HPLC-MS/MS法同时测定烟草中22种Amadori化合物

为同时测定不同类型烟叶中的Amadori化合物,围绕12种无标样Amadori化合物,分别进行了美拉德反应合成实验,基于高分辨的高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用仪(HPLC-Q-TOF-MS),通过精确分子量匹配及二级碎裂方式验证,准确定性了各反应体系中的Amadori化合物,确定了用于多反应监测(MRM)模式的定量及定性离子对。在前期建立的10种具有标样的Amadori化合物的外标绝对定量方法的基础上,对12种无标样Amadori化合物采用保留时间及结构较为近似的Amadori化合物标准品的标准曲线进行近似定量。结果表明:(1)连续进行6 d以上测试(共进样300针以上),14个Amadori化合物的日间精密度10%,5个Amadori化合物的日间精密度在10%～15%之间。(2)烤烟、香料烟和白肋烟样品分析结果表明,Amadori化合物总量分别占烟叶干质量的2.47%、1.70%和0.14%,且不同类型烟叶中各Amadori化合物的质量分数也存在较大差异。该方法可实现烟草中22种Amadori化合物的同时快速测定。     

不同香型烤烟中Amadori化合物测定及多元统计分析

采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法快速测定了烤烟中11种Amadori化合物,并结合主成分分析(PCA)、层次聚类热力图分析(HCHMA)及t分布随机邻域嵌入(t-SNE)等多元统计分析方法,研究Amadori化合物与烤烟香型的关系。结果表明:(1)目标化合物的线性关系良好(r0.995);检出限(LODs)为1.0～10.0 ng/mL;日内和日间精密度(RSDs)分别为1.1%～4.8%和2.9%～9.6%(n=6);回收率为87.8%～110.2%。(2)PCA和t-SNE分析结果表明不同香型烤烟具有明显的分类趋势,其中t-SNE分析的区分效果更明显;HCHMA将样品划分为8类,与香型和产地对应较好。(3)Amadori化合物测定结果结合多元统计分析方法,可为烤烟香型和产地分析、烟叶品质评价、配方设计优化提供技术支持。     

液质联用法同时测定烤烟型卷烟中的1-脱氧-1-L-脯氨酸-D-果糖和2-脱氧-2-L-脯氨酸-D-葡萄糖

1-脱氧-1-L-脯氨酸-D-果糖(Pro-Fru)和2-脱氧-2-L-脯氨酸-D-葡萄糖(Pro-Glu)是烤烟中重要的美拉德反应关键中间体(Amadori和Heyns化合物),对烟草香味和外观品质有重要影响。为实现烟草中这两种结构相似化合物的同时分析,建立了一种利用高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)测定烤烟型卷烟烟丝样品中Pro-Fru和Pro-Glu含量(质量分数)的方法。采用正离子多反应监测(MRM)模式,根据质谱碎裂机理分析选择各自的特征离子对(m/z)128/278和182/278作为定量离子进行分析,对10个烤烟型卷烟样品进行了测定。结果表明:方法加标回收率93.19%~101.46%,相对标准偏差(RSD)3.53%~8.54%,检测限0.12 ng/m L;10个烤烟型卷烟样品中Pro-Fru和Pro-Glu的含量分别为6.25~11.33和1.15~1.96 mg/g。该方法适用于烤烟型卷烟中Pro-Fru和Pro-Glu含量的同时、准确测定。     

气相色谱-串联质谱法测定食糖中18种邻苯二甲酸酯

研究建立了气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)测定食糖中18种邻苯二甲酸酯的方法。食糖样品经甲醇超声提取,浓缩后正己烷复溶,采用气相色谱-串联质谱进行测定,多反应监测模式(MRM)扫描,外标法定量。结果表明,18种邻苯二甲酸酯在0.01~0.2 mg/L范围内线性良好(r²>0.997),检出限为0.0003~0.0029 mg/kg。分别在样品中添加0.02、0.05、0.1 mg/kg的18种邻苯二甲酸酯标准溶液,回收率为82.4%~104.3%,相对标准偏差为1.3%~5.6%(n=6)。此方法可快速、准确测定食糖中18种邻苯二甲酸酯。     

