双酶分步水解玉米蛋白粉制备玉米肽干粉的研究

利用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶对玉米蛋白粉进行分步水解,确定制备玉米肽干粉的工艺流程.对双酶分步水解和单酶单独水解进行了蛋白质收率(X)和水解度(DH)的对比分析,同时对不同活性碳浓度对水解液脱色率和氮回收率的影响进行了讨论.     

多酶分步水解鸭骨的工艺研究及其产物成分分析

对鸭骨的单酶水解条件进行了优化,并在此基础上进行了多酶(双酶)分步复合水解工艺的研究,分析了最佳水解条件下的产物氨基酸组成及肽分子量分步范围。结果表明:多酶分步复合水解鸭骨的效果优于单酶水解,先用碱性蛋白酶后用木瓜蛋白酶分步复合水解的效果最好,水解度可达34.71%;鸭骨水解物中必需氨基酸含量占氨基酸总量的34.87%(色氨酸未检测),必需氨基酸的相对含量较鸭骨原料有所提高,特别是富含普通谷物中极易缺乏的赖氨酸、苏氨酸和缬氨酸等;鸭骨水解物肽的相对分子质量均在8000u以下,相对分子质量小于1000u的肽含量达31.35%。     

菜籽清蛋白小分子肽的制备

本文利用Alcalase和Flavourzyme双酶对菜籽清蛋白进行分步水解,将水解度由单酶的14.72%提高至28.10%。粗品肽(RSP-R)经SephadexG-25凝胶层析柱分离纯化,得到分子量大致分别为大于5000D的RSP-1,1050D的RSP-2和560D的RSP-3三个级分。RSP-2为主要成分,其蛋白质含量是79.23%,总糖含量是13.88%。这些为后续研究小分子菜籽肽活性功能提供了理想的原料和理论依据。     

玉米醒酒肽的脱苦工艺研究及表征分析

蛋白质水解后其热稳定性、溶解性以及功能特性得到了改善,同时形成了大量的苦味肽。采用活性炭吸附法对玉米醒酒肽脱苦工艺条件进行研究。通过响应曲面分析方法优化其水解工艺,结果表明,脱苦温度为29.7℃,固液比为1∶12(m/v),pH为3.5,时间2h。所测得的玉米肽液中OD220/OD280为37.90。采用高效液相色谱法对玉米醒酒肽进行测定分子量的实验,结果表明:玉米醒酒肽的分子量主要分布在1356.594 Da³207.308 Da之间。氨基酸分析结果显示:玉米醒酒肽中亮氨酸含量最高,丙氨酸其次。     

双酶分步水解时间对玉米肽功能性质的影响

以玉米黄粉为原料,研究Alcalase酶与Protamex、Flavourzyme酶双酶分步水解时间对玉米肽功能性质的影响.结果表明,当Alcalase酶和Protamex、Flavourzyme酶分步水解时,在提高玉米蛋白水解效率的同时,不能改善玉米肽的物化性质.但由于Protamex酶和Flavourzyme酶对Alcalase酶酶解产物起到再作用的效果,使玉米肽提供质子的能力增强,抗氧化活性增强,两种双酶分步水解形式生产抗氧化活性肽的最佳反应时间均为150min.     

微波双酶协同水解大豆分离蛋白制备小分子肽的研究

研究微波加热条件下，用碱性蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解大豆分离蛋白。以氨基氮为评价指标，确定了单酶水解工艺，双酶分步水解的顺序和制备小分子大豆多肽的最佳条件，并通过毛细管电泳方法对水解多肽的分子量进行测定。实验表明：双酶水解优于单酶，制得的大豆肽分子量主要集中在5000以下。     

玉米肽干粉的制备及功能特性研究

利用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶分步水解玉米蛋白粉制备玉米肽干粉.对其组成成分、功能特性的研究表明:玉米肽得率为65%,干粉中肽质量分数为76.5%,富含丙氨酸、亮氨酸和异亮氨酸,肤分子量分布于5 734 U附近,具有高度可溶性且不受pH值的影响,即使浓度高时黏度也很低,具有广阔的应用前景.     

