不同香型烤烟中Amadori化合物测定及多元统计分析

采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法快速测定了烤烟中11种Amadori化合物,并结合主成分分析(PCA)、层次聚类热力图分析(HCHMA)及t分布随机邻域嵌入(t-SNE)等多元统计分析方法,研究Amadori化合物与烤烟香型的关系。结果表明:(1)目标化合物的线性关系良好(r0.995);检出限(LODs)为1.0～10.0 ng/mL;日内和日间精密度(RSDs)分别为1.1%～4.8%和2.9%～9.6%(n=6);回收率为87.8%～110.2%。(2)PCA和t-SNE分析结果表明不同香型烤烟具有明显的分类趋势,其中t-SNE分析的区分效果更明显;HCHMA将样品划分为8类,与香型和产地对应较好。(3)Amadori化合物测定结果结合多元统计分析方法,可为烤烟香型和产地分析、烟叶品质评价、配方设计优化提供技术支持。     

造纸法再造烟叶氨基酸、Amadori化合物含量分析及工艺影响研究

氨基酸、Amadori化合物与造纸法再造烟叶感官品质密切相关,本文研究国内外代表性造纸法再造烟叶产品中氨基酸、Amadori化合物含量差异,并结合再造烟叶生产过程中氨基酸、Amadori化合物含量变化趋势分析,以指导国产造纸法再造烟叶工业控制。研究结果表明,国内外造纸法再造烟叶产品中氨基酸、Amadori化合物含量有较明显差异,国外产品中氨基酸含量最低,其总量分别仅为烟叶、国产产品均值的46.83%、73.52%,而Amadori化合物中Fru-Leu、Fru-Val、Fru-Ile、Fru-Tyr、Fru-Amb含量高于烟叶和国内产品。结合国产造纸法再造烟叶生产工艺分析,提取、净化过程中氨基酸、Amadori化合物分别损失66.32%、74.24%,但浓缩过程中氨基酸、Amadori化合物含量分别增加了48.05%、76.49%,原料中氨基酸、Amadori化合物产品转移率分别为51.87%、47.12%。因此国产造纸法再造烟叶产品氨基酸、Amadori化合物的调控应重点关注提取、浓缩过程控制。     

LC-MS/MS法同时测定烟草中的16种游离氨基酸和6种Amadori化合物

为建立液相色谱-串联质谱联用(LC-MS/MS)同时测定烟草中的16种游离氨基酸和6种Amadori化合物的快速分析方法,烟草样品经水提取后,以甲醇和0.1%(体积比)甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,经Acclaim Explosive E2柱分离,采用电喷雾离子源以正离子多反应监测模式进行质谱检测。结果表明:(1)目标化合物的线性关系良好(r20.996),回收率为82.0%~109.5%,日内和日间RSD分别为0.6%~4.8%(n=6)和1.3%~10.9%(n=6)。(2)该方法简单、快速、准确,适用于烟草样品中多种游离氨基酸和Amadori化合物的同时测定分析。     

Amadori化合物检测方法的研究进展

Amadori化合物是羰基化合物和氨基化合物发生美拉德反应生成的一类关键中间产物,除其本身的化学意义外,其后续反应产物对食品的颜色、风味、营养性、安全性、抗氧化性等品质都具有重要的影响。目前已经报道的Amadori化合物定性定量检测方法主要适用于红参、烟草和极小部分食品品种。本文综述了Amadori化合物的形成机理及其定性定量的检测方法,为建立用于广泛或复杂的食品样品中Amadori化合物的检测方法奠定基础。     

