瑞士乳杆菌对小鼠肠道粘膜免疫应答及细胞因子的影响

探讨灌胃瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus TS206)发酵制品对健康Balb/c 小鼠肠道黏膜免疫应答及细胞因子的影响。本实验将Balb/c 小鼠分为空白对照组、生理盐水组和瑞士乳杆菌组3 组,瑞士乳杆菌组的灌胃剂量为108CFU/mL,分别在灌胃后0 、1 、2、3 、4 、6 、8、12、24h 处死小鼠得到小肠组织样品,利用RIA 法和ELISA 法测得各组小鼠肠道黏膜SIgA 和细胞因子的含量,并作统计分析。结论：灌胃组小鼠肠道黏膜中SIgA 的含量与生理盐水对照组相比差异极显著(P ＜ 0.01);灌胃组小鼠肠道黏膜中IL-2 和IFN-γ的含量与生理盐水对照组相比具有显著性差异(P ＜ 0.05);灌胃组IL-4 与生理盐水对照组相比含量明显升高(P ＜ 0.05);而灌胃组和生理盐水对照组相比IL-6 的表达水平后期差异不显著(P ＞ 0.05);IFN-γ/IL-4 的值处于相互拮抗的状况,表明瑞士乳杆菌对健康小鼠具有维护肠黏膜免疫平衡的作用,也对保持Th1/Th2 平衡状态具有明显的作用,即证实瑞士乳杆菌作为益生菌具有调控小鼠肠道黏膜免疫应答的功效。     

瑞士乳杆菌对小鼠肠道微生物区系的影响

本实验探讨瑞士乳杆菌对小鼠肠道微生物区系的影响,分析小鼠灌喂益生菌后肠道内各种微生物变化规律。研究将小鼠分成4组,日食对照组、生理盐水对照组、瑞士乳杆菌灌喂组和大肠杆菌灌喂组,连续灌喂15d,采集小鼠粪便利用选择性培养基对不同组别的小鼠肠道菌群作平板计数分析。研究结果表明,瑞士乳杆菌灌喂组与日食组和生理盐水组相比其肠道中乳酸菌类、双歧杆菌类、肠杆菌类、大肠杆菌类差异极显著（p〈O．01）,肠球菌类含量具有显著性差异（p〈0．05）;大肠杆菌灌喂组其肠道中乳酸菌类、双歧杆菌类、肠杆菌类、大肠杆菌类含量与对照组相比具有显著性差异（p〈0．05）,而肠球菌类的分析结果显示变化差异不显著。研究证实了瑞士乳杆菌能够促进小鼠肠道内有益菌的显著增殖,而对肠道内过路菌和可疑致病菌均有一定的抑制作用,表明灌喂瑞士乳杆菌对小鼠肠道微生物区系具有一定的调节作用。     

不同剂量植物乳杆菌对小鼠肠道菌群的影响

植物乳杆菌是人体肠道中的益生菌,可自发酵乳肉制品中分离。本实验将处于正常生理状态下的小鼠分为4组,通过灌喂不同剂量的植物乳杆菌X3-2B来探讨其对小鼠肠道各类微生物菌群的影响。结果表明,灌喂植物乳杆菌X3-2B时,小鼠对饲料的利用率优于对照组,且小鼠粪便p H低于对照组(高剂量组最低)。灌喂乳酸菌的小鼠其肠道内乳酸菌与双歧杆菌数显著(p<0.05)高于对照组。高剂量组与中剂量组小鼠在灌喂14d时小鼠肠道内大肠杆菌数无显著差异,但总肠杆菌和肠球菌数显著低于灌喂第1d(p<0.05),即植物乳杆菌X3-2B对肠道内致病菌有一定的抑制作用,对肠道微生物区系有一定的调节作用。     

瑞士乳杆菌菌体的分离以及对小鼠肠道粘膜SIgA影响的研究

首先利用离心的方法获得了瑞士乳杆菌TS206菌体.作出了600nm下瑞士乳杆菌TS206的菌落数和OD值关系曲线,然后利用不同的菌浓组(107,108、109、1010、1011 cfu、mL)以及生理盐水对照组和大肠杆菌对照组(109 cfu/mL)灌喂0.2mL,分别在第3 、5、7、10、15天利用放射性免疫法(RIA)检测小鼠肠粘膜中SIgA含量.结果发现,高剂量组(109、1010组)的在中期SIgA含量开始有所升高但是到后期下降(P>0.05),和对照组没有显著性差异;其余各组与对照组相比P<0.05,故存在显著性差异,所以灌喂瑞士乳杆菌TS206对于SIgA含量的影响是显著的,在一定程度上反映了瑞士乳杆菌对小鼠肠道粘膜免疫的调节作用.实验同时得出最适剂量为108 cfu/mL的菌悬液灌喂0.2mL和最佳耐受时间为10d.     

