PITC柱前衍生高效液相色谱法测定黄酒中17种氨基酸方法研究

建立了柱前衍生高效液相色谱法同时测定黄酒中17种氨基酸的方法。方法采用异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生试剂,色谱柱为C18(4.6×250mm,5μm),乙酸钠-乙腈-水混合体系梯度洗脱,紫外检测器,检测波长254nm,40min内17种氨基酸得到良好的分离。在0.025～1.25mmol/L范围内其浓度与响应值具有良好的线性关系,相关系数大于0.99;样品的平均加标回收率在78.6～118.1%之间,相对标准偏差在0.45%～3.30%范围;检出限为0.259～0.925μmol/L,定量限为0.863～3.083μmol/L。相对其他柱前衍生测定氨基酸的方法而言,该方法在可操作、低成本、易推广等方面具有明显优势,可供黄酒中氨基酸测定方法行业标准制定提供参考。     

超高效液相色谱法测定不同黄酒中17种氨基酸的分析研究

建立一种快速准确的柱前衍生-超高效液相色谱法,同时测定黄酒中17种游离氨基酸含量。黄酒样以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)衍生化处理,以流速为0.7 mL/min经Waters AccQ·TagTM Ultra C_(18)(1.7μm,2.1×100 mm)的色谱柱梯度洗脱,利用二极管阵列检测器,在260 nm波长处检测。结果显示,17种游离氨基酸浓度在25～400μmol/L范围内,峰面积与浓度之间具有良好的线性关系(R~2≥0.9993),回收率在94.21%～104.82%。该方法可在11 min内将17种游离氨基酸完全分离,具有准确、快速、重复性好的特点,可用于黄酒中游离氨基酸含量的测定。     

PITC柱前衍生-反相高效液相色谱法测定黄酒中游离氨基酸和生物胺

建立柱前衍生-反相高效液相色谱,同时测定黄酒中17 种氨基酸及7 种生物胺含量的方法。采用异硫氰酸苯酯柱前衍生试剂,采用Inertsil ODS-SP C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）分析,以乙酸钠溶液和乙腈溶液混合液进行梯度洗脱,在254 nm波长处进行氨基酸和生物胺的含量分析。氨基酸和生物胺在2.0～500 mg/L和0.5～125 mg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数R2大于0.99,平均回收率在86.44%～99.75%之间,相对标准偏差在0.31%～3.53%之间;检出限为0.02～0.25 mg/L,定量限为0.25～4.50 mg/L。方法线性范围广、准确性高、稳定性好,适用于黄酒中氨基酸及生物胺的检测。     

糯米蛋白质与黄酒氨基酸的相关性分析

以36个糯米品种为原料酿造黄酒,通过红外谷物分析仪测定原料糯米中总蛋白质含量,用考马斯亮蓝G250在595 nm波长下的最大光吸收测定原料糯米中可溶性蛋白质含量,并采用异硫氰酸苯酯(PITC)-柱前衍生高效液相色谱法对黄酒的氨基酸进行定量定性分析,建立糯米蛋白质和黄酒氨基酸的相关性与回归性分析。结果表明,糯米总蛋白和黄酒游离氨基酸总量的相关系数为0.826,达到极显著水平;糯米总蛋白质和黄酒单一氨基酸相关系数较好,R=0.931;糯米可溶性蛋白质与黄酒游离氨基酸总量的相关系数为0.303,糯米可溶性蛋白质与单一氨基酸的相关系数为0.704,糯米可溶性蛋白质的相关系数均不如糯米总蛋白质显著。     

