冰乙醇分级离心法分离纯化鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的研究

采用冰乙醇分级离心法提取鸡卵黄免疫球蛋白 (Immunoglobulin of egg yolk,IgY).通过低温乙醇沉淀、DEAE 葡萄糖凝胶 A-50 离子交换层析、Tris-HCl 缓冲液洗脱及 Sephadex G200 凝胶过滤等逐步纯化免疫球蛋白.研究卵黄稀释倍数、pH 值、乙醇添加量以及盐浓度对纯化效果的影响.分离纯化后所得的提取物经检测 IgY 纯度可达98%,且很好地保持了免疫球蛋白的活性.     

低温乙醇除脂法纯化鸡卵黄中免疫球蛋白

采用低温乙醇除脂法提取鸡卵黄免疫球蛋白 (immunoglobulinyolk,IgY)。通过低温乙醇沉淀、透析和葡聚糖凝胶等不同方法逐步纯化免疫球蛋白。研究了卵黄稀释倍数、乙醇浓度、NaCl浓度以及离心转速对纯化效果的影响。分离纯化后所得的冷冻干燥制品 ,经SDS PAGE和抑菌试验检测可知 :可溶性蛋白质得率为每毫升蛋黄 1 2 6mg ,可溶性蛋白质含量占总蛋白质量的 97% ,且保持了免疫球蛋白的活性     

鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)分离纯化的研究

对鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的分离纯化进行了研究.工艺流程为:卵黄→8倍水稀释并搅拌10 min→用HCl调Ph至5.2后在4 ℃静置2 h去沉淀→在上清夜中加入95 %冰乙醇(-20 ℃)使终浓度为60 %(v/v)→4 ℃搅拌20 min后离心(22000 r/min,4 ℃,25 min)→收集沉淀并加入0.028 mol/L NaCl溶液在4 ℃下过滤除去脂蛋白沉淀→收集的滤液用SDS-PAGE法进行纯化得纯度为98 %的1gY.用大肠杆菌(E.coli)对其活性进行测定,效果良好,此方法能保持免疫球蛋白的活性.     

鸡卵黄免疫球蛋白的分离制备研究

实验研究了从高免鸡卵黄中分离纯化免疫球蛋白(IgY)的方法。确定最优条件为:卵黄十倍稀释,pH5.3,-18℃冻结6h,4℃解冻;添加3%硅藻土进行微滤;采用超滤浓缩五倍;再用45%饱和硫酸铵(pH5.3)盐析;沉淀重溶后经DEAE-Sepharose F.F.柱层析分离纯化。结果表明,用此方法可以从高免鸡蛋中得到电泳纯IgY,总活性回收率达到64.16%。     

四种鸡卵黄免疫球蛋白纯化方法的研究

本文比较了分离纯化鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的四种方法(即水稀释法,聚乙二醇法,葡聚糖硫酸盐法和黄原胶法)。包括IgY产量,纯度,活性,简便性及扩大生产规模的潜力。试验表明:水稀释法(DS)产量最高,然后依次为葡聚糖硫酸盐法(DS),黄原胶法(Xan),聚乙二醇法(PEG);同时发现水稀释法简便、快速、高效,适用于工业化生产。     

抗变链球菌鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的制备及活性检测

以远缘链球菌(S.sorbrinus 6715血清型g)免疫产卵母鸡,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定鸡卵黄中免疫球蛋白(Immunoglobulin of Yolk,IgY)的活性,研究鸡免疫应答并制备出高免抗-S.sorbrinus IgY.结果显示以109 cfu/只剂量免疫的母鸡,第一次免疫后的第七天卵黄中出现特异性IgY,加强免设后抗体效价上升更快,经ELISA法检测,卵黄中的抗体效价到1384.而冷冻干燥后的IgY,其效价要超过12000.     

盐析法提取卵黄免疫球蛋白的研究

为了确定盐析法提取特异性卵黄免疫球蛋白的最佳盐浓度，采用SDS—PAGE鉴定IgY的纯度，用RID测定IgY含量，间接ELISA法检测特异性卵黄抗体的活性。结果表明：用饱和度50％的硫酸铵盐析一次，再用140g／L的硫酸钠溶液盐析，可以获得469，6的回收率和77％的纯度。盐析液经超滤膜包超滤后制得的冷冻干燥制品，保持了完整的抗体结构和良好的抗体活性。这一结果为IgY的进一步分离纯化奠定了基础。     

禽蛋黄免疫球蛋白促进人体健康作用的研究进展

卵黄免疫球蛋白(yolk immunoglobulin,IgY)作为禽蛋中重要的免疫活性成分,具有稳定性好、安全性高、廉价、易获得、免疫活性强、不会引发耐药性等优点,在科学研究和生产应用中表现出极强的竞争力.本文综述了IgY作为良好的抗生素替代物在病毒、细菌性疾病防治中的显著优势.另外,IgY通过特异性作用于关键限速酶...     