高效液相色谱-三重四极杆质谱法同时测定烟叶中10种多酚类化合物

为研究烟叶中的植物多酚类化合物,利用高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-TQMS)技术,建立了同时分析烟叶中山奈酚(Kaempferol)、花青素(Cyanidin)、氯化飞燕草色素(Delphinidin chloride)、鼠李金(Rhamnazin)、绿原酸(Chlorogenic acid)、氯化飞燕草素3-O-β-吡喃葡糖苷(Delphinidin 3-O-β-glucopyranoside chloride)、原花青素B2(Procyanidine B2)、氯化花青素鼠李葡糖苷(Keracyanin chloride)、芸香苷(Rutin)和莨菪亭(Scopoletin)等10种植物多酚类化合物质量分数的方法。采用实时离子多反应检测模式,获得10种植物多酚类化合物的特征碎片离子峰,并对烟草花叶病毒(TMV)感染的烟叶样品进行了测定。结果表明:①10种植物多酚类化合物在线性范围内的相关系数(r)为0.999 0～0.999 6,方法的检出限为1～200μg/L,日内精密度(RSD)为0.64%～8.72%,日间精密度(RSD)为1.05%～7.93%;回收率为79.66%～112.74%;②TMV感染极显著(p0.01)增加了烟叶中山奈酚、花青素、氯化飞燕草色素、氯化飞燕草素3-O-β-吡喃葡糖苷和芸香苷的质量分数,显著(p0.05)降低了烟叶中鼠李金的质量分数,增加了绿原酸的质量分数;③TMV病毒感染对原花青素B2、氯化花青素鼠李葡糖苷和莨菪亭的影响不大,差异不显著。该方法具有良好的灵敏度、精密度和回收率,可用于同时分析植物多酚类化合物。     

核磁共振波谱法同时定量测定保健品中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸及其前体化合物

目的 建立可同时测定保健品中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide，NAD+)及其前体化合物含量的核磁共振波谱法。方法 采用核磁共振波谱技术，优化检测条件后，开发了标准曲线法和定量核磁共振(quantitative nuclear magnetic resonance，qNMR)法两种定量检测方法，用于测定保健品中2种形式的NAD及其4种前体化合物。结果 确定了各目标化合物的特征峰。对于标准曲线法，6种目标化合物的线性关系良好(≥0.9999)，除烟酰胺(nicotinamide，NAM)的定量限为0.5 mmol/L外，其他5种目标化合物的定量限均为0.2 mmol/L。考察了两种具有代表性的NAD+前体化合物的日间和日内重现性，烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide，NMN)和NAM的日间重现性分别为0.21%和0.37%，日内重现性分别为1.03%和1.44%。用标准曲线法和qNMR两种方法分别对收集的10个NAD+补充剂保健品进行检测，误差合理(<5%)。结论 建立的核磁共振方法具有良好的可靠性和灵敏度，可用于保健品中NAD+及其前体化合物的生产控制和市场监管。     

不同生态区域烤烟Amadori化合物含量与烟叶品质的关系分析

为明确不同生态区域烤烟中Amadori化合物含量(质量分数)差异,选取8个不同香型风格烤烟生态区249份烟叶样品,分析了不同生态区域Amadori化合物含量及其相关性,以及与化学品质指标间的关系.结果表明:①8个香型风格烤烟生态区不同部位烟叶Amadori化合物总量整体表现为:上部叶>中部叶>下部叶,基本服从正态分布,...     

微波辅助甲酯化-快速GC法测定烟草中的多元酸和高级脂肪酸

建立了同时检测烟草中多元酸(草酸、丙二酸、反丁烯二酸、琥珀酸、苹果酸和柠檬酸)和高级脂肪酸(棕榈酸、硬脂酸和亚油酸)的微波辅助甲酯化-快速气相色谱(GC)分析方法,并测定了烤烟及雪茄烟各10个烟叶样品中的多元酸和高级脂肪酸含量(质量分数)。结果表明:①最优前处理条件为衍生化试剂10%硫酸-甲醇溶液,微波功率以20 W/s的速率升高至1200 W(保持1 min),萃取剂二氯甲烷。②快速GC分析时间为8.81 min,目标化合物标准曲线线性良好(r2>0.99),加标回收率在83.18%~114.17%之间,精密度(RSD)小于5%。③烤烟烟叶和雪茄烟烟叶中有机酸含量差异较大,其中烤烟烟叶中多元酸(除苹果酸外)含量低于雪茄烟烟叶,高级脂肪酸(除硬脂酸外)含量高于雪茄烟烟叶。该方法快速、准确,适用于测定烟草中的多元酸和高级脂肪酸含量。      

