传统酿造酱油酱醪中的霉菌筛选及其部分酶系特征分析

传统酿造酱油发酵过程中,微生物种类繁多,多数为环境中自然落入并参与发酵,本研究旨在从传统酿造酱醪中筛选不同的霉菌并探究其酶活力特性。本研究从酱醪中分离到49株霉菌,挑选形态有差异的18株霉菌进行分子生物学鉴定,鉴定结果归属于4个菌属,即青霉属、枝孢霉属、曲霉属和链格孢菌。对这些霉菌进行酶系分析,结果表明霉菌的酶系特点与霉菌类型密切相关,其中黑曲霉的酸性蛋白酶和β-葡萄糖苷酶突出,米曲霉、红绶曲霉和链格孢菌中性蛋白酶、糖化酶和氨肽酶活力突出。根据酶活及菌种特性,选用黑曲霉AN1和AN2分别与米曲霉进行混合制曲,发现黑曲霉AN2和米曲霉混合制曲效果更佳,相比于米曲霉大曲,其中性蛋白酶与酸性蛋白酶分别提高了42.84%和22.27%,且糖化酶和氨肽酶提高117.54%和15.10%,具有较好的应用价值,该研究为筛选酱醪中优质的霉菌提供理论依据。     

甜面酱保温发酵过程中微生物的研究

采用分离计数方法探究甜面酱保温发酵过程中的微生物组成及变化规律,并对优势菌株进行初步分离与鉴定。结果表明:甜面酱保温发酵过程中,细菌数量先上升后下降,霉菌数量则呈下降趋势,未检测出酵母。通过分离获得4株优势霉菌和5株优势细菌,经初步鉴定,其中2株为米曲霉,1株为黑曲霉,1株为根霉,2株为芽孢杆菌属,其余3株分别为假单胞菌属、链球菌属及德克斯氏菌属。生理效价检测结果表明:链球菌属细菌产酸及氨基态氮能力较强,分别为1.2%,0.43%;黑曲霉产糖化酶活力较高,约为352.33U/g,M2米曲霉菌株产蛋白酶活力较高,为53.7U/g。     

玫瑰醋纯种"发花"工艺的研究

研究了不同霉菌种类、接种量、霉菌比例、冲缸放水时间对浙江玫瑰醋"发花"及后续发酵的影响,提出了一条可行的玫瑰醋纯种"发花"工艺.试验优选的玫瑰醋纯种"发花"工艺条件是:菌种为黑曲霉与根霉;"发花"时间7 d;菌种总接种量为米量的0.8%;菌种配比为黑曲:根霉=0.5:1或黑曲:根霉=0.8:1.     

传统甜面酱种曲中优势菌种的分离及初步鉴定

为进一步提高传统甜面酱的质量,本研究从不同地区采集传统甜面酱种曲,利用稀释平板法从曲样中分离获得14株优势霉菌,并对所分离霉菌进行菌落形态观察,采用湿室培养法结合显微镜观察进行初步鉴定.鉴定结果为曲霉科黑曲霉6株;曲霉科米曲霉7株;根霉1株.再把分离所得14株形态不同的霉菌分为三组,分别与实验室的菌株D(沪酿3.042)、C(黑曲霉属)和E(根霉属)进行分类比较其蛋白酶和糖化酶活力,实验结果表明8株霉菌表现出较高的酶活力,可考虑作为生产甜面酱的理想制曲菌种.     

不同类型丝状真菌发酵产酶性能比较及其混菌发酵性能研究

比较了实验室前期从福建红曲黄酒酿造用曲中分离及台湾生物资源研究及保存中心(BCRC)的不同丝状真菌菌株(黑曲霉AN19、黄曲霉AF20、米曲霉AO35、米根霉RO45、黑曲霉BCRC31494、黄曲霉BCRC31654、米曲霉BCRC30222和米根霉BCRC32229)的产酶性能,从中筛选出产液化酶、糖化酶和蛋白酶活力较高的4株菌株:黄曲霉AF20、米根霉RO45、黑曲霉BCRC31494和米曲霉BCRC30222。将此4株丝状真菌菌株分别进行单一和两两混合发酵糯米,研究其产酶及产糖性能。结果表明:接种纯种米根霉RO45到糯米培养基中,测得的液化酶活力和还原糖产量最高,然而整个发酵过程蛋白酶活力始终较低;米根霉RO45与米曲霉BCRC30222混合发酵,不仅保持较高的液化酶活力和还原糖产量,还能够显著提升发酵体系中的蛋白酶活力。本研究结果对于黄酒传统酿造工艺的改进和优良产酶菌株的筛选提供了重要的基础数据。     

湖南菌种站保藏根霉菌产糖化酶性能测评

对湖南菌种站长期保存的大批根霉菌种产糖化酶性能进行测评,有针对性地选择T43株根霉菌进行产糖化酶活性能力的筛选.结果表明,HNCC 6.197(台湾根霉)、HNCC 6.246(日本根霉)、HNCC 6.195(华根霉)产糖化酶活力最高,分别达1248 U/g、1214U/g、1158U/g.     