反相高效液相色谱法测定白屈菜种子中挥发油 成分分析及氨基酸含量

目的研究白屈菜种子中挥发油的化学成分并建立一种反相高效液相色谱法对白屈菜种子中游离氨基酸和水解氨基酸含量进行测定。方法采用气质联用的方法对白屈菜种子中的挥发油成分进行分析,采用反相高效液相色谱法,以异硫氰酸苯酯为衍生试剂进行柱前衍生,采用梯度洗脱的方法,检测白屈菜种子中游离氨基酸和水解氨基酸含量。结果挥发油中共鉴定出化学成分27个,其中亚油酸的含量最高可达到65%左右。氨基酸的检测浓度线性范围为0.0020~0.2700 mmol/L,r均≥0.9991。21种游离氨基酸的平均加样回收率在87.88%~100.10%之间,RSD在0.62%~2.58%之间(n=6);水解氨基酸的平均加样回收率在91.79%~100.03%之间,RSD在0.48%~1.97%之间(n=6)。结论白屈菜种子种中挥发油的主要成分为不饱和脂肪酸,本文建立的氨基酸测定方法经方法学验证适合白屈菜种子中游离氨基酸和水解氨基酸的含量测定。     

柱前衍生RP-HPLC法测定仙鹤草中氨基酸含量

采用柱前衍生RP-HPLC法对仙鹤草中游离及水解氨基酸进行测定。以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂。以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂;色谱柱采用Ultimate Amino Acid氨基酸柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A为80%(体积分数)的乙腈-水溶液,流动相B为7%(体积分数)的乙腈-CH3COONa溶液(p H=6.5);检测波长为254 nm。21种氨基酸在0.001 9μmol/m L~2.700μmol/m L内呈良好的线性关系(R20.999 0)。21种游离氨基酸平均回收率在95.84%~111.34%之间,RSD在1.23%~2.54%之间(n=6);水解氨基酸平均回收率在90.79%~111.23%之间,RSD在1.29%~2.21%之间(n=6)。柱前衍生RP-HPLC法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适合仙鹤草中氨基酸含量测定。     

功能饮料、保健食品中11种水溶性维生素测定的HPLC-MS/MS方法研究

建立了测定功能饮料、保健食品中11种水溶性维生素的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析方法。样品经简单的提取、离心后,上清液分成两部分进行不同浓度的稀释或净化,得到样品测定液,采用ACOUTITY UPLC HSS T3(2.1 mm×50 mm,1.8μm)色谱柱进行分离,以甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,采用电喷雾离子源多反应监测(MRM)模式进行检测。在最佳试验条件下,11种目标化合物在相应的线性范围内其线性相关系数均大于0.9972,方法的回收率为85.6%~102.6%,相对标准偏差为2.6%~8.8%(n=6)。该方法简便、准确,可用于功能饮料、保健食品中11种水溶性维生素的检测。     

UPLC-MS/MS法测定纺织品中6种荧光增白剂

建立了检测纺织品中6种荧光增白剂(FWA 85、FWA 28、FWA 351、FWA 71、FWA 52和FWA 135)的超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。样品经60%甲醇水(体积比)超声提取,提取液经乙腈-5 mmol/L乙酸铵为流动相在C18色谱柱上梯度洗脱分离,在质谱的电喷雾正、负离子分段扫描和多反应监测(MRM)模式下测定。结果表明,6种待测物在各自线性范围内线性关系良好,相关系数均大于0.997;方法定量限(S/N=10)为0.02~4 mg/kg;3个添加水平的平均回收率在86.9%~103%;相对标准偏差(RSD,n=6)为3.0%~7.5%。实际样品检测结果表明,该方法具有前处理简单、结果准确等特点,适用于纺织品中6种荧光增白剂的同时测定和确证。     

液相色谱-串联质谱法检测植物源食品中 草甘膦及其代谢物的残留量

目的建立一种高效液相色谱-串联质谱测定植物源食品中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸残留量的分析方法。方法样品经水超声提取,用二氯甲烷去除脂肪,并用C18固相萃取小柱进行净化,以9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC-Cl)进行衍生,最后采用高效液相色谱-串联质谱进行测定。结果对茶叶和其他植物源食品的检出限分别为0.1 mg/kg和0.02 mg/kg,在5~100 ng/m L线性范围内线性关系良好(r20.999)。草甘膦各浓度水平的平均回收率为74.6%~96.5%,相对标准偏差为0.041%~0.553%(n=6);氨甲基膦酸的平均回收率为65.1%~79.4%,相对标准偏差为0.024%~0.338%(n=6)。结论建立的方法快速简便,灵敏度较高,精密度较好,符合国家标准对植物源食品中农药残留测定的要求,可用于食品安全监管。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定狭叶红景天中氨基酸含量

目的建立柱前衍生反相高效液相色谱法(reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)测定狭叶红景天中游离及水解氨基酸种类及含量。方法以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂;色谱柱采用Ultimate Amino Acid氨基酸柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A为80%(V:V)的乙腈-水溶液,流动相B为7%(V:V)的乙腈-CH_3COONa溶液(pH=6.5);检测波长为254 nm。结果 21种氨基酸在0.0019~2.700mmol/L内呈良好的线性关系(r~20.9990)。游离氨基酸平均回收率在97.80%~116.82%之间,RSD在1.93%~2.47%之间(n=6);水解氨基酸平均回收率在99.26%~111.23%之间,RSD在1.70%~2.23%之间(n=6)。结论柱前衍生RP-HPLC法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适合对狭叶红景天中氨基酸含量的测定。     

