黑米花青素延缓果蝇衰老作用研究

探究黑米花青素延缓衰老的能力及其作用机制。以2 d龄的野生型果蝇模型生物为研究对象,饲喂添加不同质量浓度(0、1、5 mg/mL)黑米花青素的培养基,采用寿命实验、饮食量检测和逆重力爬行实验方法研究黑米花青素对果蝇平均寿命和健康寿命的影响;采用蓝精灵实验检测黑米花青素对果蝇肠道完整性的影响;用荧光实时PCR测定果蝇体内抗氧化基因SOD、CAT、Rpn11 mRNA表达量的变化。研究发现,饲喂黑米花青素后果蝇平均寿命和健康寿命均高于对照组;黑米花青素对果蝇肠道有一定的保护作用;抗氧化基因mRNA表达水平显著提高(Cu/Zn-SOD,P<0.01;Mn-SOD、CAT和Rpn11,P<0.05)。研究认为,黑米花青素延缓衰老的作用可能是通过上调内源性抗氧化基因来实现的。     

山楂提取物对高脂损伤果蝇的保护作用

研究山楂提取物(Hawthorn Fruit Extract,HFE)对高脂致氧化损伤的雄性果蝇寿命的影响并探究其延缓果蝇衰老的分子机制。将2 d龄雄性果蝇随机分组,在高脂培养基中饲喂不同剂量(0.5、1.5、4.5 mg/m L)山楂提取物,研究山楂提取物对果蝇生存寿命及果蝇体内抗氧化酶活性(铜锌超氧化物歧化酶,Copper-zinc-containing superoxide dismutase,Cu/Zn-SOD;锰超氧化物歧化酶Manganese-containing superoxide dismutase,Mn-SOD;过氧化氢酶,Catalase,CAT)、脂质过氧化产物丙二醛(Malonaldehyde,MDA)含量、蛋白质羰基(Protein Carbonyl,PCO)含量及抗氧化相关基因表达水平的影响。HFE可以显著延长果蝇的平均寿命和最高寿命(4.5 mg/m L,P0.05);4.5 mg/m L HFE可以显著提高果蝇体内SOD和CAT活性(P0.05),显著降低MDA(P0.01)和PCO含量(P0.05);同时显著上调果蝇体内Cu/Zn-SOD及Nrf2 m RNA表达水平(P0.05)并且极显著上调Mn-SOD和CAT m RNA表达水平(P0.01)。HFE对高脂膳食所导致的果蝇氧化损伤具有保护作用,HFE延缓果蝇衰老和抗氧化作用可能与其调控抗氧化基因的表达水平相关。     

迷迭香提取物抗氧化作用及其对果蝇寿命的影响

目的:探究迷迭香提取物(RE)的抗氧化能力及其作用机制。方法:以2 d龄Oregon K野生型雄性果蝇为试验模式生物,饲喂添加不同质量浓度(0,0.2,0.5,1.5 mg/m L)迷迭香提取物的培养基,采用生存试验与急性试验研究迷迭香提取物对果蝇寿命的影响;测定果蝇体内超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化氢酶(CAT)活力及氧化产物丙二醛(MDA)的含量;用Real time-PCR法测定果蝇体内抗氧化基因SOD、CAT、MTH(Methuselah)m RNA表达量的变化。结果 :给予迷迭香提取物后,果蝇的平均寿命及最高寿命较空白对照组均明显延长,SOD、CAT酶活力及其基因m RNA表达水平显著升高(0.5,1.5 mg/m L,P0.05),MDA含量极显著下降(P0.01),同时MTH m RNA表达水平呈下调趋势(P0.05)。结论 :迷迭香提取物延缓衰老与抗氧化的作用可能通过上调内源性抗氧化酶来实现。     