液液微萃取/固相微萃取-气相色谱法检测柑橘中16种游离氨基酸

目的：建立气相色谱氢火焰离子检测法同时测定柑橘果肉中16种游离氨基酸含量。方法：以对氯甲酸异丁酯为衍生剂，先进行衍生条件优化，再采用自制的溶胶-凝胶甲基丙烯酸丁酯二乙烯基苯涂层为萃取头，通过液液微萃取联合固相微萃取对样品进行前处理后上气相色谱仪检测。结果：对氯甲酸异丁酯衍生化柑橘中游离氨基酸采用一次性衍生法，衍生时间1 min。优化后的萃取温度为60℃，萃取时间30 min，离子强度为30%Na₂SO₄，搅拌速度1000 r·min^-1。在此条件下，目标化合物具有良好的线性关系，相关系数均大于0.99，检出限为0.85～12.60μg·kg^-1，相对标准偏差为2.51%～12.80%，三种加标浓度下回收率为82.51%～121.75%。结论：该方法操作简单、结果准确、受基质干扰少，适用于柑橘中多种游离氨基酸的检测，并可以游离氨基酸含量来评价柑橘内在品质。     

离子交换色谱-茚三酮柱后衍生法同时测定绿茶饮料中39种游离氨基酸

建立了离子交换色谱—柱后衍生法测定绿茶饮料中39种游离氨基酸的分析方法。样品经过样品稀释剂稀释,经过磺酸型阳离子交换色谱柱分离,茚三酮柱后衍生,通过调节流动相比例和柱温温度,达到最好的分离效果。结果表明39种游离氨基酸均得到了较好的分离,在摩尔浓度1～100nmol/L范围内线性良好,相关系数(r)均大于0.99,其中肌氨酸、β-氨基丙酸、β-氨基异丁酸、肌肽、鹅肌肽、乙醇胺、磷-乙醇胺等7种游离氨基酸的检出限为10μg/L,定量限为30μg/L,其余32种游离氨基酸的检出限为1μg/L,定量限为3μg/L;加标回收率在74.0%～101.7%,RSD%(n=6)在0.30%～4.8%,满足检测要求。方法前处理简单易操作,实用性强,适用于绿茶饮料中39种游离氨基酸的检测。     

高效液相色谱法同时测定糯米酒中17种氨基酸

建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)用以测定糯米酒中的17种氨基酸。采用OPA试剂柱后衍生,RP-HPLC经梯度洗脱后检测糯米酒中17种氨基酸的含量。结果表明,该方法测定17种氨基酸的线性相关系数R在0.9990～0.9998,平均回收率为94.5%～98.7%,精密度RSD为0.51%～1.90%。该方法专属性强、操作方便、灵敏度高,可用于糯米酒和花雕酒等黄酒中17种氨基酸含量的检测。     

柱前衍生高效液相色谱法测定贝类产品中氨基酸含量

采用柱前衍生高效液相色谱法,测定了3种贝类中天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸等17种氨基酸含量。衍生试剂为6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯(AQC),流动相为醋酸盐-磷酸盐缓冲溶液、乙睛、水,梯度洗脱。色谱柱为AccQ·Tag(Waters)氨基酸分析柱,紫外检测。结果显示,氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性关系,线性范围10～80μmol/L,检出限为0.23μmol/L,相关系数均在0.998以上,相对标准偏差RSD在2.1%～4.8%之间,回收率在91.3%～113.2%之间。     

全自动QuEChERS样品制备系统-同位素稀释-气相色谱-串联质谱法测定水果蔬菜中的三苯锡残留

建立了全自动QuEChERS样品制备系统-同位素稀释-气相色谱-串联质谱法测定蔬菜水果中三苯锡残留的方法。方法利用全自动QuEChERS样品制备系统提取和净化一体的功能,结合同位素稀释和气相色谱-三重四级杆串联质谱仪检测,消除了QuEChERS法处理样品带来的基质效应问题。样品经1%乙酸乙腈溶液在全自动QuEChERS样品制备系统提取净化,用四乙基硼化钠进行衍生,采用GC-MS/MS多反应监测(MRM)模式对三苯锡进行定性和定量分析。结果表明,三苯锡在10～500μg/L,相关系数(R~2)为0.9995,检出限(LOD)为0.0005mg/kg,定量限为0.005mg/kg。选取4种不同基质的果蔬样品,在空白样品中添加浓度为0.02、0.1mg/kg和0.2mg/kg,三苯锡的平均回收率范围为92.3%～115.1%,相对标准偏差小于10.1%。     