产CLA植物乳杆菌对小鼠肠道免疫屏障功能的影响

以环磷酰胺腹腔注射Balb/c小鼠造免疫低下模型,造模完成后用产CLA植物乳杆菌悬液灌胃治疗,来探讨产CLA植物乳杆菌对小鼠肠道免疫功能的影响。研究结果表明,小鼠肠道受损后,肠道黏膜的通透性增加,炎性细胞浸润程度高,黏膜抗氧化性下降,外周血细胞因子均发生不同程度的变化,以产CLA植物乳杆菌悬液灌服后,小鼠肠道黏膜通透性降低,炎性细胞浸润程度降低,黏膜抗氧化活性增加,肠黏膜SIg A水平上升;外周血IFN-γ和IL-10含量显著增加,IL-4含量下降,小鼠免疫球蛋白Ig M、Ig G水平上升,炎症信号因子NF-κB活性下降。结论:产CLA植物乳杆菌能够明显改善小鼠肠道的通透性,有助于恢复受损肠道黏膜上皮,抑制肠道炎症水平,调节肠道免疫功能。     

唾液乳杆菌Ls04对小鼠肠道菌群及黏膜SIgA质量浓度的影响

对唾液乳杆菌Ls04对小鼠肠道微生物区系和肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(SIgA)质量浓度的影响及其持续作用效果进行了研究。将100只SPF雄性昆明白小鼠随机分为Ls高、中、低剂量组及对照组,进行15 d灌胃,将灌胃前、灌胃15 d各处理组小鼠,及灌胃结束后第3,7,14天Ls中剂量组小鼠断颈处死,刮取其大肠黏膜、小肠黏膜,分别进行肠道中乳杆菌、双歧杆菌、肠杆菌、肠球菌和产气荚膜梭菌的计数及肠黏膜SIgA质量浓度的测定。结果表明,灌胃Ls04能显著提高小鼠肠道中乳杆菌、双歧杆菌数量,降低肠杆菌、肠球菌、产气荚膜梭菌数量,且Ls中剂量为最适;灌胃结束后14 d,小鼠肠道中乳酸菌、双歧杆菌数量仍高于灌胃前数量,且肠杆菌仍被显著抑制;灌胃15 d,Ls中剂量组小鼠肠黏膜SIgA质量浓度显著升高,且显著高于Ls高剂量组;灌胃结束后小鼠肠黏膜SIgA质量浓度至14 d显著降低,但仍显著高于灌胃前水平。结果表明,唾液乳杆菌Ls04停用后仍可显著增殖肠道有益菌并抑制致病菌,同时能够有效提高肠黏膜SIgA含量,刺激机体免疫应答。     

黑灵芝多糖对免疫抑制小鼠肠道黏膜形态及肠道黏膜免疫的影响

目的：探究黑灵芝多糖对免疫抑制小鼠肠道黏膜形态及肠道黏膜免疫的影响。方法：腹腔注射环磷酰胺构建免疫抑制小鼠模型,将小鼠分为6 组：正常对照组、模型组、阳性对照组以及黑灵芝多糖低、中、高剂量（25、50、100 mg/（kg·d））组,灌胃期间每天记录小鼠体质量并观察其生活状态,空肠组织进行切片病理学观察,酶联免疫吸附实验测定肠道白细胞介素（interlrukin,IL）-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）及干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）的含量,反转录定量聚合酶链式反应分析T-bet、GATA-3 mRNA相对表达水平。结果：与模型组相比,低、中、高剂量黑灵芝多糖有助于体质量回升,改善肠道黏膜形态结构,提高IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ细胞因子含量,增强T-bet、GATA-3 mRNA相对表达水平,使Th1/Th2平衡向Th1偏移。结论：黑灵芝多糖可改善免疫抑制小鼠的肠道黏膜形态,调节免疫抑制小鼠的肠道黏膜免疫。     