黑豆皮提取物升高内源抗氧化酶延长果蝇寿命

黑豆因富含高含量的花青素而被作为天然食品抗氧化剂。本研究探讨黑豆皮提取物(Black Soybean Coat Extract,BSCE)对果蝇寿命的影响及其作用机制。拟以雄性黑腹果蝇为动物模型,饲喂添加0、0.5、1.5、4.5 mg/mL BSCE的培养基,统计果蝇寿命,测定果蝇体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力,丙二醛(malondialdehyde,MDA)及蛋白质羰基的含量。Real Time-PCR法测定果蝇体内SOD、CAT、Nrf2及MTH的mRNA表达水平。结果显示饲喂BSCE可以显著延长果蝇的平均寿命(1.5、4.5 mg/mL,P0.05);饲喂4.5 mg/mL BSCE可以显著升高果蝇体内Cu-Zn-SOD、Mn-SOD和CAT酶活力(P0.05)并极显著降低蛋白质羰基含量和MDA含量(P0.01)。Real Time-PCR结果显示,给予4.5 mg/mL BSCE能够显著上调Mn-SOD、CAT mRNA表达水平(P0.05)且极显著上调CuZn-SOD、Nrf2 mRNA表达水平(P0.01)。因此,黑豆皮提取物可以通过升高内源性抗氧化酶SOD和CAT活性延长果蝇寿命,且其调节机制与MTH基因有一定联系。     

紫甘薯提取物对高脂饲喂果蝇的抗氧化作用机制

目的:探究紫甘薯提取物(Purple sweet potato extract,PSPE)对高脂膳食饲喂果蝇寿命的影响及其作用机制。方法:2天龄雌性果蝇随机分为5组,正常组培养于普通培养基中,高脂组于添加10%猪油的高脂培养基中培养,实验组分别在添加PSPE 0.5、1.0、2.0 mg/m L的高脂培养基中培养,每3天更换新鲜培养基,统计果蝇存活率,并计算果蝇平均寿命及最高寿命。测定果蝇体内相关抗氧化酶活力及其基因表达水平。结果:PSPE可以明显延长果蝇的平均寿命及最高寿命。1.0mg/m L PSPE能够显著升高果蝇体内铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn-superoxide dismutase,Cu-Zn-SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力(P0.05),降低丙二醛(malonaldehyde,MDA)及蛋白质羰基(Protein carbonyls,PCO)含量(P0.01);0.5 mg/m L PSPE显著升高果蝇Cu-Zn-SOD、Mn-SOD以及CAT m RNA表达水平(P0.05),2.0 mg/m L剂量组显著升高果蝇Cu-Zn-SOD及Nrf2 m RNA(P0.05)表达水平。结论:PSPE能够有效增强果蝇体内的抗氧化能力,延长果蝇寿命,其作用机制可能与升高内源性抗氧化基因的表达有关。     

miRNA398调控烟草Cu/Zn-SOD基因的表达

模式植物miRNA398可以抑制靶基因Cu/Zn-SOD的表达。为揭示烟草miRNA398的生物学功能,采用荧光定量PCR技术分析了烟草品种CB-1和B37在干旱胁迫条件下miRNA398和Cu/Zn-SOD基因的表达量,并预测了烟草miRNA398结合Cu/Zn-SOD基因的位点。结果表明:烟草miRNA398与Cu/Zn-SOD基因5非翻译区的21个碱基序列互补,从而抑制该基因的表达;在干旱胁迫条件下,CB-1的miRNA398表达水平上升,B37的miRNA398表达水平下降,Cu/Zn-SOD基因表现出与miRNA398相反的表达趋势,说明抗旱能力存在差异的两个品种中miRNA398均可抑制Cu/Zn-SOD基因表达,并且对干旱胁迫响应具有两种不同的方式。     

根皮素延缓雌性果蝇的衰老作用

本文探究了根皮素(phloretin,PT)对雌性果蝇延缓衰老作用的影响及其潜在机制。雌性果蝇干预根皮素后(1.15 mM、2.3 mM、4.6 mM),观察对寿命、爬行能力、抗应激能力、肠道屏障功能、肠道菌落总数、肠道前体细胞数目、内源抗氧化酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-PX)活力、脂质过氧化产物丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量以及相关抗氧化基因SOD2、CAT、玛士撒拉(methuselah,MTH)和叉头蛋白(forkhead box o,foxo)的m RNA表达水平的影响。结果显示,雌性果蝇干预根皮素浓度为4.6 mM时,与空白组相比,平均寿命延长了23.98%,30d时爬行能力上调了44.96%,对双氧水和十二烷基硫酸钠损伤后的寿命延长了24.35%和23.94%,肠道前体细胞减少了15.59%,肠道微生物乳酸杆菌(lactobacilli,LMRS)、肠杆菌(enterobacteria,ENT)、醋酸杆菌(acetobacteria,ACE)及其他细菌(nutrientrichmedium,NR)分别下调了23.73%、33.33%、43.24%和27.50%,Mn-SOD、Cu/Zn-SOD、CAT、GSH-PX酶活性分别提高了17.85%、31.03%、32.07%和25.57%,MDA生成量降低了23.55%,foxo、CAT和SOD2 mRNA表达水平分别上调了67.21%、32.54%和36.27%,MTH mRNA表达量降低了27.16%。根皮素可以提高雌性果蝇抗氧化酶活力和抗氧化基因表达水平,提高机体抗应激能力,维持肠道稳态,延长果蝇寿命。     