气相色谱-质谱联用法测定香肠中3种单甘油酯

建立一种气相色谱-质谱联用检测香肠中3种单甘油酯含量的方法。3种单甘油酯分别为单辛酸甘油酯、单癸酸甘油酯和单月桂酸甘油脂。样品以二氯甲烷-正己烷(1∶1)提取,提取液经浓缩后,经凝胶渗透色谱净化,气相色谱-质谱联用检测和确证,外标法定量。本方法测定低限为50 mg/kg。3种单甘油酯在20~1 000μg/mL范围呈良好线性,线性相关系数不小于0.999 6。回收率范围在81.3%~105%,测定结果的相对标准偏差(n=8)为3.64%~8.56%。该方法具有快速、简便、准确度高、精密度高的特点,适用于香肠中3种单甘油酯的测定。     

液相色谱-串联质谱法检测蜂蜜中15种喹诺酮类和17种磺胺类药物残留

目的建立同时测定蜂蜜中15种喹诺酮和17种磺胺类药物残留的液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)检测方法。方法样品经过磷酸盐缓冲溶液(pH=8)提取,过HLB(hydrophile-lipophile balance)固相萃取柱净化。以CORTECS C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.6μm)分离,以5 mmol乙酸铵、0.1%甲酸水(A)和0.1%甲酸-乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱。质谱分析以电喷雾为离子源(electrospray ionization,ESI+),采用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)。结果本方法在15 min内完成32种目标化合物的分离。15种喹诺酮和17种磺胺类药物在1.0、5.0和10.0μg/kg添加水平的回收率为54.9%~122.5%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于18.7%(n=6),方法检出限为0.4μg/kg,定量限为1.0μg/kg。结论该方法快速、准确、灵敏,适合测定蜂蜜中喹诺酮和磺胺类药物残留。     

GC-MS、RP-HPLC法测定奇亚籽中脂溶性成分及氨基酸含量

分析奇亚籽中脂溶性成分并建立一种柱前衍生-反相高效液相色谱法检测奇亚籽中游离氨基酸及总氨基酸的含量。采用气质联用的方法对奇亚籽中脂溶性成分进行分析,采用高效液相色谱法,以异硫氰酸苯酯进行柱前衍生,采用梯度洗脱,于254 nm波长处检测21种氨基酸含量。挥发油中鉴定出化学成分14个,其中亚麻酸的含量最高可达83.41%。21种氨基酸在0.005 0 mmol/L~3.250 0 mmol/L内呈良好的线性关系(R2≥0.999 0)。21种游离氨基酸的平均加样回收率在93.68%~102.36%之间,RSD在0.91%~2.76%之间(n=6);水解氨基酸的平均加样回收率在94.86%~105.73%之间,RSD在0.75%~2.83%之间(n=6)。奇亚籽脂溶性成分主要为脂肪酸,其中含量最高的为O-mega3多不饱和脂肪酸α-亚麻酸,柱前衍生反向高效液相色谱法经方法学验证具有良好的重复性和稳定性,适用于奇亚籽中氨基酸含量的测定。     

液相色谱-串联质谱法检测饲料中26种β2-受体激动剂类药物残留

目的建立一种饲料中26种β2-受体激动剂兽药残留的液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。方法样品经盐酸甲醇提取液提取,醋酸铅沉淀蛋白后,过混合阳离子(MCX)固相萃取柱净化。采用0.1%甲酸(A)和0.1%甲酸-乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱,质谱(ESI+)采用多离子检测模式(MRM)对β2-受体激动剂的定量离子和定性离子进行监测。结果本方法在15 min内完成26种目标化合物的分离分析。26种β2-受体激动剂在20、50和100μg/L添加水平的回收率为71.9%~102.9%,相对标准偏差小于11.8%(n=6),方法定量限为10μg/kg。结论该方法快速、准确、灵敏,适合测定饲料中的β2-受体激动剂类药物残留。     

QuEChERS-UPLC-MS/MS法测定酱油中8种生物胺

建立了同时测定酱油中8种生物胺的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。样品中加入1,7-庚二胺作为内标,以水稀释和氨水调节p H值后,加入乙腈进行液液萃取,盐析分层,萃取液经QuEChERS净化,调整酸度、浓缩、复溶后,以UPLC-MS/MS分离测定,内标法定量。在优化条件下,8种待测物在5.0μg/L~500μg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.998;方法检出限为30μg/kg~60μg/kg,方法定量限为120μg/kg~250μg/kg;在酱油样品中进行2个水平的添加实验(n=6),平均回收率为83.7%~110%,相对标准偏差为3.8%~11.5%。实际酱油样品检测结果显示,酱油中酪胺和苯乙胺的含量最高。本方法准确、灵敏、快速,适用于酱油中8种生物胺的同时测定。     