灌喂不同储存期酸奶对主动免疫小鼠免疫功能的影响

观察不同储存期酸奶对新城疫(New Castle Disease,NDV)疫苗主动免疫小鼠免疫功能的影响。四组饲喂基础日粮的雄性小鼠,每组6只,分别灌喂自出厂日期后4℃储存0d(对照组)、3d(E1组)、6d(E2组)和9d的酸奶(E3组),1ml/只(酸奶灌喂前作乳酸菌计数),连续灌喂7d,第8d皮下注射新城疫Ⅰ苗0.2ml/只,继续灌喂10d,第18d处死。测定不同储存期酸奶对NDV主动免疫小鼠肠道sIgA(分泌型免疫球蛋白A)的分泌、血清NDV抗体效价、血清IL-2(白介素-2)水平及脾脏TNF水平的影响。乳酸菌计数结果显示储存期为3d的酸奶中的乳酸菌数较0d增加了656.26%(p<0.01),6d的和9d的分别下降了40.15%(p<0.05)和65.46%(p<0.01)。小鼠实验发现灌喂储存期为3d酸奶的小鼠肠道sIgA水平、血清NDV抗体效价及脾脏TNF(肿瘤坏死因子)水平分别较0d酸奶的对照组升高了8.04%、10.35%和9.70%。血清IL-2水平升高了23.11%(p<0.05)。灌喂储存期为6、9d小鼠的各项免疫指标水平均低于对照组,而且9d组低于6d组。相关性分析发现仅IL-2水平与不同储存期酸奶中乳酸菌数有显著相关性。由此可见,酸奶的储存影响了乳酸菌活菌数,从而影响了酸奶对机体在外源刺激下的免疫功能的增强作用,储存期3d内的酸奶均具有较好的免疫增强作用。     

嗜酸乳杆菌S-层蛋白对感染大肠杆菌小鼠肠黏膜免疫功能的影响

研究嗜酸乳杆菌S-层蛋白对感染致病性大肠杆菌小鼠肠黏膜免疫的影响。用5 M的氯化锂溶液对嗜酸乳杆菌的S-层蛋白进行提取,获得脱除S-层蛋白的嗜酸乳杆菌菌体。将SPF级BALB/c小鼠随机分为对照组、致病性大肠杆菌感染组、嗜酸乳杆菌预防组治疗组,脱除S-层蛋白的嗜酸乳杆菌预防组和治疗组六组,实验进行14 d。小鼠处死后取眼球血、小肠及肠黏膜,观察各组小鼠肠黏膜形态变化、肠黏膜功能因子表达的差异。致病性大肠杆菌感染组与对照组相比,肠黏膜形态明显改变,感染大肠杆菌的小鼠在灌胃嗜酸乳杆菌后各黏膜SIg A和IL-10含量明显升高,同时血清IFN-γ、TNF-α和IL-1β含量对比感染组有了显著下降,说明可以减缓炎症发生,并且比脱除S-层蛋白的嗜酸乳杆菌治疗组对肠黏膜免疫保护效果好。嗜酸乳杆菌S-层蛋白对于嗜酸乳杆菌定植于肠黏膜并形成生物屏障保护其免疫功能有着重要影响。     

植物乳杆菌NCU116发酵胡萝卜浆对免疫抑制小鼠肠道黏膜免疫的影响

目的：探讨植物乳杆菌NCU116发酵胡萝卜浆对免疫抑制小鼠肠道黏膜免疫的影响。方法：利用环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型,将小鼠随机分为5 组,即正常对照组、模型组、胡萝卜原浆组、发酵胡萝卜浆组、灭活发酵胡萝卜浆组。小鼠以灌胃的方式给予胡萝卜原浆、发酵胡萝卜浆和灭活发酵胡萝卜浆后,分别测定各组小鼠胸腺指数和脾脏指数,酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）方法测定小肠组织白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、IL-10和分泌型免疫球蛋白A（secretory immunglobulin A,sIgA）含量,小肠组织病理学观察及直接免疫荧光检测IgA分泌B细胞数。结果：实验组与模型组相比,植物乳杆菌NCU116发酵胡萝卜浆能显著提高小鼠胸腺和脾脏指数,增加IgA分泌B细胞数量,提高细胞因子IL-2和sIgA的水平,改善肠道形态结构,但TNF-α和IL-10含量没有显著增加。结论：植物乳杆菌NCU116发酵胡萝卜浆能有效拮抗环磷酰胺对小鼠免疫功能的抑制作用和肠道结构损伤作用,提高免疫抑制小鼠的免疫功能和改善肠道形态结构。     

