提高酵母数测定方法准确性的探讨

1 酵母数测定在啤酒工厂中的重要性。发酵过程中，满罐酵母数、回收酵母泥的酵母密度和死亡率、贮酒过程酵母数等都是需要控制的主要参数之一，其数值直接影响发酵过程的稳定以及啤酒风味。目前对于酵母数的测定基本上还是采用人工使用血球计数板和显微镜测定的方法，但在测定过程中，由于稀释倍数，取样方法，人员等因素，容易造成测定误差。因此有必要对提高酵母数测定方法的准确性进行探讨。     

从酵母死亡率估算大罐发酵酵母添加量

如今绝大多数的啤酒生产企业已采用大罐发酵。与传统发酵工艺相比，它具有发酵总周期短，产量高，质量易控制，尤其是便于集中电脑控制等优点。现在有不少厂家为了便于操作，在回收与添加酵母时采取直接地罐与罐之间的转换添加法，免去了回收、清洗、泵入新罐的操作，这对于准确地把握酵母细胞添加的质与量带来一定的难度。相对而言，大罐发酵的酵母死亡率高于传统发酵，一般传统发酵的添加酵母死亡率小于5％是可以达到的，但对于直接转加法的大罐酵母就难以做到。上海啤酒有限公司的大罐发酵采用了丹麦DAN-BREW生产工艺和丹麦提供的酵母…     

啤酒生产中回收酵母泥处理剂的选择试验

对啤酒生产过程中回收的酵母泥采用加入过饱和硫酸铵、Nisin、磷酸等处理剂进行处理，在保证酵母死亡率不高、无毒无害、不影响啤酒口感和有效杀灭细菌的条件下，选出最佳处理剂及其作用强度、作用时间、处理方式。结果表明：(1)添加酸化的过饱和硫酸铵能引起酵母大量死亡，死亡率甚至达10％，而对厌氧菌没有作用；(2)加入酸化Nisin，不影响酵母死亡率，能杀灭99％的厌氧菌；(3)单独添加磷酸能杀灭99．9％以上的细菌，达到实验目的，最佳工艺条件为pH2．5，作用时间2h，30min时追加一次磷酸。     

全自动酵母细胞分析仪的检测应用

本研究采用一种新型的酵母全自动分析仪测定酵母数及酵母活力,通过与传统酵母计数方法对比,对单一样本测定变异系数、不同样本配对t检验检测p值,并通过仪器测定死亡率与传统方法进行精确度的对比,确定了全自动细胞分析仪是一种更为快速精确的测定方法,可为企业生产应用提供一种新的方法。     

米酒酿与酵母混合发酵对馒头品质影响

主要研究米酒酿与酵母以不同比例混合发酵对馒头品质的影响。通过测定发酵力、糖化力、酯化力以及馒头的白度、硬度和感官评分,找出米酒酿与酵母的最佳的混合比例。研究结果表明,在米酒酿与酵母以1︰2混合时,馒头品质最好。     

用于准确评价酵母絮凝性能的新方法研究

建立了1种快速、灵敏分析特定酵母絮凝性能的新方法。通过考察酵母悬浮液初始浓度、缓冲液pH值、各组分用量比例、体系水质等多因素对酵母絮凝性能的影响规律,优化确立了该测定体系的最佳参数:pH3.90的缓冲液2.7 mL和0.8 mL初始浓度0.3 g/mL的酵母悬浮液,体系适宜水质选择经离子交换处理后的纯净水。该方法操作简便,测定结果准确可靠。     

浅析酵母死亡率的控制

酵母死亡率影响啤酒质量,同时具有一定的延续性。了解影响酵母死亡率的各种因素有利于啤酒质量的控制。下面就这一问题作些探讨:一、酵母死亡率的影响因素酵母死亡率的高低主要由酵母菌种类型、温度、PH 值、时间和麦汁营养等因素决定。高温发酵易造成酵母死亡率的上升,不仅是由于高温条件下酵母细胞数峰值过高,造成酵母营养不良而衰老或死亡,另外是由于高温使酵母易自溶,加速酵母死亡;酵母生长有较适的 PH 值,或低或高均能导致酵母死亡率上升;在其他因素一定的情况下,保种时间越长,则酵母死亡率越高;麦汁营养不良亦会造成酵母死亡率的增加,其他诸如设备等因素也会影响酵母的死亡率。     