高效液相色谱法测定玉米蛋白粉中游离氨基酸含量

建立高效液相色谱法同时测定玉米蛋白粉中17种游离氨基酸含量的方法。样品用盐酸溶液(0.1 mol/L)提取,采用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯(AQC)为衍生剂衍生。应用Nova-PakTM C_(18)柱,以10 mmol/L醋酸铵缓冲液、乙腈和超纯水为流动相进行梯度洗脱,柱温为37℃,检测波长为248 nm,外标法定量。结果表明,17种游离氨基酸线性关系良好,其中16种游离氨基酸在0.002 5~0.5μmol/mL范围内具有良好的线性关系,胱氨酸浓度在0.006 3~1.25μmol/mL范围内线性关系良好,相关系数在0.999 1~0.999 9之间,回收率为95.10%~105.21%,RSD为1.36%~4.39%。该方法灵敏度高、重现性好、操作简单,可用于检测玉米蛋白粉中游离氨基酸含量。     

Correlation between the amino acid content in rice wine and protein content in glutinous rice

Chinese rice wine is a fermentation product of glutinous rice that contains high levels of protein and amino acids. The turnover and catabolism of amino acids by fermentative microorganisms plays an important role in wine quality. The fermentation of Chinese rice wine, using 34 different varieties of glutinous rice, and the analysis of the protein and amino acid content of the resultant rice wine using precolumn derivatization via high‐performance liquid chromatography, are reported. A model of correlation and regression analysis of the protein content in the glutinous rice and the amino acids in rice wine was established. Results showed that the correlation coefficient between the total protein in glutinous rice and the total free amino acids in rice wine was 0.557, indicating a significant relevance. The population correlation coefficient between the total protein in the glutinous rice and the amino acids in the rice wine was high, i.e. R= 0.928. The correlation between the soluble protein content in the glutinous rice and the total free amino acids in the rice wine (or individual amino acids) was negligible. The total protein content in the rice variety was positively related to the sensory performance and free amino acid content of the resultant Chinese rice wine. Copyright © 2016 The Institute of Brewing & Distilling     

基于GC-MS江西米酒风味物质的分析及品质比较

该研究从基本理化指标、游离氨基酸和挥发性化合物这三个方面对江西米酒风味进行全面分析,以期明确江西传统米酒的风味特征,并将米酒特征风味物质与日本清酒和葡萄酒进行比较,为提高江西米酒的市场竞争力提供基础数据支撑。首先利用氨基酸分析仪和气相色谱-质谱联用（GC-MS）等技术测定了酒样的滋味及风味物质含量,再采用滋味活度值、相对气味活度值分析各风味化合物对酒体风味的贡献。结果表明,米酒和清酒中均含有丰富的游离氨基酸,组氨酸对风味的贡献较大;米酒与清酒也有较多相同的特征挥发性风味物质,包括乙酸、辛酸乙酯、癸酸乙酯、棕榈酸乙酯。     

全自动氨基酸分析仪法测定不同年份黄酒中游离氨基酸的含量

目的建立采用全自动氨基酸分析仪测定黄酒中游离氨基酸的含量的方法,并测定不同年份的黄酒中游离氨基酸含量。方法黄酒经氮气吹干复溶后,过膜,使用全自动氨基酸分析仪进行测定。结果方法检出限达到0.01 mg/100 m L,回收率达到90.1%~101.2%,均符合检测要求。测定结果显示,黄酒中含有脯氨酸、亮氨酸等多种氨基酸,具有较高的营养价值,且不同酒龄的黄酒中氨基酸的总含量不同,各氨基酸含量随年份的不同也会发生变化。结论该方法前处理简单、快速,测定结果准确、可靠,能够满足黄酒中氨基酸的日常检测工作,适用于大量样品的定性定量分析。     