嗜酸乳酸杆菌对自主活动受限型应激小鼠肠道黏膜免疫状态的影响

目的：探讨嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus,LA）对自主活动受限型应激小鼠肠道黏膜免疫状态的影响。方法：以健康雌性BALB/c小鼠为受试动物,分为常规饲养组（NC组）、常规饲养条件灌胃LA组（NC＋LA组）、应激组（S组）、应激条件灌胃LA组（S＋LA组）,小鼠的LA灌胃剂量为108 CFU/d;应激组小鼠每天被限制自主活动3 h;15 d后取材,采用流式细胞术、酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）等方法,对肠系膜淋巴结（mesenteric lymph nodes,MLN）中CD4＋T细胞、CD8＋T细胞和CD11c＋树突细胞（CD11c＋ dendritic cell,CD11c＋ DC）比例,结肠组织白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）和白细胞介素-17（interleukin-17,IL-17）水平,以及小肠总分泌型免疫球蛋白A（secreted immunoglobulin A,sIgA）水平进行检测。结果：常规饲养条件下,LA能极显著提高小鼠MLN中CD4＋T细胞比例（P＜0.01）,显著提高MLN中CD11c＋ DC比例、小肠总sIgA水平和结肠组织IL-10水平（P＜0.05）,显著降低结肠组织IL-17水平（P＜0.05）,而对MLN中CD8＋T细胞比例无显著影响（P＞0.05）;应激条件能极显著降低小鼠MLN中CD4＋T细胞比例和CD11c＋ DC比例（P＜0.01）,显著降低CD8＋T细胞比例（P＜0.05）,极显著降低小鼠结肠组织IL-10水平和小肠总sIgA水平（P＜0.01）,极显著提高结肠组织IL-17水平（P＜0.01）;应激条件下,LA能显著提高小鼠MLN中CD4＋T细胞比例和CD11c＋ DC比例（P＜0.05）,显著提高小鼠结肠组织IL-10水平和小肠总sIgA水平（P＜0.05）,并显著降低结肠组织IL-17水平（P＜0.05）,而对小鼠MLN中CD8＋T细胞比例无显著影响（P＞0.05）。结论：给予自主活动受限型应激小鼠LA干预,可提高小鼠MLN中CD4＋T细胞和CD11c＋ DC比例,上调结肠IL-10和小肠总sIgA分泌水平,下调结肠IL-17分泌水平,调节应激小鼠的肠道黏膜免疫状态。     

Effect of oral administration of heat-killed Lactobacillus brevis SBC8803 on total and ovalbumin-specific immunoglobulin E production through the improvement of Th1/Th2 balance

We examined the effect of 59 strains of heat-killed Lactobacillus brevis on interleukin (IL)-12 and interferon (IFN)-gamma production from mouse Peyer's patch (PP) cells. L. brevis has a great variety of strains that induce the production of these cytokines. Some L. brevis strains, which were selected for their ability to induce a strong Th1 immune response, inhibited both total immunoglobulin E (IgE) and antigen specific IgE production, and improved the Th1/Th2 balance by enhancing IL-12 and IFN-gamma and inhibiting IL-4 production from ovalbumin (OVA)-sensitized mouse splenocytes. Based on the results of this screening, we selected L. brevis SBC8803 as a potent inhibitor of IgE production, and investigated the effect of oral administration of heat-killed SBC8803 on IgE production in OVA-sensitized mice. OVA-sensitized mice were fed SBC8803 0% (control), 0.05%, or 0.5% added diet for 4 weeks during the period of the experiment. Total and OVA-specific IgE in the serum of mice, which were fed the 0.5% added diet, was significantly lower than that of the control diet fed mice. The IFN-gamma/IL-4 value, which represents the Th1/Th2 balance, from the 0.5% added diet fed mice splenocytes was also significantly higher than that of the control diet fed mouse splenocytes. Histamine release from OVA-sensitized mice into sera that were induced by the intraperitoneal antigen challenge decreased following the oral administration of SBC8803. The inhibition of IgE production and histamine secretion by the oral administration of heat-killed SBC8803 was probably due to the improvement of the Th1/Th2 balance toward Th1 dominance.     