气相色谱-串联质谱法检测花生油中的250种 农药残留

目的建立气相色谱-串联质谱法同时测定花生油中250种农药残留的分析方法。方法样品经酸化乙腈提取,以乙腈+甲苯(3:1,V:V)作为洗脱液经C_(18)固相萃取柱净化,采用DB-5MS毛细管色谱柱分离;质谱采用电子轰击离子源模式电离,多反应监测模式对样品进行测定。结果本方法分为7组,完成250种目标化合物的分离分析。250种农药残留在0.02~0.2 mg/L范围内呈现良好的线性关系,相关系数r为0.990~0.999;样品中添加5、10和20μg/kg 3个浓度水平的250种农药混标工作液进行加标回收试验,平均回收率为70%~130%,RSD为1.8%~8.9%(n=5),检出限为5~10μg/kg。结论该方法准确、灵敏、重现性好、高通量,适合测定花生油中的多种农药残留。     

超高效液相色谱-质谱法检测海参中2种头孢类药物的残留

目的 建立一种超高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测海参中头孢曲松和头孢噻呋的分析方法。方法 样品经磷酸盐缓冲溶液提取, 过HLB固相萃取柱净化。采用0.1%甲酸和甲醇作为流动相进行梯度洗脱, 通过电喷雾离子源正离子检测模式和多重反应监测模式对头孢曲松和头孢噻呋进行定性和定量测定,基质外标法定量。结果 本方法在6 min内完成2种目标化合物的分离分析。该方法在5-200 ng/mL浓度范围内线性良好,相关系数(r_²)大于0.995。2种化合物在5、10和25 μg/kg添加水平的回收率为78.1%~95.3%, 相对标准偏差为3.05%~7.27% (n=6)。方法检出限为2 μg/kg,方法定量限为5 μg/kg。结论 该方法快速、准确、灵敏, 适合海参中头孢曲松和头孢噻呋残留的测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定畜禽肉中17种磺胺类药物残留

目的建立超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定畜禽肉组织中17种磺胺类药物残留的方法。方法样品经乙腈提取、浓缩,正己烷脱脂后在正离子模式下以电喷雾电离串联质谱进行测定,外标法定量。结果 17种磺胺类药物在5μg/L~100μg/L范围内线性良好,相关系数0.99,方法检出限为2μg/kg,定量限为5μg/kg。在10、20、100μg/kg的添加水平下,17种磺胺类药物的平均回收率在84.0%~114.2%之间,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD,n=6)在0.59%~7.96%之间。结论本方法快速、准确、灵敏,可应用于畜禽肉中17种磺胺类药物残留的同时检测。     

LC-MS/MS测定人参蜂王浆口服液中15种药物残留

建立了同时测定人参蜂王浆口服液中15种抗生素药物(6种喹诺酮类、4种四环素类、3种大环内酯类、2种林可胺类)残留的高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法。该方法采用pH8.0磷酸盐缓冲液提取样品,提取液经HLB固相萃取柱净化。以甲醇-乙腈-0.1%甲酸作为流动相,C18色谱柱对15种药物进行分离,电喷雾正离子多反应监测模式进行检测。方法检测限为0.02ng/mL~0.9ng/mL,线性范围0.08ng/mL~20ng/mL,加标回收率为71.8%~87.8%,相对标准偏差为2.2%~7.9%(n=9)。该方法准确、灵敏、简便,适用于人参蜂王浆口服液中四环素等药物残留的测定。     

SPE-LC-MS/MS测定爆米花桶中7种全氟有机物

建立了爆米花桶中7种全氟有机物(全氟己酸、全氟庚酸、全氟辛酸、全氟壬酸、全氟十二烷酸、全氟十四烷酸、全氟辛烷磺酸盐)残留的固相萃取-液相色谱-串联质谱(SPE-LC-MS/MS)分析方法。样品以1%甲酸甲醇超声提取,经C18固相萃取小柱净化,以0.1%甲酸乙腈-2mmol/L的乙酸铵水溶液为流动相,经C18反相色谱柱分离,采用多反应监测(MRM)负离子模式检测,外标法定量。通过阴性样品添加实验表明:方法的检出限为0.03~0.52μg/kg(S/N=3);平均回收率为:88%~110%;相对偏差为:1.7%~5.0%(n=6)。该方法前处理简单,回收率高,精密度好,适用于爆米花桶中全氟化合物的定量检测,为食品接触材料中全氟有机物的测定提供了方法。