紫薯提取物对雌性果蝇寿命的影响及其作用机制

目的:研究紫薯提取物(Purple Sweet Potato Extract,PSPE)对雌性果蝇寿命的影响并探讨其延缓衰老的作用机制。方法:采用2天龄果蝇作为研究对象,培养于分别添加0、0.5、2.0、5.0 mg/m L PSPE的培养基,统计果蝇寿命,计算果蝇平均寿命和最高寿命。测定果蝇体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力及丙二醛(malonaldehyde,MDA)的含量。Real TimePCR法测定果蝇体内SOD、CAT及MTH的mRNA表达水平。结果:添加PSPE可以显著延长果蝇的平均寿命(2.0、5.0mg/m L,P<0.05);5.0mg/m L PSPE可以极显著升高Cu-Zn-SOD和CAT酶活力(P<0.01),显著降低MDA含量(P<0.05)。Real Time-PCR结果显示,给予5.0mg/m L PSPE能够显著上调Cu-ZnSOD、Mn-SOD mRNA表达水平(P<0.05)且极显著上调CAT mRNA表达水平(P<0.01)。结论:紫薯提取物对果蝇具有延缓衰老和抗氧化作用。     

转基因SOD高表达烟草杂交F1代的SOD和POD研究初报

以转基因Fe-SOD、Mn-SOD高表达烟草和非转基因烟草品系为亲本进行正、反交,得到6个组合的F1代。对杂交后代7叶龄烟苗的研究表明,Mn-SOD高表达烟草×非转基因烟草后代的SOD、POD活性均明显高于其它杂交后代,其中SOD活性高出36.00%～66.42%,POD活性高出8.01%～85.27%。6个杂交组合均有3条SOD同工酶带,类型为Cu,Zn-SOD(迁移率为0.02)、Fe-SOD(迁移率为0.042)和Mn-SOD(迁移率为0.319),具有7条POD同工酶带。杂交组合间SOD和POD同工酶不存在明显差异。     

迷迭香提取物延缓衰老作用的研究

探讨迷迭香提取物在延缓衰老方面的作用。给果蝇饲喂不同剂量(0、1、3、5 mg/mL)的迷迭香提取物,利用果蝇生存试验研究迷迭香提取物对果蝇寿命的影响,于30 d测定果蝇超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量。结果表明各剂量组均能延长果蝇的寿命,并随着迷迭香提取物浓度的增大,在一定浓度范围呈剂量-效应关系。3 mg/mL剂量组可显著提高果蝇体内SOD和CAT活力,降低MDA含量。迷迭香提取物可以提高果蝇体内抗氧化酶活性,抑制脂质过氧化,具有延缓衰老的作用。     

褐变黑枸杞抗氧化作用的研究

为探究褐变黑枸杞对果蝇抗氧化作用,以果蝇为动物模型,在果蝇培养基中分别加入3mg/mL、12mg/mL褐变黑枸杞和红枸杞,检测其对果蝇寿命,超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)等抗氧化酶活力及抗氧化相关基因表达的影响。结果表明:与正常组相比,褐变黑枸杞高剂量组果蝇的寿命明显延长(P<0.01),SOD和GSH-Px酶活力显著提高(P<0.05),MDA的含量显著降低(P<0.05),且和红枸杞组相比存在显著性差异(P<0.05);实时定量PCR结果显示:褐变黑枸杞能显著上调Cu-Zn SOD(SOD1)、Mn-SOD(SOD2)和CAT mRNA表达水平(P<0.05),MTH mRNA表达水平显著下调(P<0.05)。综上所述,褐变黑枸杞在体内具有很强的抗氧化活性,其作用机制可能是通过上调内源性抗氧化酶的表达,从而增强果蝇抗氧化能力,延缓果蝇衰老。     