乳酸菌对高糖高脂2型糖尿病小鼠血脂的影响

目的：研究两株乳酸菌对糖尿病小鼠血糖、血脂、血清炎症因子、肝脏抗氧化水平、胰腺病理变化和附睾脂肪组织白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）及脂联素（adiponectin,Adipoq）基因表达的影响。方法：通过降胆固醇、耐酸及耐胆盐等体外实验从6 株乳酸菌中筛选降脂较好的2 株乳酸菌。利用链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）结合高糖高脂饲料的方法建立小鼠糖尿病模型。将100 只雄性BALB/c小鼠随机分为4 组,每组25 只,对照组（N）（正常饮食）、模型组（M）（高糖高脂饮食）、SY13菌组（SY13）（高糖高脂饮食外加SY13菌液灌胃）、36号菌组（D36）（高糖高脂饮食外加36号菌液灌胃）,分别在灌胃6、10 周和14 周时处死小鼠,动态检测小鼠血糖、血脂等相关生化指标水平,利用苏木精-伊红染色观察胰腺组织病理变化,通过逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应方法检测附睾脂肪组织中IL-10和Adipoq基因的mRNA表达情况。结果：筛选出干酪乳酸菌SY13和D36有较强的降胆固醇、耐酸和耐胆盐能力。与M组相比,通过一段时间菌液的灌胃,显著抑制了小鼠血糖水平和血清中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平的上升（P＜0.05）,提高了高密度脂蛋白胆固醇水平和抗炎因子IL-10水平（P＜0.05）,不同程度提高了肝脏谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力,显著降低了丙二醛含量（P＜0.05）,改善了小鼠糖代谢紊乱状况,明显减轻了胰岛和腺泡细胞病变情况,脂肪组织中IL-10和Adipoq基因表达水平显著提高。结论：乳酸菌SY13和D36能够显著改善糖高脂饮食联合STZ诱导的小鼠糖脂代谢。     

植物乳杆菌KFY02发酵柠檬汁对高脂饮食小鼠肥胖的抑制作用及肠道菌群调节作用

本研究旨在观察植物乳杆菌KFY02发酵柠檬汁的减脂的作用及其对肠道菌群调节作用。本研究通过高脂饮食引起小鼠肥胖,将实验小鼠分为正常组、模型组、植物乳杆菌KFY02组、未发酵柠檬汁组和发酵柠檬汁组,采用生化试剂盒、切片观察和定量PCR实验检测小鼠血清、组织相关指标并通过检测粪便中微生物的表达观察肠道微生物组成。实验结果显示,植物乳杆菌KFY02、未发酵柠檬汁和发酵柠檬汁均能够有效减轻肥胖小鼠体重,降低肝脏和附睾脂肪组织的器官指数,降低血清和肝脏组织的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（AKP）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平和提高高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平,增加小鼠粪便中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和总蛋白（TP）的含量。H&E病理学观察发现,植物乳杆菌KFY02、未发酵柠檬汁和发酵柠檬汁还能够减轻肥胖造成的肝组织病变和脂肪细胞增大和堆积。qPCR实验结果显示,植物乳杆菌KFY02、未发酵柠檬汁和发酵柠檬汁能够上调高脂饮食引起的肥胖小鼠肝组织的PPAR-α、CPT-1、LPL、CYP7A1的mRNA表达和下调C/EBPα、PPAR-γ表达;同时还可以上调拟杆菌门、乳酸杆菌、双歧杆菌微生物的表达和下调厚壁菌门表达。这些结果表明,植物乳杆菌KFY02、未发酵柠檬汁和发酵柠檬汁均能够起到对小鼠的减脂作用,且发酵柠檬汁的效果最好,发酵柠檬汁对小鼠的减脂作用与其调节小鼠肠道功能和微生物组成有直接关系。由此可以看出,植物乳杆菌KFY02发酵柠檬汁对肥胖小鼠具有良好的减脂作用和肠道调节作用。     