三种Amadori化合物的热解研究

采用离线裂解装置在不同温度点对三种Amadori化合物1-L-丙氨酸-1-脱氧-D-果糖(ADF)、1-L-缬氨酸-1-脱氧-D-果糖(VDF)、1-L-脯氨酸-1-脱氧-D-果糖(PDF)分别进行裂解试验,并采用GC/MS联用技术对其产物进行初步定性研究。结果表明三种Amadori化合物在不同温度下裂解产物不同,高温时裂解产物较多;热解产物主要为醛类、吡嗪类、呋喃、呋喃酮、吡唑、吡咯、吡喃酮等杂环化合物,部分产物结构可以直接反映出Amadori化合物中糖或氨基酸的结构,这些物质是食品及卷烟烟气中重要的致香成分。      

高效液相色谱-串联质谱法测定减肥保健食品中酚酞

建立测定减肥保健食品中非法添加药物酚酞的高效液相色谱-串联质谱分析方法。该方法对不同类型的减肥保健食品经超声波提取15min,以Waters AtlantisT3柱(150mm×2.1mm,3μm)分离后,进行HPLC/MS/MS多反应监测模式下的定性及定量分析。酚酞在(0.5~100)μg/L的范围内相关系数为0.9994。回收率71.3%~92.6%;日内精密度均小于8%,日间精密度均小于10%。在检测的20种样品中,检出含有酚酞的样品9个,检出率为45%。该方法分析速度快,灵敏度高,重现性好,可用于不同减肥保健食品中非法添加酚酞的快速检测。     

HPLC-MS/MS法测定烟叶中9种B族维生素

为准确测定烟叶样品中水溶性B族维生素的含量(质量分数),通过优化色谱流动相p H、柱温、提取剂及其体积等参数,建立了同时测定烟叶中9种B族维生素的高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)方法,并采用该方法对3个不同产区的烟叶样品进行了测定。结果表明:(1)在线性范围内,9种B族维生素工作曲线的线性关系良好,决定系数(R2)为0.994 6～0.999 9。(2)该方法的回收率为91.00%～108.79%,日内和日间精密度(RSD)为1.25%～9.73%,9种B族维生素的检出限为0.01～0.50 ng/m L。(3)3个产区烟叶中B族维生素含量有一定差异,其中河南襄城县产区烟叶中VB2、VB7、VB9的含量较高,贵州贵阳市产区烟叶中VB3的含量较高。该方法操作简便,精密度较好,灵敏度较高,适用于烟叶中多种B族维生素的同时分析。     

造纸法再造烟叶萃取液与浓缩液固形物含量的测定

为测定再造烟叶萃取液和浓缩液中固形物含量(质量分数),通过考察优化萃取溶剂、萃取时间、前处理方式等因素,建立了基于气相色谱法(GC)间接测定再造烟叶萃取液与浓缩液中总固形物、可溶性固形物及不溶性固形物含量(质量分数)的定量分析方法。采用该方法测定了10种再造烟叶萃取液及10种再造烟叶浓缩液样品,并与烘箱法检测结果进行了对比。结果表明:(1)样品中总固形物含量回收率为91.17%～97.07%,日内和日间相对标准偏差(RSD)分别为0.47%～1.33%和1.52%～1.66%(n=6);可溶性固形物含量回收率为90.58%～97.93%,日内和日间RSD分别为0.89%～1.67%和1.25%～2.14%(n=6)。(2)GC法与烘箱法测定的总固形物和可溶性固形物含量相对标准偏差分别为5.19%～10.61%和5.63%～10.43%。该方法简单、快速、准确,适用于不同固形物含量的样品中总固形物含量、可溶性固形物含量和不溶性固形物含量的测定分析。     