特异性抗肠出血性大肠杆菌O157:H7内毒素鸡卵黄抗体的制备

目的:比较研究LPS和O-SP的免疫原性,制备出特异性抗内毒素(LPS)鸡卵黄免疫球蛋白(eggyolkimmunoglobulin,IgY),用于对E.coliO157:H7的免疫预防及检测。方法:分别用灭活E.coliO157:H7菌体、不同浓度内毒素(LPS)及O-特异性多糖链(O-SP)与不完全弗氏佐剂充分乳化后作抗原免疫临产蛋母鸡,以水稀释法从卵黄中提取抗体,阴离子交换色谱法实现对抗体的纯化,间接ELISA及双向免疫扩散检测抗体产生效价与活性。结果与结论:所制内毒素(LPS)和O-SP均有较好的免疫原性,刺激鸡体后可产生高效价抗体,灭活菌体、600μg/mlLPS、1200μg/mlLPS、2000μg/mlLPS、O-SP抗体产生效价最高可分别达1:32000、1:28000、1:32000、1:12000、1:40000。结合离子交换色谱,用0.185mol/L的离子强度可实现一步洗脱纯化抗体,制备出高纯度、高活性、特异性强的鸡卵黄免疫球蛋白IgY,为大肠杆菌O157:H7的感染防治提供了可靠的保证,在此实验基础之上可进一步探讨应用特异性IgY对大肠杆菌O157:H7的检测。     

鸡卵黄免疫球蛋白作为食品添加剂和抗体食品的应用

鸡卵黄免疫球蛋白IgY(Egg Yolk Immunoglobulin)是一种与哺乳动物IgG结构类似,具有较强免疫特性的功能蛋白.口服IgY可使机体获得被动免疫,抑制有害细菌或病毒对人体的侵害,增强机体的免疫力,因此IgY可作为食品添加剂或直接以具有免疫特性的卵黄制成抗体食品,达到防治疾病,保护健康的目的.     

微波辅助萃取鹌鹑蛋黄卵磷脂研究

研究相关因素，如萃取液pH值、料液比、微波辐射功率与时间等，对微波辅助萃取鹌鹑蛋黄卵磷脂效果的影响。以鹌鹑蛋黄为原料，95％无水乙醇为萃取剂，在单因素水平试验的基础上进行正交试验，优化微波辅助萃取鹌鹑蛋黄卵磷脂最佳工艺条件：95％乙醇的pH值8．5，料液比1：4，辐射功率650W，辐射时间40s．     

大蒜中蒜氨酸分离纯化工艺研究

以大蒜为原料,分别研究了醇沉法和葡聚糖凝胶G-10对蒜氨酸的分离纯化效果。结果表明醇沉法分离蒜氨酸的最佳工艺条件为:大蒜提取液真空浓缩至可溶性固形物含量为20%,加入乙醇至终浓度为80%,静置18 h,分离得上清液及沉淀,再将所得上清液及沉淀复溶后按上述条件分别进行醇沉,得二次醇沉上清液,合并,冷冻干燥,得蒜氨酸粗品。蒜氨酸粗品经葡聚糖凝胶G-10色谱法纯化最佳条件为:上样液浓度为30%,上样量2%柱体积,洗脱流速1 mL/min,通过葡聚糖凝胶G-10分离后,蒜氨酸的纯度可达到43.5%。     

抗人大肠杆菌蛋黄抗体的分离纯化及理化性质研究

以人源大肠杆菌(ATCC23985)免疫产蛋母鸡所产免疫蛋为原料，通过蛋黄水提物制备、乙醇分级沉淀、离子交换色谱和凝胶排阻色谱对其中的免疫蛋黄抗体进行了分离纯化，并对其基本理化性质进行了分析。结果表明：蒸馏水-氯仿法是制备蛋黄水提物的最优方法，而35％的乙醇添加量能够很好地将水提物中的抗体沉淀出来。经DEAE-Sepharose柱和SephacrylS-200柱连续纯化的抗体在电泳检测时只有1个区带。研究获得的抗人大肠杆菌卵黄抗体的等电点为5.5，包含分子质量分别为65900u和24600u的2类亚基。该抗体的氨基酸组成与普通蛋黄抗体的氨基酸组成差异不大。     