三种传统发酵食品中酵母菌的分离鉴定与特性分析

从红茶菌、藏灵菇及酸菜3种传统发酵食品中分离、鉴定酵母菌,并测定其产乙醇能力及生长性能。结果表明,从3种传统发酵食品中分离出9株酵母菌,包括3株马克斯克鲁维酵母（Kluyveromyces marxianus）、1株Starmerella davenportii、3株异常假丝酵母（Candida incommunis）及2株瑟氏哈萨克斯坦酵母（Kazachstania servazzii）。马克斯克鲁维酵母X1-1和X3-3可发酵葡萄糖、蔗糖和乳糖,其他酵母菌株只发酵葡萄糖。3株马克斯克鲁维酵母产乙醇力较弱,分别为29.8%vol、42.6%vol及29.6%vol,但生长速率快且活菌数高,其中菌株X1-2约6 h时进入对数期,约30 h时达到最大生物量（OD600 nm=6.152）,而其他3种酵母则生长缓慢。异常假丝酵母R5-2和瑟氏哈萨克斯坦酵母M2-2产乙醇能力较强,分别为75.8%vol和71.0%vol。     

不同酵母对面团发酵特性及馒头品质的影响

就不同酵母对面团发酵特性和馒头品质的影响进行了试验.通过比较不同酵母发酵面团的产气量和面团膨发状态,进而确定相同条件38℃,88%RH,酵母添加量0.8%,不同酵母的最适发酵时间,然后对其发酵的馒头进行感官评价和质构测定,结果显示:不同酵母发酵面团时的产气量和面团膨发状态不同,Y-1、Y-2、Y-3和Y-4的最适发酵时间依次为40、30、25和30 min.由感官评价和质构测定结果还得出结论:不同酵母显著影响馒头产品的感官评价总分,且感官评价和质构测定参数与其面团发酵性能相一致.     

酵母死亡率测定方法的比较

本文利用次甲基兰染色法、次甲基紫染色法以及平皿培养法,分别对不同生理状态的啤酒酵母进行死亡率的测定。结果发现:两种染色法对强壮、活性高的酵母有较高的准确性,但是对活性不强、死亡率较高的酵母而言,次甲基紫染色法的准确性较高,次甲基兰染色法存在着较大的误差。而平皿培养法由于稀释过程中较大的误差存在,因此对活性高的酵母死亡率也存在着较高的误差。     

啤酒生产中酵母的检查

四测定结果的示例下述测定数据是王聿桦、华玲玲二同志在复旦大学毕业实习中于上海华光啤酒厂以“啤酒酵母性能测定试验”为题的工作结果。我指导了这次实习。1.新老酵母性能对比根据生产用酵母的使用代数不同,得出检查结果如下:(1)染色检查(2)发酵强度(见表2)(3)形态检查一代酵母:形状较为整齐,边缘光滑,园椭园形。三代酵母:形状整齐,呈椭园形。八代酵母:形状不整齐,空胞大而多(形态检查只做了以上三种酵母)。     

降解赭曲霉毒素A菌株的筛选及其鉴定

为了提供筛选生物降解赭曲霉毒素A（ochratoxin A,OTA）的便利条件,优化水系中OTA的测定方法。通过在水系中添加甲醇或乙醇的方法,使得水系中OTA回收率超过了90%,此外通过对比,当甲醇或乙醇与样液体积比为1∶1时,足以准确测定水系中OTA含量。利用以上方法对降解OTA的菌株进行筛选,发现细菌B-1和酵母Y-2均能够降解OTA,且细菌B-1在2 d时能降解87%的OTA,3 d将OTA全部降解,而酵母Y-2在2 d时就能够降解84%的OTA,在后续的培养中维持降解率不变。此外,利用液质联用法进一步确定了菌株B-1和Y-2的降解作用,并分析了降解产物。最后,通过分别分析细菌B-1和酵母Y-2的16S rDNA和ITS rDNA序列,菌株B-1鉴定为泡囊短波单胞菌,菌株Y-2鉴定为耶罗维亚酵母。     

甜菜糖蜜连续发酵生产酒精

1.设备发酵罐两个,直径5.3m,容量约113m~3,装发酵醪90m~3,罐底安装卧式平行多孔管通风,最大风量每小时通入空气140m~3,罐内装有三桨低速搅拌器。2.操作两罐相互联结,糖蜜液以一定速度流入第一罐,再溢流到第二罐,在这里结束发酵,经酵母分离器除去酵母,醪液送往蒸馏,酵母回入发酵罐1。发酵开始时,将甜菜糖蜜、水、压缩酵母加在罐1,从罐底通入空气,让酵母充分发育繁殖。     

酱香型白酒高温堆积糟醅中酵母菌分离、选育及其分类学鉴定

我们以酱香型白酒高温堆积糟醅为含菌样品，经分离得多株耐温、耐酸酵母菌株，对它们的发酵力、产香特征及次生代谢产物分析测定，确认Y1、Y5－1、Y5－2、Y6－1为主要功能菌。通过形态特征、生理生化特征的测定，它们分别归属于酵母属中的意大利酵母、地生酵母、酿酒酵母、间型假丝酵母。     