根皮苷对雌性果蝇寿命的影响及其作用机制

目的：研究根皮苷（phloridzin）对雌性果蝇寿命的影响并探究其延缓果蝇衰老的分子机制。方法：在果蝇寿命实验中,采用2 日龄雌性果蝇作为研究对象,在其培养基中分别加入0、0.5、2.0、5.0 mg/mL根皮苷进行培养,直至果蝇全部死亡,计算果蝇的平均寿命和最长寿命;通过白草枯和双氧水急性实验测定根皮苷对果蝇氧化应激损伤的影响;试剂盒法测定果蝇体内抗氧化酶活力;实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time polymerasechain reaction,real-time PCR）检测抗氧化基因表达水平。结果：2.0、5.0 mg/mL根皮苷可以显著延长果蝇的平均寿命和最长寿命（P＜0.05）;根皮苷能够对百草枯和双氧水造成的雌性果蝇氧化应激损伤起到有效保护作用;添加 5.0 mg/mL根皮苷可以极显著提高Cu/Zn-超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和过氧化氢酶（catalase,CAT）活力（P＜0.01）,极显著降低丙二醛（malonaldehyde,MDA）含量（P＜0.01）;添加5.0 mg/mL根皮苷可以极显著上调Cu/Zn-SOD及CAT mRNA表达水平（P＜0.01）。结论：根皮苷能够延缓雌性果蝇衰老,且具有抗氧化作用,这可能与其调控抗氧化基因的表达水平相关。     

Green tea catechins upregulate superoxide dismutase and catalase in fruit flies

Chinese Longjing green tea is an excellent source of polyphenol antioxidants. HPLC analysis revealed that Longjing green tea catechin extract (GTC) contained 62% epigallocatechin gallate (EGCG), 19% epigallocatechin (EGC), 9% epicatechin gallate (ECG), and 7% epicatechin (EC). Investigating the effect of GTC on the lifespan of Drosophila melanogaster, we observed that a 10 mg GTC/mL diet could prolong its 50% survival time by 36% and mean lifespan by 16%. This was consistent with 17% reduction in total body lipid hydroperoxide (LPO) level in GTC-treated flies compared to the control group. Supplementation of 10 mg GTC/mL diet increased the survival time only in wild type Oregon-R-C (OR) but not in two mutant fly lines, SOD(n108)/TM3 (gene for superoxide dismutase (SOD) was knocked out) and Cat(n1)/TM3 (gene for catalase was knocked out), when the flies were challenged with paraquat or hydrogen peroxide. Accordingly, SOD and catalase activities in OR wild type increased by 40 and 19%, respectively. RT-PCR analysis indicated that the genes for copper-zinc containing SOD (CuZnSOD), manganese containing SOD (MnSOD), and catalase were upregulated. It was concluded that prolonging lifespan by GTC in D. melanogaster was influenced, among others, by upregulation of endogenous antioxidant enzymes.     

纹党多糖提高果蝇生命力和抗氧化活性

以纹党多糖（Codonopisis pilosula polysaccharide,CPP）为材料,研究多糖对黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）生育力和寿命及抗氧化活力的影响。将黑腹果蝇随机分为50、100、200和400 mg/L剂量处理组,以生理盐水为对照组,连续培养四代,考查不同浓度的纹党多糖对果蝇生存能力的影响,包括果蝇子一代到子四代（F1~F4）生育力和寿命的变化,雌、雄果蝇数量的变化,测定百草枯急性氧化损伤下的存活时间、抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）的活力及丙二醛（MDA）含量的变化。结果显示,400 mg/L剂量的CPP能显著提高F1~F4代雌、雄果蝇世代生育力,与对照相比后代果蝇数量增加了150%（p<0.01）,延长F1~F4代雌、雄果蝇寿命,与对照相比后代果蝇寿命增加了34.07%（p<0.01）,延长百草枯急性氧化损伤下F1~F4代雌、雄果蝇的平均存活时间,与对照相比存活时间延长了7.06 h和6.28 h（p<0.01）,同时提高了果蝇体内SOD和CAT活性（p<0.01）,降低了果蝇体内的MDA含量（p<0.01）。研究结果表明,CPP能显著提高F1~F4代雌、雄果蝇世代生育力,延长寿命,延长百草枯急性氧化损伤下果蝇的存活时间,提高了果蝇的抗氧化能力和生命力,促进了生殖能力,表现出剂量效应,果蝇世代总量雌、雄果性别比接近1:1。     