鱼腥草多糖对DSS诱导小鼠结肠炎的改善作用

目的: 探究鱼腥草多糖（Houttuynia cordata polysaccharides,HCP）对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎的疗效及可能的作用机制。 方法: 将雄性昆明小鼠随机分为5组（n=10）,分别为空白组、模型组、鱼腥草低剂量组、鱼腥草高剂量组和柳氮磺胺吡啶（SASP）阳性药物对照组。采用2.5%葡聚糖硫酸钠（Dextran sulfate sodium salt,DSS）水溶液让小鼠自由饮用9 d,诱导溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)模型。建模成功后,空白组和模型组自由饮用蒸馏水,鱼腥草多糖低、高剂量组分别灌胃1、2 g/kg/d鱼腥草多糖溶液,阳性药物组灌胃柳氮磺胺吡啶9 mg/kg/d,连续干预6 d。评估疾病活动指数（Disease activity index,DAI）,HE染色观察结肠组织病理切片,ELISA 检测血清中炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）水平以及肝肾功能指标谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肌酐（CR）、尿素氮（BUN）含量,16S rRNA系统测序技术检测分析小鼠肠道菌群的变化,研究鱼腥草多糖对小鼠结肠炎的影响。 结果: 与模型组相比,鱼腥草多糖组能够显著的降低DAI评分(P<0.05),减少结肠组织溃疡面积,显著性降低TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ的水平(P<0.01)和ALT、AST、CR、BUN的含量(P<0.05,P<0.01),增加肠道菌群的丰富度。 结论: 鱼腥草多糖可缓解溃疡性结肠炎小鼠的症状,其作用效果可能与改善肠道黏膜环境、降低炎症因子水平和维持肠道菌群的稳态有关。     

一种基于BALB/c背景由膳食麸质引起的乳糜泻小鼠模型的构建及其评价

目的：利用麸质诱导建立小鼠乳糜泻（celiac disease,CeD）模型,通过检测乳糜泻相关指标来评价该模型的可行性。方法：将连续食用无麸质饲料3 代以上的雌性BALB/c小鼠（6～8 周龄）随机分为两组（对照组（Control组）和模型组（CeD组））,CeD组于实验开始的第1天将饲料换为麸质含量2.5 g/kg的含麸质饲料,Control组则继续饲喂无麸质饲料。实验前3 周,分别给予CeD组每只小鼠腹腔注射含150 μg麦醇溶蛋白的磷酸盐缓冲溶液（0.2 mL 0.01 mol/L）,每周两次。在实验的第4周,给予CeD组每只小鼠后脚掌注射乳化有50 μg麦醇溶蛋白的弗氏完全佐剂50 μL两次（第1天和第4天各注射一次）。利用血清荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖质量浓度表征小鼠的肠道通透性;利用实时荧光定量聚合酶链式反应检测小鼠十二指肠组织中紧密连接蛋白（ZO-1、ZO-2、Claudin-1等）、相关炎症因子白细胞介素（（interleukin,IL）-15、干扰素（interferon,IFN）γ和IL-4等）和相关免疫细胞的表面标志物基因（CD4、CD19、CD138等）的表达水平;采用酶联免疫吸附试验测定小鼠十二指肠中组织转谷氨酰胺酶（tissue transglutaminase,tTG）和连接蛋白水平。结果：相比Control组,CeD组小鼠十二指肠肠道屏障被明显破坏,小肠绒毛长度明显缩短,TGM2 mRNA相对表达量显著升高（P＜0.05）,与乳糜泻相关的炎症因子和免疫细胞的标志物基因相对表达量都显著升高。结论：该造模方法在肠道病理情况、肠道屏障以及免疫方面均能很好地模拟临床上乳糜泻的病理学特征,可用于未来乳糜泻新的潜在治疗措施研究中。     

瑞士乳杆菌TS206对小鼠血脂及粪便胆汁酸水平的调控影响

探讨瑞士乳杆菌TS206(Lactobacillus helveticus TS206)对小鼠血脂水平的影响。以健康BABL/c小鼠为对象,设置实验组和对照组,分别以L.helveticus TS206菌悬液和生理盐水(0.2 m L/d)连续灌胃7周,监测小鼠体质量和血脂(总胆固醇(total serum cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)水平、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C))以及粪便总胆汁酸(total bile acid,TBA)水平的变化。灌胃L.helveticus TS206后,小鼠体质量增量显著高于对照组(P0.05,P0.01);血清中TC、TG和LDL-C水平均显著降低(P0.05),灌胃停止1周后基本恢复到对照组水平;L.helveticus TS206菌悬液和生理盐水小鼠血清中HDL-C含量均无显著性变化;TBA水平呈先下降后上升趋势,且3周后TBA水平显著低于对照组(P0.05)。研究结果表明,L.helveticus TS206能促进健康小鼠体质量增加,并有效调控其血脂水平,提示口服L.helveticus TS206菌剂可能会降低患心脑血管疾病的风险。     

