温度不一致的问题。利用电场诱导原生质体融合技术对产酒率高的菌株Sb1和产酒率低但耐高温的菌株No 30进行融合。经过融合条件的选择 ,分别对 2亲株进行遗传标记 ,3 5 %蜗牛酶处理原生质体 ,在脉冲强度为 11kV、宽度 10 μS、次数为 2次时进行融合 ,得到数株融合子。鉴定得知 ,融合子 2是所需要的融合子 ,其在固态发酵 45℃时产酒精能力达到体积分数 7 2 8%。     

面包酵母原生质体融合

面包酵母（Saccharomyces cerevisiae）两亲株原生质体的制备,是用对数生长早期的细胞,在蜗牛酶和17%蔗糖、20u/ml青霉索的作用下完成的,3060分钟内原生质体的形成率达8592%．两亲株的原生质体在35%PEG（M．W．6000）,0.4M CaCI2条件下被诱导融合．融合频率为10－410－5．     

具有杀伤能力之啤酒酵母的选育

运用原生质体融合技术成功地将杀伤质粒转入啤酒酵母中,并使其能十分稳定地表达杀伤性能。经发酵试验确认胞质融合株kSC-2_f-11具有与亲株相似的发酵性能。所生产出的嫩啤酒与亲株相似且能保持较长时间的杀菌活力。     

酵母属间融合构建高温发酵木糖生产乙醇优良菌株

通过单倍体分离和诱变获得 8株休哈塔假丝酵母 1 766和高温酿酒酵母G47的营养缺陷型突变株。并通过聚乙二醇 (PEG)和电诱导融合等方法 ,实现了能发酵木糖产生酒精的休哈塔假丝酵母和高温酿酒酵母之间的融合。融合子经DNA含量、细胞体积测定和稳定性能试验证明为稳定的融合子。F 71融合子能在 45℃下发酵木糖生产酒精 ,其在 45℃发酵木糖所产酒精体积分数为 1 .675 % ,其转化率为 68.8%。且与亲株比较 ,F 71的酒精耐受能力提高了 1 %。     

利用紫外线致死原生质体融合技术选育嗜杀啤酒酵母

本文利用紫外线致死原生质体融合技术,在对酿酒酵母(Sacchromyces cereuisiae)亲株CD4-W不做任何遗传标记的条件下,成功地将对紫外线敏感的嗜杀酵母(killer yeast)5174(α.radl ural[KIL-kd,crz~ro~r])菌株的嗜杀质粒转移到CD4—W中,并对5174菌株原生质体的形成及紫外线致死等条件进行了研究。 以PEG—6000作为融合促进剂,促使两种原生质体融合,获得的大量融合子经嗜杀活性检出实验、小型酿造实验、遗传稳定性实验、细胞形态及大小的测定、dsRNA质粒的提取及琼脂糖凝胶电泳等实验,最终选出5株遗传性能稳定的融合子:FP3—13,FP3—28,FP5—23,FP5—24,FP9—3。对实验结果的进一步分析表明:融合子遗传性状稳定,不仅含有供体菌5174的嗜杀质粒,而且还含有受体菌CD4—W良好的核基因,是遗传稳定的异质体。小型啤酒酿造实验表明:将融合子FP5—24用于啤酒酿造中,对于抵抗野生酵母的污染、净化发酵体系,保证啤酒纯种酿造的进行有明显效果。     

原生质体融合选育L-亮氨酸高产菌的研究

以黄色短杆菌TQ5 35 1(Met- +Ile- + 2 TAr+SGr)和TQ5 35 6(Met- +Ile- +α ABr+ β HLr)为亲株 ,采用原生质体融合技术 ,定向选育出一株L 亮氨酸高产菌TQ980 6(Met- +IleL + 2 TAr+SGr+α ABr+ β HLr) ,该菌株经 5L罐分批发酵 64h产L 亮氨酸2 2 7g/L。     

土曲霉与红曲霉双灭活原生质体融合选育洛伐他汀高产菌株

研究原生质体融合技术选育洛伐他汀高产菌株的方法。土曲霉(Aspergillus terreus)和红曲霉(Monascus anka)用混合酶液(体积分数0.5%溶菌酶,0.3%纤维素酶,0.3%蜗牛酶)分别酶解5.0h和3.5h制备原生质体,土曲霉原生质体和红曲霉原生质体在紫外线(20 W,30cm)下分别照射5min和4min灭活,灭活后混合并用PEG(体积分数30%PEG,0.05mol/LCaCl2,0.05mol/L甘氨酸)介导融合。在187株融合子中筛选得到27株洛伐他汀产量高于红曲霉出发菌株的融合子,其中有7株的洛伐他汀产量是出发菌的2倍以上。双灭活原生质体融合方法成功选育出红曲霉洛伐他汀高产菌株。     

原生质体电融合法构建葡萄酒降酸酵母的研究

以发酵性能优良的葡萄酒酵母F83和具有降解苹果酸能力的酒类酒球菌作为亲本菌株,进行电融合,构建发酵性能良好且具有降解苹果酸能力的葡萄酒酵母菌株.结果表明,两亲本菌株原生质体电融合的最佳条件为:交变电压55 V,交变电场频率1000 kHz,脉冲宽度30μs,脉冲个数5个.共获得13株融合株,其中10号融合子发酵、降酸性能较佳.     

苹果白兰地发酵酵母菌株的筛选及其性能研究

以在云责高原上所种植的青苹果为研究对象,从其自然发酵醪中分离得到10株菌种.通过产气能力、耐性试验、产酒精试验三级筛选得到1株适合苹果白兰地发酵的酵母菌,命名为GN-1.结果表明,该酵母菌可耐受16 ％vol乙醇,可耐糖浓度为750 g/L,发酵初始糖度为14°Bx,发酵液的酒精度为8.3 ％vol;该酵母菌发酵性能的试验结果显示,其最适生长温度为34℃,最适生长pH值为4.0～6.0.     

啤酒发酵过程中酵母代谢形成SO_2的机理及变化规律的研究

对啤酒发酵过程中酵母代谢形成SO2的机理进行了探讨,并对发酵过程中SO2的变化进行了跟踪检测。研究结果表明,发酵过程中生成的SO2主要来源于酵母合成蛋氨酸时吸收还原麦汁中的硫酸根。酵母代谢形成SO2受到各种氨基酸的调节,尤其是蛋氨酸。发酵过程中SO2的含量呈先增加后缓慢降低最后维持稳定的趋势。     

糖化酵母在干啤酒生产中应用的研究（Ⅱ）──原生质体细胞融合法选育高发酵度啤酒酵母

本文利用ＰＥＧ诱导原生质细胞融合技术，进行糖化酵母单倍体Ｈ－３（２）－２菌株与优良嗜杀啤酒酵母５－２４菌株的原生质体细胞融合实验。在对融合亲本不做任何遗传标记的情况下，将糖化酵母的糖化酶基因（ＳＴＡ）转移到嗜杀啤酒酵母中，获得１株高发酵度嗜杀啤酒酵母Ｆ－３５－８８菌株。对融合子Ｆ－３５－８８菌株分析表明，融合子遗传性状稳定，不仅具有较强的糊精利用能力和较高的发酵度，而且具有嗜杀活性，对于干啤酒的生产及提高成品酒的生物稳定性有明显效果。