湘西原香醋主要糖化菌分离及双菌种制曲研究

湘西原香醋采用传统酿造工艺,有大量微生物参与糖化。试验从其醋醅中分离黑曲霉、米曲霉等主要糖化菌,并通过不同条件下黑曲霉与米曲霉双菌种制曲的糖化酶活力变化分析,探讨接种比例、曲料含水量、培养温度、培养时间等因素对制曲效果的影响。结果表明:接种比例为1∶1,制曲温度33℃,曲料含水量90%,制曲时间48h时糖化酶活力高达1849U/g,比自然制曲提高约74%。双菌种制曲既能缩短制曲时间、提高原料利用率,而且保留了传统酿造工艺特色。     

浙江玫瑰醋发花阶段醋醅微生物消长规律研究

为了比较准确地把握浙江玫瑰醋发花阶段醋醅微生物的消长规律,以杭州酿造食品有限公司正常的天然酿造缸为试验缸,跟踪发花过程取样,对大缸醋醅中不同空间位置的微生物消长情况进行动态分析,初步弄清了浙江玫瑰醋发花阶段不同层面上微生物数量的分布和变化规律。     

酒曲中优势霉菌和酵母菌的分离及特性研究

从河池某米酒酒曲中分离出2株霉菌F1、F2,1株酵母菌F3共3株优势酿酒菌种,经鉴定F1为根霉属和F2为毛霉属,F3为酿酒酵母。对3株优势菌种的特性进行检测,结果显示两株霉菌均可产糖化酶,其中F1糖化酶活力为422.6 U/m L,F2糖化酶活力为48.73 U/m L;三株菌均具有产酒精能力,其产酒精能力大小为F1>F2>F3。     

霉豆瓣中优势微生物蛋白酶活性测定

选择市售的2种霉豆瓣为研究对象,分离出其中的微生物,通过回接发酵实验,筛选出能发酵霉豆瓣的优势菌株M1、M2和M3。经鉴定M1为黑曲霉(Aspergillus niger)、M2为米曲霉(Aspergillus oryzae)、M3为雅致放射毛霉(Actinomucor elegant)。对优势菌株进行蛋白酶活力及氨基酸态氮含量测定。结果表明,米曲霉的中性蛋白酶和碱性蛋白酶活力最高,分别为632 U/g和416 U/g。黑曲霉产酸性蛋白酶活力及氨基酸态氮能力远高于米曲霉和毛霉,酸性蛋白酶高达872 U/g,氨基酸态氮含量高达0.997 5 g/100 g。而毛霉产的3种蛋白酶活力均在中间值,可起到一定的补充作用。     

多菌种发酵是提高酱油、食醋质量的重要途径

酿造酱油可采用2-3株曲霉菌复合制曲或分开制曲混合发酵，在发酵期添加鲁氏酵母、球拟酵母及少量乳酸菌，以提高酱油风味。酿造食酷在单一的黑曲霉(麸曲)中添加根霉、米曲霉或As3．350黑曲霉，中后期添加乳酸菌与酵母菌共酵，提高食醋中含氮量及增加不挥发酸的比例，并重视陈酿后熟阶段，改善食醋风味。提出应进一步研究传统大曲、麦曲、酱醪、醋醅，从中分离筛选出更多更好的有益菌种，并采用现代技术革新生产工艺，使酿造调味品生产高效、产品优质。     

清酒酒曲生产用最适霉菌的筛选

对最适宜制作清酒酒曲的霉菌进行了筛选。对米曲霉3.5232、米曲霉3.800、黑曲霉3.4309、黑曲霉3.1858、根霉3.866分别进行耐酒精试验、耐温试验、耐酸试验,初筛得到米曲霉3.5232、黑曲霉3.1858、根霉3.866三株菌株,分别制成酒曲,通过酒曲α-淀粉酶活力、蛋白酶活力和糖化酶活力的测定最终筛选出米曲霉3.5232是最适宜制作酒曲的霉菌菌株。     

太空酒曲中功能菌的生物酶活性研究

从太空酒曲中分离、选育出主要功能菌:根霉SKR_3、黑曲霉SKA_2、米曲霉SKO_3;与原生产中使用的曲药的主要功能菌——根霉SNR_1、黑曲霉SNA_4、米曲霉SNO_2的酶活性进行比较研究。结果表明:SKR_3的糖化酶、液化酶活性均比SNR_3高出两倍以上,SKR_3培养36hr后其糖化酶、液化酶活性达到SNR_1培养72hr后的两倍;SKA_2的糖化酶、液化酶活性比SNA_4的高出三倍,蛋白酶活性高出一至二倍,SKA_2培养48hr后糖化酶、液化酶活性达到SNA_1培养72hr的三倍;SKO_3与SNO_1的糖化酶、液化酶、蛋白酶活性基本无差异。     