顶空固相微萃取-气相色谱法测定葡萄酒的风味组分

顶空固相微萃取技术是一种快速而简单的进样方法。顶空固相微萃取结合毛细管气相色谱技术无需复杂的样品制备过程就能有效测定葡萄酒中的风味化合物。本试验用标样定性了30个葡萄酒风味组分，并对与葡萄酒质量相关的风味化合物和影响定量结果的因素分别进行了讨论，大多数组分定量的相对标准偏差小于10％。     

液质联用法同时测定烤烟型卷烟中的1-脱氧-1-L-脯氨酸-D-果糖和2-脱氧-2-L-脯氨酸-D-葡萄糖

1-脱氧-1-L-脯氨酸-D-果糖(Pro-Fru)和2-脱氧-2-L-脯氨酸-D-葡萄糖(Pro-Glu)是烤烟中重要的美拉德反应关键中间体(Amadori和Heyns化合物),对烟草香味和外观品质有重要影响。为实现烟草中这两种结构相似化合物的同时分析,建立了一种利用高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)测定烤烟型卷烟烟丝样品中Pro-Fru和Pro-Glu含量(质量分数)的方法。采用正离子多反应监测(MRM)模式,根据质谱碎裂机理分析选择各自的特征离子对(m/z)128/278和182/278作为定量离子进行分析,对10个烤烟型卷烟样品进行了测定。结果表明:方法加标回收率93.19%~101.46%,相对标准偏差(RSD)3.53%~8.54%,检测限0.12 ng/m L;10个烤烟型卷烟样品中Pro-Fru和Pro-Glu的含量分别为6.25~11.33和1.15~1.96 mg/g。该方法适用于烤烟型卷烟中Pro-Fru和Pro-Glu含量的同时、准确测定。     

液相色谱-串联质谱法测定普通食品基质中特征性药材表征成分

目的建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)同时测定补肾壮阳类食品及保健食品中9种补肾壮阳类功能成分的定性、定量的分析方法。方法优化前处理方法,分离条件和质谱参数。样品经70%甲醇超声提取,提取液经Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈色谱柱(3.0mm×150mm,1.8μm)分离,流动相为乙腈和水(含有5mmol/L甲酸铵溶液),梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,以电喷雾离子源正/负2种离子多反应监测模式进行MS/MS检测。其中补骨脂素、异补骨脂素、蛇床子素以正离子模式进行检测,淫羊藿苷、马钱苷、仙茅苷、柚皮苷、金丝桃苷、特女贞苷以负离子模式进行检测。结果选用压片糖果和配制酒为基质,马钱苷和金丝桃苷在20~4000ng/mL范围内、其余7种化合物在2~400ng/mL范围内线性关系良好,相关系数r≥0.999。金丝桃苷和马钱苷的定量限为0.5mg/kg,其余7种化合物的定量限均为0.05mg/kg。在2种基质中添加不同水平的标准溶液,加标回收率范围在67.0%~110.5%,RSD<10%。日内和日间精密度良好,RSD<10%。结论该方法能快速筛查食品及保健食品中的非药食同源补肾壮阳成分,并为监管收集数据和提供技术支撑。     