麦胚蛋白双酶酶解物的制备及其体外醒酒活性的研究

为充分利用麦胚资源,制备具有醒酒作用的麦胚肽,本研究以Na_2CO_3预处理过的麦胚为原料,以肽得率(TCA-PSI)、水解度(DH)及乙醇脱氢酶(ADH)激活率为指标,研究了碱性蛋白酶(Alcalase)、中性蛋白酶(Neutral)双酶分步酶解工艺及酶解物的醒酒活性。结果表明,双酶分步酶解的最优工艺条件为麦胚蛋白质量分数为3.5%,Alcalase添加量4 000 U/g,Neutral添加量1000 U/g,所得酶解物的TCA-PSI、DH、ADH激活率分别为:75.49%、65.18%、68.37%。表明麦胚蛋白双酶酶解物可以显著提高ADH的活力,具有较好的体外醒酒活性。     

玉米ACE抑制肽的制备工艺及中试生产

以玉米黄粉为原料,利用Alcalase酶、Protamex酶和Flavourzyme酶酶解制备血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽,研究酶解条件、酶解方式对玉米肽ACE抑制活性的影响。同时,在试验的基础上,对100 kg玉米黄粉酶解制备ACE抑制肽进行了中试生产。实验结果表明:单酶水解制备ACE抑制肽的最适酶为Protamex酶,在酶解150 min时水解产物的ACE抑制率为(90.98±0.54)%,水解产物的分子质量集中在10 405.22~300 Da。Flavourzyme酶和Protamex酶的分步水解可进一步提高玉米蛋白的酶解效率和玉米肽对ACE的抑制活性,在先用Flavourzyme酶水解2 h再加入Protamex酶继续水解3 h后,水解产物的ACE抑制率达到(99.35±3.55)%(IC50=0.764 mg/m L),水解产物的分子质量集中在8 439.49~185.2 Da。采用双酶分步水解方式水解100 kg玉米黄粉时,肽粉得率为27%,ACE抑制率为(56.70±0.86)%(1 mg/m L)。     

pH值渐变条件下双酶协同水解猪皮制备胶原蛋白寡肽的研究

本文研究了在没有外加碱的pH渐变条件下,用枯草杆菌碱性蛋白酶(Alcalase 2.4L)和黑曲霉酸性蛋白酶(3000U/g)双酶协同水解从猪皮胶原蛋白制备寡肽水解物的可行性。考察了单酶单因素水解条件、双酶加入方式对猪皮降解率和蛋白质水解度的影响,并在此基础上通过正交试验进一步优化出双酶一次性投料方案下水解猪皮的最佳条件:水解温度为60℃,碱性蛋白酶加入量为25μl/g蛋白,酸性蛋白酶加入量为4%(g/g),底物浓度为60g/L,水解时间为12h。在上述最佳条件下,新鲜猪皮的降解率可达94.7%,蛋白质的水解度可达17.7%,水解物中分子量小于1000(10个氨基酸以下的肽)的寡肽选择性达到了42.5%。结果表明,在不外加碱的条件下,采用双酶协同水解方法能够显著提高猪皮降解率,特别是蛋白质水解度。     

高谷氨酰胺低聚小麦肽制备用酶的筛选

本文研究了胰酶(Pancreatin)、碱性蛋白酶(Alcalase)、中性蛋白酶(Neutrase)、胃蛋白酶(Pepsin)、酸性蛋白酶(Acidic protease)、复合蛋白酶(Protamex)和风味蛋白酶(Flavourzyme)等8种蛋白酶对小麦蛋白的水解作用。以获得高谷氨酰胺低聚小麦肽为目标,通过分析水解过程中谷氨酰胺肽释放规律变化,筛选出Alcalase和Protamex为最佳水解酶。与其余蛋白酶制剂相比,Alcalase和Protamex可实现对小麦蛋白的有效降解、并最大限度减少蛋白酶对酰胺基团的破坏作用,产物有效谷氨酰胺含量可达20%以上,其中分子量低于3000 Da的水解产物高达95%,尤其是Alcalase酶解产物中分子量小于1000 Da的水解产物含量达到75%。与以往研究相比,本试验以分子量分布替代DH作为蛋白酶筛选的重要依据,从而更加准确反映蛋白酶解特性和难易程度,避免了游离氨基酸的干扰。     