萝卜叶乙醇提取物不同极性部位对果蝇寿命的影响

以萝卜叶为研究对象,经乙醇提取、不同极性有机溶剂依次萃取获得石油醚部位(Petroleum ether fraction,PERs)、氯仿部位(Chloroform,CRs)、乙酸乙酯部位(Ethyl acetate fraction,EARs)、水饱和正丁醇部位(Water saturated butanol,WBRs)和水部位(Aqueous fraction,AQRs),并考察各部位的总酚、总黄酮含量及总抗氧化活性。以果蝇为模式生物,研究萝卜叶乙醇提取物不同极性部位对其寿命及生殖活性的影响。结果表明,EARs的总酚((78.58±0.51) mg GAE/g dw)、总黄酮((244.40±1.00) mg RE/g dw)含量及抗氧化活性最高。不同极性部位均能延长果蝇的寿命,并提高其生殖活性,其中以EARs效果最佳。经饲喂高剂量(15 mg/kg) EARs后,果蝇的平均寿命延长22.98%、最高寿命延长27.27%、交配持续期延长39.75%、交配潜伏期缩短72.12%。各不同极性部位均能提高果蝇SOD活性和MDA含量,且EARs和WBRs均能提高果蝇CAT活性。以上结果表明,萝卜叶乙醇提取物的EARs和WBRs具有延长果蝇寿命的作用。     

对羟基苯甲酸甲酯对果蝇的毒性与雌激素作用

探讨对羟基苯甲酸甲酯(MP)对果蝇生长发育与生殖的影响。用含不同MP 浓度的培养基喂饲果蝇,统计并分析果蝇亲代与子代产卵量、发育周期、出蛹与羽化量及体重。结果表明,0.2%MP 对果蝇有明显的毒性作用,降低了产卵量、出蛹及羽化量和雄蝇体重,延长了发育周期,而低浓度MP 具有潜在的雌激素作用,0.02%MP可提高子代产卵量、出蛹及羽化量,缩短生长周期。     

山楂对果蝇抗氧化相关调控基因表达的影响

以果蝇为动物模型,研究给予不同剂量山楂提取物（0、0.8、4 mg/mL）对果蝇寿命、抗氧化酶活力及抗氧化相关调控基因表达的影响。结果表明：添加山楂提取物可以延长果蝇寿命;体内抗氧化酶活力测定结果显示,添加0.8 mg/mL山楂提取物可以显著升高铜锌超氧化物歧化酶（CuZn-superoxide dismutase,CuZn-SOD）酶活力（P＜0.05）,给予4 mg/mL山楂提取物可以极显著升高CuZn-SOD酶活力（P＜0.01）和显著升高过氧化氢酶（catalase,CAT）酶活力（P＜0.05）,且降低丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平。实时定量PCR（real timepolymerasechain reaction,real time-PCR）,结果显示,给予4 mg/mL山楂提取物显著上调CuZn-SOD、CAT mRNA表达水平（P＜0.05）;给予0.8 mg/mL山楂提取物磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶（phospholipid hydroperoxideglutathione peroxidase,PHGSH-Px） mRNA表达水平显著升高（P＜0.05）,4 mg/mL组表达水平极显著升高（P＜0.01）。综上,山楂在机体内抗氧化活性可能是通过上调内源性抗氧化酶来实现的。     

甘薯汁对果蝇寿命及抗氧化能力的影响

为探讨甘薯汁抗氧化及防衰老的功效,选取果蝇为动物模型,在培养基中分别添加低、中、高剂量（分别为0.10、0.15、0.20 mg/mL）甘薯汁饲喂8 h内羽化未交配的雌、雄果蝇,通过果蝇生存实验及测定不同饲养时间果蝇体内的超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力、总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,评价甘薯汁对果蝇寿命和抗氧化酶活性的影响。结果表明：与对照组相比,不同剂量甘薯汁组均能显著延长雌、雄果蝇的平均寿命（P＜0.05或P＜0.01）,且呈剂量依赖性。果蝇SOD活力、T-AOC在低、中、高剂量组中均显著增加（P＜0.05或P＜0.01）,中、高剂量组果蝇体内MDA含量显著降低（P＜0.05或P＜0.01）。其中,与对照组相比,高剂量组可使雌、雄果蝇平均寿命分别延长17.93%和16.00%,SOD活力分别提高50.51%、58.61%,T-AOC分别提高79.73%、62.67%,MDA含量分别下降35.59%、37.14%。结论：甘薯汁可以提高果蝇体内的抗氧化能力,具有一定的延缓衰老作用。