气相色谱-四极杆/飞行时间质谱法同时测定茶叶中10种香料化合物

目的 考察3种前处理方法的提取效果, 建立结合气相色谱-四极杆/飞行时间质谱法(gas chromatography-high resolution quadrupole time-of-flight mass spectrometry, GC-Q-TOF/MS)同时测定茶叶中10种香料[1,8-桉叶素、(+)-异薄荷酮、胡椒酚甲醚、茴香烯、甲基丁香酚、反式肉桂醛、香豆素、樟脑、反式-甲基异丁香酚、顺式-甲基异丁香油酚]的分析方法。方法 样品经乙酸乙酯提取, 加入无水硫酸镁和氯化钠, 涡旋离心后取上清液过滤膜。采用GC-Q-TOF/MS仪, 目标化合物以全扫描模式测定, 以基质匹配标准曲线法进行定量。优化色谱及质谱条件后, 从操作步骤、加标回收率等方面考察3种前处理方法对目标化合物的提取效果。结果 直接提取法最为适用于同时测定茶叶中10种香料化合物。10种香料化合物在10.0~2000.0 μg/L范围内呈良好线性关系, 相关系数r均大于0.9991, 平均回收率为85.3%~108.7%, 检出限为0.03~0.10 mg/kg, 定量限为0.1~0.3 mg/kg, 日内、日间精密度(n=6)分别小于11%和13%。结论 该方法准确、灵敏、回收率高, 适用于茶叶中10种香料的批量检测。     

纺织品中烷基酚(AP)和烷基酚聚氧乙烯醚(APEO)的测定

试样经索氏萃取器提取,浓缩定容后,用配有质量选择检测器的气相色谱仪(GC/MSD)进行测定,通过比较试样与标样的保留时间及特征离子进行定性,外标法定量,并通过对检测限、回收率和精密度的分析,证明该方法适用于测定纺织品中烷基酚(AP)和烷基酚聚氧乙烯醚(APEO)的含量。     

基于质构仪穿刺模式的烟叶脆性定量评价方法

为客观评价烟叶脆性,利用质构仪的穿刺模式建立了烟叶脆性的定量评价方法,通过单因素及响应面优化确定了最佳测试参数;并应用该方法评价了不同地区、不同部位以及不同含水率烟叶样品的脆性差异。结果表明:(1)质构仪测定烟叶脆性的最佳条件:探头型号为P/2N针型探头,测前、测试和测后速率分别为1.0、1.5和10.0 mm/s,测试距离为5 mm,触发力为5 g,该方法的日内和日间精密度分别小于4.50%和3.00%。(2)烟叶脆性在不同地区间存在一定差异;在不同部位间差异明显,呈现的趋势为下部烟叶上部烟叶中部烟叶。(3)烟叶含水率对其脆性影响显著,含水率20%时,烟叶脆性随含水率增加而显著降低。(4)随环境湿度的上升,烟叶穿透孔径逐渐变小,断面平整,微破裂较少或不发育。     

胶基型嚼烟中19种多环芳烃的气相色谱—串联质谱技术法测定

建立了一种应用气相色谱—串联质谱技术(GC-MS/MS)测定胶基型嚼烟中19种多环芳烃含量的方法,内标法定量,分别对样品预处理方式和串联质谱检测条件进行了优化。结果表明:①在优化的试验条件下,19种多环芳烃的检出限、定量限分别可达0.04～0.14,0.14～0.46ng/mL,线性相关系数达0.998以上;②高、中、低3个加标浓度样品回收率范围为92.26%～109.46%;③方法的日内精密度和日间精密度分别为0.77%～3.85%,1.57%～4.86%,均小于5.00%(n=6)。该方法灵敏度高、线性关系好,是胶基型嚼烟质量控制监控的有效手段之一。     

固相萃取结合气相色谱-质谱技术定量白酒中的γ-内酯

γ-内酯是食品中的一类重要风味化合物,存在于水果、葡萄酒及白酒等多种食品中。该研究通过液液萃取及固相萃取(SPE)方法,结合气相色谱-质谱(GC-MS),分别定性、定量了白酒中的8种γ-内酯。该定量方法快速,选择性强,对白酒中各内酯均有较好的线性(R2≥0.9908,γ-十二内酯),检出限范围为0.22(γ-癸内酯)～4.30μg/L(γ-壬内酯),低于各内酯的阈值,对不同香型成品酒及原酒的重现性均较好(RSD<15%),可用于白酒中微量成分γ-内酯的快速分析测定。