植物乳杆菌Sc52对脂多糖诱导小鼠肠道屏障损伤的保护作用

目的：研究植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）Sc52对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导小 鼠肠道屏障损伤的保护作用。方法：选取6 周龄雄性ICR小鼠,随机分为3 组,实验组每天灌胃植物乳杆菌 Sc52（1010 CFU/d）,空白组与模型组灌胃等量生理盐水,连续两周后,除空白组外,一次性腹腔注射LPS（15 mg/kg） 建立小鼠肠屏障损伤模型。检测小鼠血清中炎症因子及与肠道通透性相关指标水平,苏木精-伊红染色观察回肠组 织病理学变化,气相色谱法测定小鼠肠道短链脂肪酸水平,平板计数法分析小鼠粪便中主要菌群数量,蛋白质印记 法分析小鼠回肠上皮细胞间紧密连接蛋白表达水平。结果：预先灌胃植物乳杆菌Sc52能够降低小鼠血清中肿瘤坏 死因子、白细胞介素-6、白细胞介素-12、一氧化氮等炎症相关因子水平。植物乳杆菌Sc52通过调节D-乳酸和二胺 氧化酶的水平,改善肠道通透性。灌胃植物乳杆菌Sc52能够提高小鼠肠道中乙酸和丁酸含量,能够增加小鼠肠道 中乳杆菌、双歧杆菌等有益微生物的数量,抑制有害微生物的生长;显著上调回肠组织中紧密连接蛋白Occludin和 Claudin-1的表达。结论：植物乳杆菌Sc52对小鼠肠道屏障功能具有保护作用。     

瑞士乳杆菌调控小鼠肠道菌群变化规律的研究

为探究瑞士乳杆菌（Lactobacillus helveticus）TS206对小鼠肠道菌群的调控规律,更好地阐述益生菌维持 肠道菌群稳态的机制,本研究以雄性BALB/c小鼠为实验对象,将其分为L. helveticus TS206组、对照组、空白组。 L. helveticus TS206组和对照组分别每天灌胃L. helveticus TS206菌悬液和等量的生理盐水,连续灌胃7 周,空白组 不灌胃。每周采集小鼠新鲜粪便样品,通过试剂盒提取粪便细菌总DNA,利用Ion torrent个人化操作基因组测序 平台测序技术对16S rRNA基因的V6区进行高通量测序,最后通过生物信息学和多变量统计学方法对测序数据进 行分析。结果显示：所有测序序列在97%相似水平划分得到1 617 个操作分类单位（operational taxonomic units, OTUs）,被划分为8 个门,硬壁菌门（Firmicutes）和拟杆菌门（Bacteroidetes）为各组小鼠中的优势菌门,占 总序列数的97.49%,且硬壁菌门丰度最高,超过70%;优势菌科主要为S24-7、毛螺菌科（Lachnospiraceae）、 瘤胃球菌科（Ruminococcaceae）、理研菌科（Rikenellaceae）和拟杆菌科（Bacteroidaceae）,且与对照组相比 L. helveticus TS206组肠杆菌科细菌数量较低并呈下降趋势。经LEfSe分析有53 个关键OTUs与2 组小鼠肠道粪便菌群 结构显著相关,其中27 个OTUs在对照组中富集,分属于肠杆菌科、瘤胃球菌科、毛螺菌科和梭菌目;26 个OTUs 在L. helveticus TS206组中富集,分属于梭菌目、毛螺菌科和拟杆菌属,其中与对照组相比,梭菌目丰度水平高。经 主成分分析,两组样品完全分离,菌群的整体结构存在差异,且富集的OTUs之间呈负相关关系。综上所述,在实 验阶段,灌胃雄性BALB/c小鼠一定剂量的L. helveticus TS206后,经扩增子测序分析获得的初步结论为L. helveticus TS206能改变肠道菌群整体结构的功效,表现出了抑制肠道有害微生物生长的作用,并通过促进部分有益菌的增殖 来维持肠道菌群结构的稳态。