广东河源客家黄酒氨基酸分析

为分析广东客家黄酒关键工艺中的炙酒、贮藏、原料等对客家黄酒氨基酸的组成、含量及呈味特性的影响,采用日立氨基酸自动分析仪分析检测客家黄酒中的氨基酸含量,通过计算氨基酸分值、味道强度值(DoT)等确定各氨基酸对客家黄酒的影响。结果表明,客家娘酒中总氨基酸含量在2658.99mg/L- 5420.632mg/L之间,黑豆娘酒氨基酸含量及总量最高,商品板栗娘酒氨基酸含量最低,客家黄酒中最主要的氨基酸是谷氨酸和天冬氨酸,两者合计占氨基酸总量的20%以上,而胱氨酸、蛋氨酸和苯丙氨酸含量最低,是限制性氨基酸。板栗娘酒氨基酸含量低于传统的糯米娘酒,商品板栗娘酒总氨基酸含量仅为糯米娘酒总氨基酸的49%,必需氨基酸仅为64.69%,脯氨酸和苯丙氨酸含量为糯米娘酒的80%,其余氨基酸仅仅达到50%左右。黑豆娘酒比糯米娘酒总氨基酸含量提高42.6%,必需氨基酸提高23.2%,其中胱氨酸提高1倍,脯氨酸提高92.5%,谷氨酸提高80.7%,甘氨酸和丙氨酸提高40%以上,苏氨酸、丝氨酸、异亮氨酸提高30%以上,天冬氨酸、亮氨酸、酪氨酸提高20%以上。炙酒、贮藏过程能降低氨基酸含量,炙酒后氨基酸总量降低20.3%,炙酒后每一种氨基酸含量都明显降低,其中降低最明显的是蛋氨酸和苯丙氨酸,降低氨基酸含量可达50%,苏氨酸、甘氨酸、胱氨酸、赖氨酸、精氨酸在炙酒过程中降低1/3以上,而亮氨酸、异亮氨酸、组氨酸在炙酒过程中氨基酸降低20%以上;贮藏1年以后氨基酸总量降低12.4%,必需氨基酸降低10.9%,组氨酸和精氨酸降低20%以上,除蛋氨酸和苯丙氨酸以外,其余氨基酸均降低10%以上。计算不同酒样的氨基酸的味道强度即剂量比域因子DoT的排序为Glu ＞ Asp ＞ His ＞ Ala ＞ Lys ＞ Tyr ＞ Ile ＞ Gly,只有谷氨酸(Glu)的DoT 值大于1,说明黄酒中决定口味的氨基酸主要是谷氨酸。本文提出味道指数(Taste Index,TI)作为总体风味的评价指标,其定义为优味氨基酸的味道强度之和与劣味氨基酸的味道强度之和的比值,如果TI > 1,说明风味良好,如果TI<1,则劣味氨基酸占优势,味道不佳。本试验中黄酒的TI指数排序为：商品黑豆娘酒 ＞ 绍兴古越龙山花雕酒 ＞ 商品板栗糯米酒 ＞ 贮藏1年的板栗糯米原酒 ＞ 炙酒后的原酒 ＞ 商品普通糯米酒 ＞ 炙酒前原酒 ＞ 1 。对酒样的氨基酸评价表明,AAS和CS评分排序为炙酒前原酒 > 黑豆商品娘酒> 普通商品糯米酒 > 炙酒后原酒 > 贮藏1年的原酒 > 古越龙山花雕酒 > 商品板栗糯米酒,说明炙酒前酒样和黑豆酒样氨基酸的营养价值较好。     

多肽干型黄酒中含氮组分的分析

为多肽干型黄酒的功能特性提供理论基础,采用色谱分析技术对该产品中含氮组分进行了研究。结果表明,产品中含氮组分具有以下特点:(1)多肽干型黄酒中酸溶性蛋白质含量平均达1002.5mg/100mL,游离氨基酸总量为191.39mg/100mL(其中7种必需氨基酸含量占氨基酸总量的36.65%),多肽的平均含量达811.11mg/100mL;(2)多肽干型黄酒中多肽为小分子肽,相对分子量<500u的组分占81.1%;其与玉米肽的分子量标准图谱很接近。因此,该产品具有一定的营养和保健作用。     