玉米醇溶蛋白肽的超滤膜分级及产物的体外生物活性

为探究分子质量对玉米醇溶蛋白肽体外生物活性的影响,以玉米醇溶蛋白为原料,采用碱性蛋白酶Alcalase酶解制备玉米醇溶蛋白肽,采用截留分子质量为5、3 ku和1 ku的超滤膜对玉米醇溶蛋白肽进行顺次分级分离,获得分子质量大于5 ku、3~5 ku、1~3 ku和小于1 ku 4个组分,通过测定各组分的抗氧化活性和乙醇脱氢酶激活活性,表征超滤膜分级对玉米醇溶蛋白肽体外生物活性的影响。结果表明：用碱性蛋白酶Alcalase酶解玉米醇溶蛋白2 h时,清除DPPH自由基的玉米醇溶蛋白肽组分分子质量分布在1~5 ku范围内;螯合亚铁离子、清除羟自由基和激活乙醇脱氢酶的玉米醇溶蛋白肽组分的分子质量集中在小于1 ku;而玉米醇溶蛋白肽的超氧阴离子自由基清除活性和还原力受其分子质量大小影响较小。综上,分子质量对玉米醇溶蛋白肽的生物活性影响较大,可以选用超滤膜对玉米醇溶蛋白肽活性组分进行分级和富集。     

乙醇对谷朊粉酶解产物的苦味影响研究

为了探寻降低谷朊粉酶解产物苦味的方法,通过添加不同浓度的乙醇(5%、10%和15%),研究其对碱性蛋白酶酶解产物苦味值、游离氨基酸和相对分子质量分布的影响,以及在乙醇存在下碱性蛋白酶、中性蛋白酶以及风味蛋白酶3种复配酶解体系所制得的酶解产物的苦味值和相对分子质量分布变化。结果表明:加入乙醇后,在相同的水解度下(DH),碱性蛋白酶的酶解产物苦味值降低,并与加入乙醇的浓度呈负相关。添加乙醇后,相对分子质量小于1 000的组分含量显著(P0.05)降低,游离疏水性氨基酸(Pro,Ile,Phe和Met)显著(P0.05)增加。添加乙醇后,3种复配酶解体系酶解产物苦味降低,相对分子质量小于1 000的组分含量显著(P0.05)降低。与添加碱性蛋白酶单一酶解相比,在相同的水解度下3种酶复配酶解产物的苦味值进一步降低。添加低浓度乙醇对3种酶的活性影响较小。     

高底物浓度玉米蛋白的双酶复合水解效果研究

利用碱性蛋白酶(Alcalase)、风味蛋白酶(Flavourzyme)和复合蛋白酶(Protamex)对高底物浓度(135g/L)玉米蛋白进行双酶复合水解,研究复合水解对水解物的水解度、可溶性蛋白质含量和抗氧化活性的影响,并对双酶酶解效果较好的酶解液进行了分子量分布测定。结果表明,Flavourzyme和Alcalase、Flavourzyme和Protamex、Protamex和Alcalase顺次水解玉米黄粉,总水解度分别为27.11%、26.95%和19.76%,可溶性蛋白质含量分别为50.33、40.32、48.85mg/ml,抗氧化活性分别为634.35、576.79和593.21 U/ml。多肽分子量主要分布在5 801.170～238.962u,与单酶水解相比均有显著提高。     

两步水解法制备玉米-大豆复合抗氧化肽及其稳定性研究

采用麦芽粉和碱性蛋白酶Alcalase两步水解玉米醇溶蛋白和大豆分离蛋白的混合物(质量比1∶1)制备复合抗氧化肽,以水解度、可溶性蛋白含量和抗氧化活性为指标,对第二步Alcalase的水解条件进行优化,确定两步水解法制备复合抗氧化肽的最适条件。另外,对复合抗氧化肽相对分子质量分布、稳定性和氨基酸组成进行了研究。结果表明,制备复合抗氧化肽的最适条件为在底物质量分数10%、pH 5.5、50℃、酶(麦芽粉)底质量比30%条件下水解3 h后,再在底物质量分数10%、pH 8.5、60℃、酶(Alcalase)底质量比0.75%条件下继续水解3 h。在最适条件下,水解度、可溶性蛋白含量、羟自由基清除率和亚铁离子螯合率分别为36.32%、36.83 mg/mL、40.01%和86.83%,相对分子质量主要分布在300~6 500 Da (含量92.44%)范围内,必需氨基酸指数(EAAI)值为8.02(n=9),属于优质蛋白源。复合抗氧化肽具有热稳定性,在中性及碱性条件下稳定,但不耐受酸性(pH 3~5)、4℃贮存和反复冻融的加工条件。     