新工艺白酒生产实践与认识

新工艺白酒中,己酸乙酯香气随酒度增加而下降,乳酸乙酯有助香作用,乙酸乙酯对己酸乙酯有掩盖作用;适量丁酸乙酯对己酸乙酯有助香作用,杂醇油对己酸乙酯有相杀作用。酒精要符合国家食用标准,并采用净化介质法,活性炭法,高锰酸钾法,复蒸法处理。选用合格的香精和香料,避免影响白酒质量。浓香型白酒配方设计,根据口感要求而定。利用固态白酒,酒头,酒尾和中草药勾调新工艺白酒,能够使产品提高质量,突出白酒风格。     

Activity-guided isolation and identification of free radical-scavenging components from an aqueous extract of Coleus aromaticus

An activity-directed fractionation and purification process was used to identify the DPPH (l,l-diphenyl-2-picrylhydrazyl) free radical-scavenging components of Coleus aromaticus Benth. Fresh leaves of C. aromaticus were extracted with water and then separated into hexane, ethyl acetate, and water fractions. Among these, only the ethyl acetate phase showed strong DPPH radical-scavenging activity in vitro, when compared with water and hexane phases. The ethyl acetate fraction was then subjected to separation and purification using Sephadex LH-20 chromatography. Three compounds showing strong DPPH radical-scavenging activity were shown, by spectral methods (¹H NMR, ¹³C NMR, and MS) and by comparison with literature values, to be rosmarinic acid, chlorogenic acid and caffeic acid. In addition, HPLC identification and quantification of isolated compounds were also performed. Rosmarinic acid was found as a major component and principally responsible for the radical-scavenging activity of C. aromaticus.     

蛋黄免疫球蛋白在食品上的应用

对IgY的性质、制备及其在食品工业上的应用作了较详细的论述。     

Acetylcholinesterase inhibitory-active components of Rhodiola rosea L.

An activity-directed fractionation and purification process was used to identify the acetylcholinesterase inhibitory-active components of Rhodiola rosea L. (RR). Dried rhizome of RR was extracted with boiled ethanol. After removal of tannins, the extract was separated into chloroform, ethyl acetate, n-butanol and water fractions. Among these, chloroform and n-butanol fractions showed stronger activity by bioassay for anti-cholinesterase activity than did ethyl acetate and water fractions. The chloroform fraction was then subjected to separation and purification using silica gel column chromatography and Sephadex LH-20 chromatography. One compound, showing strong anti-cholinesterase activity, was identified by spectral methods (NMR, UV and MS) and by comparison with authentic samples. It proved to be hydroquinone.     

香菇子实体多糖分离纯化的研究

将香菇子实体干粉经热水浸提、乙醇沉淀,得到香菇多糖粗品。香菇多糖粗品经Sevage法去除游离蛋白,H2O2脱色,用DEAE-纤维素柱层析,经蒸馏水、0.05mol/LNaCl、0.1mol/LNaCl、0.2mol/LNaCl、0.3mol/LNaCl和0.4mol/LNaCl洗脱,得到6个香菇多糖级分A～F;然后用SephadexG-200柱进一步纯化香菇多糖B级分,得香菇多糖亚级分B-1和B-2;再研究其中的B-1。采用SephdexG-200柱层析和聚丙烯酰胺凝胶电泳法,证实该多糖组分为均一多糖。     

蛋黄卵磷脂的提取方法研究

为探讨从蛋黄中提取蛋黄卵磷脂的方法。试验以蛋黄为原料,采用有机溶剂和酶解法从蛋黄中提取卵磷脂粗品,然后分别经柱硅胶层析和金属离子沉淀法纯化获得卵磷脂精品,通过测定卵磷脂的含磷量,判断其纯度高低。结果显示:采用有机溶剂法获得蛋黄卵磷脂粗品,然后经柱硅胶层析纯化可获得高纯度蛋黄卵磷脂精品,总得率为8.38%,卵磷脂的含磷量为15.33%。是一种高效、经济的蛋黄卵磷脂提取方法。