常用炮制方法对巴戟天中游离氨基酸成分的影响

目的：建立氨基酸柱前衍生反向色谱测定法,分析比较巴戟天不同炮制品中氨基酸的差异,为其质控体系提供依据。方法：以水为溶剂,超声法提取巴戟天中的氨基酸,以异硫氰酸苯酯（PITC）柱前衍生,检测波长254nm,Sinergi 4u fusion-RP色谱柱（Phenomenex,250mm×4.6mm,4μm）,柱温35℃,测定氨基酸的含量。结果：4～5年生巴戟天生品中含有14种游离氨基酸,酒蒸氨基酸总量较生品增加约14.8%,盐蒸和甘草制氨基酸总量基本不变,盐炒氨基酸总量减少约12.4%,酒炒氨基酸总量减少约43.9%。结论：本法操作简便、灵敏度高,结果准确、可靠。巴戟天生品酒蒸后游离氨基酸总量显著增加,盐蒸和甘草制者基本不变,盐炒和酒炒者均显著降低,提示不同炮制方法对巴戟天游离氨基酸含量影响有显著差异,其机制值得深入研究。     

Effect of γ‐aminobutyric acid supplementation on the composition of Chinese rice wine

This study investigated the effect of γ‐aminobutyric acid (GABA) supplementation on the composition of Chinese rice wine. GABA was added at 188.5 and 377 mg/L at the beginning of primary fermentation or post‐fermentation. Addition of GABA during primary fermentation had no impact on alcohol and total acid formation or the utilisation of sugar. However, total free amino acids, total essential amino acids and GABA in rice wine supplemented with GABA were significantly lower than the control rice wine without supplementation. Alcohol formation, total acid, sugar content and total essential amino acids were similar compared with the control. However, the GABA post‐supplementation was significantly higher, suggesting that GABA supplementation post‐fermentation process could enhance the GABA content in rice wine. © 2018 The Institute of Brewing & Distilling     

采用氨基酸自动分析仪测定黄酒中的游离氨基酸

<正> 前言 黄酒是中国的一种传统的饮料酒,已有数千年历史,它的酿造用料及发酵工艺与国外酒类不同。众所周知,发酵制品含有多种营养成份,黄酒也不例外,它含有人体必需的氨基酸,具有很高的营养价值。然而,有关黄酒中各种氨基酸含量与酒质优劣和营养价值高低之间的关系等,国内尚未见到系统报道。为配合工艺试验,我们开展了这项方法研究。     

陈酿时间对黄酒中挥发性风味物质和氨基酸含量的影响研究

该研究考察了6种不同陈酿年份绍兴黄酒中挥发性风味物质和氨基酸的变化。通过固相微萃取-气相色谱-质谱联用（SPME-GC-MS）法对不同储存年份黄酒中挥发性风味物质进行分析,并通过全自动氨基酸分析仪检测了6种不同陈酿年份黄酒样品中的游离氨基酸。结果表明,黄酒中共鉴定出28种主要挥发性风味成分,分别为酯类13种、醇类4种、醛类5种、酮类2种、其他类4种;随着陈酿年份的增加,酒体愈加香气浓郁,酒味醇厚;醇类物质随着年份的增加而逐渐减少,酯类化合物随着年份的增加而增加。共检测出16种游离氨基酸,其氨基酸总含量为2.80～3.98 g/L,其中包括7种必需氨基酸以及9种非必需氨基酸,且必需氨基酸含量占氨基酸总含量的35%左右。通过实验发现,3～12年陈酿的黄酒中,随着陈酿年份的增长,酯类物质含量增加,游离氨基酸含量整体呈现上升趋势,而陈酿12年后,游离氨基酸含量急速下降。