太空酒曲中功能菌的生物酶活性研究

从太空酒曲中分离、选育出主要功能菌：根霉SKR3、黑曲霉SKA2、米曲霉SKO3；与原生产中使用的曲药的主要功能菌-根霉SNR1、黑曲霉SNA4、米曲霉SNO2的酶活性进行比较研究。结果表明：SKR3的糖化酶、液化酶活性均比SNR1高出两倍以上，SKR3培养36h后其糖化酶、液化酶活性达到SNR1培养72h后的两倍；SKA2的糖化酶、液化酶活性比SNA4的高出三倍，蛋白酶活性高出一至二倍，SKA2培养48h后糖化酶、液化酶活性达到SNA4培养72h的三倍；SKO3与SNO1的糖化酶、液化酶、蛋白酶活性基本无差异。     

Functionality of selected strains of moulds and yeasts from Vietnamese rice wine starters

The role of starch-degrading mycelial fungi, and the alcohol production and ethanol tolerance of the yeasts isolated from selected Vietnamese traditional rice wine starters were examined, and optimum conditions for these essential steps in rice wine fermentation were determined. Of pure isolates from Vietnamese rice wine starters, mould strains identified as Amylomyces rouxii, Amylomyces aff. rouxii, Rhizopus oligosporus and Rhizopus oryzae, were superior in starch degradation, glucose production and amyloglucosidase activity during the saccharification of purple glutinous rice. A. rouxii was able to produce up to 25%w/w glucose with an amyloglucosidase activity up to 0.6 Ug(-1) of fermented moulded mass. Five yeast isolates identified as Saccharomyces cerevisiae were selected for their superior alcohol productivity. They were able to deplete a relatively high initial percentage of glucose (20% w/v), forming 8.8% w/v ethanol. The ethanol tolerance of S. cerevisiae in challenge tests was 9-10% w/v, and 13.4% w/v as measured in fed-batch fermentations. Optimum conditions for the saccharification were: incubation for 2 d at 34 degrees C, of steamed rice inoculated with 5 log cfu g(-1); for the alcoholic fermentation 4 d at 28.3 degrees C, of saccharified rice liquid inoculated with 5.5 log cfu mL(-1).     

酱油多菌种制曲改善酶系组成的研究

通过对米曲霉3.042、黑曲霉3.350、根霉3.010进行混合制曲试验,以蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶为指标,研究不同比例、制曲温度、制曲时间对复合菌种酶活力的影响.结果表明,三菌种米曲霉3.042、黑曲霉3.350、根霉3.010的比例为3:2:0.5,制曲温度36℃,制曲时间48h,在此条件下,制曲酶系丰富,酶活力高...     

高大平房仓稻谷粮层霉菌量与优势霉菌的差异性研究

采用传统培养法对湖南与湖北两省粮库中的稻谷进行研究,对高大平房仓粮仓上中下三层的稻谷霉菌量及优势霉菌进行研究。研究结果表明:湖南省储藏一年稻谷与新入库稻谷中层霉菌数分别为6.4×10~3 CFU/g、1.3×10~3 CFU/g,相比上、下层,中层最多;湖北省储藏一年稻谷下层霉菌数为1.4×10~4 CFU/g,相比上、中层,下层最多,湖北省新入库稻谷上层霉菌数为1.4×10~4 CFU/g,相比中、下层,上层最多。通过传统的菌落培养及菌丝、孢子观察,初步判断上中下三层的优势霉菌,并结合分子生物学的方法对其ITS序列进行分析,通过PCR扩增,将扩增出来的基因序列,在GenBank进行BLAST,最终鉴定优势菌株为黄曲霉、白曲霉、聚多曲霉、内生真菌、黑曲霉。     

南通白蒲黄酒麦曲真菌群落结构研究

黄酒的主要产地是我国的上海、江苏、浙江等地区,南通白蒲黄酒是中国清爽型黄酒的典型代表,与上海和浙派黄酒在口味上具有明显的差异.麦曲作为黄酒发酵的粗酶制剂,是引起黄酒风味差异的主要原因之一.本实验运用传统分离培养方法,并运用ITS序列分析技术分析探讨了南通白蒲黄酒麦曲中的真菌群落结构,并与已报道的绍兴黄酒麦曲微生物群落结构进行了比较.经分离鉴定,南通白蒲黄酒麦曲中的主要丝状真菌为芽枝状枝孢霉、白曲霉、米曲霉、粒状青霉和产黄青霉,其含量分别为24％、25％、6％、18％和22％.与绍兴麦曲中的真菌种群(主要是伞枝犁头霉、米根霉、微小毛霉、米曲霉、烟曲霉和少量青霉)有较大差异.