Effect of dry heat on the in vitro digestibility and trypsin inhibitor activity of chickpea flour

The effect of a dry heat treatment on trypsin inhibitors, protein quality and molecular weight of products obtained from enzymatic hydrolysis of chickpea flours was analysed in order to use chickpeas as food protein hydrolysates. Chickpea flour obtained from dehusked seeds was processed under different conditions, either by heating or enzymatic treatment. Heat treatment at 140 °C for varying times (1–24 h) inactivated trypsin inhibitors and facilitated enzymatic treatment but showed an unacceptable loss in the nutritional quality of the protein for heating times longer than 6 h. Enzymatic treatment with a commercial protease, Alcalase 0.6L, at pH 8 and 50 °C, increased the protein nutritional value of the chickpea by breaking the protein chains into shorter peptide chains more suitable to human nutrition.     

Preparation and characterisation of isoflavone aglycone‐rich calcium‐binding soy protein hydrolysates

Isoflavone aglycone‐rich calcium‐binding soy protein hydrolysates were prepared by subcritical water treatment and subsequent protease hydrolysis. Contaminated β‐glucosidase in the Protease M preparation could effectively convert glycosides into aglycones. Compared with Alcalase hydrolysates, Protease M hydrolysates exhibited higher molecular weight (>5000 Da) and more hydrophobic characteristics because of its weaker proteolytic activity. The antioxidant activity of Protease M hydrolysates was obviously improved. Initial increased DPPH and ABTS radical scavenging rate of Protease M hydrolysates may be ascribed to the conversion of isoflavones (<30 min) and a gradual release of antioxidant peptides. In the later hydrolysis, a gradual exposure of isoflavones involved in the interior of heat‐induced protein aggregates was mainly responsible for further improved antioxidant activities. Higher calcium‐binding capacity (up to 7.86%) with lower yield of peptide–calcium complex was observed for Protease M hydrolysates. These results could help researchers to develop a feasible protocol for producing nutrient‐enhanced soy protein hydrolysates.     

林蛙皮胶原蛋白肽的制备工艺

以长白山林蛙皮为原料,选用碱性蛋白酶,对酶解温度、酶解时间、加酶量、pH、料液比五个因素来研究,经实验确定最佳酶解条件为:酶解温度50℃,加酶量0.5%,酶解时间3h,pH9.0,料液比1∶3(g/mL),脱色脱腥处理后,喷雾干燥制得微黄色粉末状林蛙皮胶原蛋白肽。结果表明,羟脯氨酸含量为20.69μg/mL,分子量分布在3.5ku以下。     

罗非鱼鱼皮鱼鳞蛋白的酶解及超滤分离

采用Alcalase2.4L、Protamex、Papain、PTN6.0S和Neutrase酶解罗非鱼鱼皮鱼鳞蛋白,探讨了超滤对酶解液分子质量分布和氨基酸组成的影响。结果表明,Alcalase2.4L、PTN6.0S酶解产物的蛋白质回收率、肽得率和水解度均较高,Alcalase2.4L∶PTN6.0S为1∶2添加时酶解效果最好,蛋白回收率为96.37%,水解度为13.24%,肽得率为83.13%。经超滤处理后,3000 u以下分子质量的肽段达到97.73%,比超滤前增加了5.37%,总氨基酸含量由84076.12 mg/100 g增加到97234.79 mg/100 g。     

Alcalase降解水不溶性鸡肉蛋白规律及其产物清除DPPH活性研究

研究了Alcalase降解水不溶性鸡肉蛋白的规律及其产物清除DPPH自由基活性。结果表明,随酶解时间延长,可溶性蛋白质、氨基酸含量不断增加,而肽含量则在水解前8h达到最大,随后不断降低;肽的分子量分布趋势总体表现为大分子量的肽逐渐减少,小分子量肽的含量逐渐增多,肽分子量分布图中肽峰值不断向后推移;Alcalase对分子量在3000～15000Da间的肽段降解能力较弱,水解24h后,这部分肽占总肽量的比值仍为89.93%。水不溶性鸡肉蛋白Alcalase酶解产物有明显的清除DPPH活性,其清除DPPH活性在酶解4h时达到最大,随后不断下降;对于同一酶解时间的产物,浓度越大,其清除DPPH活性越强,但其清除DPPH能力并不与酶解液浓度成倍数关系。