优良香梨酒酵母的选育

分离选育优良香梨酵母菌的方法及控制要点 :其分离方法是经采样、驯化分离、酵母筛选、发酵性能测试 ,第二次筛选出 1 0株酵母。再进行野生酵母生物学测定 ,经发酵力测定、温度的适应性、抗ＳＯ2能力测定、耐酒精度测定 ,第三次筛选 ,选出 2株品质优良健壮的香梨酒酵母。通过对香梨酵母的分离筛选、小样试验 ,选育出生长繁殖速度快、耐糖、耐酸、耐ＳＯ2 、耐酒精、有低温发酵能力、发酵平稳、酒精产率高、挥发酸生成少、且出酒风味浓厚、酒质上乘的优良菌种。优良香梨酒酵母的选育@王俊沪$新疆轻工技术学院!830021…     

酿酒酵母GY-1的固定化及其对魔芋寡糖中单糖的利用

以酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）GY-1作为实验菌株,利用魔芋粉和海藻酸钠搭配作为固化交联剂进行固定化酵母制备,并通过固定化酵母去除魔芋水解产物中的还原单糖。结果表明,2%的魔芋粉和1%的海藻酸钠组合作为固定化剂,并混合5%的粉状酵母GY-1添加到40 ℃热水中,搅拌混合形成多糖胶体,通过微量泵加入到4%的CaCl2溶液中,在低温条件下交联反应10 h,形成固定化酵母颗粒均匀,平均直径为4～5 mm,包埋的酵母死亡率低于10%;采用薄层层析（TLC）法检测,发现固定化酵母GY-1能够利用魔芋胶中还原单糖（葡萄糖、甘露糖）,从而达到纯化魔芋寡糖的目的。     

血球计数板法测定酵母数和出芽率时应注意的问题

本文提出并分析了大生产中利用血球计数板法测定发酵液酵母数和出芽率时应注意的一些问题和建议,以使计数结果更准确。酵母细胞的计数方法有直接计数和间接计数两种。血球计数板法是直接计数法,死细胞和活细胞都计数在内。有几个操作因素会影响测定结果。     

一种酵母快速批量分子鉴定方法

26S rDNA D1/D2区域序列同源性分析是一种常用的酵母分子鉴定方法。D1/D2区域序列的扩增需要酵母染色体DNA作为模板,目前常用的酵母染色体DNA提取方法繁琐耗时且难以进行批量操作,限制了酵母分子鉴定的规模化。研究中建立了一种快速高效的批量酵母染色体DNA提取方法,整个提取过程仅耗时20min,从而使得酵母大规模快速分子鉴定成为可能。用该方法制备的染色体DNA不需要任何后续处理即可作为模板用于扩增酵母的26S rDNA D1/D2区域序列,获得了良好的扩增结果以及扩增产物的测序结果。     

啤酒酵母生产性状稳定性的实践

啤酒酵母生产性状的稳定性关系到啤酒正常发酵与产品质量的稳定问题 ,不能掉以轻心。保持啤酒酵母的良好性状应注意菌种保藏、酵母扩培、酵母使用与回收。以液氮超低温保藏最理想 ,酵母细胞存活率较高 ;酵母扩培从25℃起 ,分代逐渐降温 ,以保持其性能 ,扩培倍数以1∶5较理想 ,接种浓度为10×106～15×106 个/ml;生产使用时 ,满罐酵母接种浓度为10×106～12×106 个/ml为宜 ,以使用2～4代较理想 ,4代为限 ;酵母回收以低温(0℃左右)回收中间层较好 ,死亡率低、活力强 ,贮存时间不宜超过3天。(单雨)     

酵母分离株分子鉴定及其挥发性香气成分检测分析

测定了8类不同食品来源的12株酵母分离株26S rDNA D1/D2序列,与Genbank登陆序列比较分析,12株分离酵母鉴定为:3株酿酒酵母,2株戴尔有孢圆酵母、1株马克斯克鲁维氏酵母、1株喜仙人掌毕赤酵母、1株鲁西坦念珠菌、1株膜噗毕赤酵母、2株Kudriavzevii毕赤酵母,1株疑似新种。选用固相微萃取-气质联用(SPME-GC/MS)方法,完成了各分离株挥发性成分的检测。结果表明,酵母发酵后的香气组分主要为酯类,包括乙酸乙酯、辛酸乙酯、乙酸苯乙酯、癸酸乙酯等,其中菌株A1发酵后产生多种含量较高的挥发性组分及独有组分己酸乙酯。结果表明,酵母产生的香气组分、含量与酵母分离来源、种类有关,这可能与不同酵母代谢途径的差异相关。