保靖酱油双菌种制曲工艺研究

保靖酱油采用传统酿造工艺,酱醅中含有大量微生物.试验从酱醅中分离黑曲霉、米曲霉,并通过不同条件下黑曲霉与米曲霉混合制曲的蛋白酶活力变化分析.探索制曲温度、制曲时间、曲料水分及接种比例等因素对制曲效果的影响.结果表明,最佳制曲条件为:接种比例为1∶1,制曲温度32 ℃,曲料含水量80%,制曲时间30 h.双菌种混合制曲既缩短了制曲时间、提高原料利用率,同时保留了传统酿造工艺特色.     

河溪香醋混合制曲工艺的研究

从河溪香醋醋醅中分离黑曲霉、米曲霉等糖化菌，并通过不同条件下黑曲霉与米曲霉混合制曲的糖化酶活力变化分析，探讨了接种比例、曲料含水量、培养温度、培养时间等因素对制曲效果的影响。结果表明：接种比例为1：1，制曲温度33℃，曲料含水量90％，制曲时间48h时，糖化酶活力高达1849U／g，比自然制曲提高了约74％。     

永丰辣酱人工接种双菌种制曲工艺的优化研究

我国在酱油、豆酱和甜面酱酿造生产上使用多菌种提高产量和质量的研究已有报道,但尚未有多菌种发酵生产永丰辣酱的研究.在对传统永丰辣酱的自然发酵过程进行分析的基础上,考察了辣酱生产中的主要微生物米曲霉和黑曲霉的产酶特性,并通过正交实验对两种曲霉的制曲工艺进行优化.结果表明:米曲霉采用种曲接种量0.8%,曲室相对湿度85%,制曲温度28℃,制曲时间72h时,制得生产曲的蛋白酶活力较高;黑曲霉的最佳工艺为制曲时间48h,制曲温度30℃,种曲接种量0.8%,曲室相对湿度70%,在此条件下制得生产曲的糖化酶活力较高.同时,验证实验的结果符合工艺要求.     

甜面酱双菌种制曲工艺条件的研究

研究不同条件对黑曲霉、根霉混合制曲效果的影响,确定黑曲霉、根霉混合制曲的最适条件,以利于与米曲霉分别制曲后混合发酵,提高曲料糖化酶活力。结果显示黑曲霉、根霉混合制曲的最适条件为温度32℃,湿度90%,培养时间48 h,面粉麸皮质量比9∶1。此实验缩短了双菌种混合制曲的时间且提高了原料利用率,同时成品酱保持了甜面酱的传统风味。     

永丰辣酱人工接种制曲工艺研究

在对传统永丰辣酱的自然发酵过程进行分析的基础上,考察了辣酱生产中的主要微生物米曲霉和黑曲霉的产酶特性,并通过正交试验对两种曲霉的制曲工艺进行优化.结果表明:米曲霉采用种曲接种量0.8%,曲室相对湿度85%,制曲温度28 ℃,制曲时间72 h时,制得生产曲的蛋白酶活力较高;黑曲霉主要控制以下参数,制曲时间48 h,制曲温度30 ℃,种曲接种量0.8%,曲室相对湿度70%,制得生产曲的糖化酶活力较高.同时,验证试验的结果符合工艺要求.     

多菌种混合制备高效酱油曲条件研究

以红曲霉、黑曲霉、米曲霉为菌种,采用固态发酵法来制备高效酱油酿造曲,以成曲中蛋白酶活为指标,考察了单菌种制曲工艺和多菌种组合制曲工艺的影响因素如培养时间、培养温度、润水量和无机盐等对蛋白酶活力的影响,并优化了多菌种混合制曲的条件.实验结果表明,多菌种制曲所得曲块质量比单菌种制曲的质量好.当红曲霉、黑曲霉和米曲霉混合制曲时,所得的曲块中蛋白酶酶活为633.42U/g,此曲块制备的优化条件是:培养时间为72h,培养温度为32℃,原料加水量为120%,硫酸锰添加量为0.05%,硫酸锌添加量为0.3%.     

米渣酱油多菌种制曲工艺研究

本研究以红曲霉、米曲霉、黑曲霉为菌种，以米渣、麸皮为原料，进行混合制曲，通过对制曲过程中糖化酶和酸、中性蛋白酶活力的变化分析，确定了混合菌种发酵米渣的最佳菌种配比、接种量及制曲时间，得出：米渣接入红曲霉培养4d后，最佳接种量及菌种配比为5％米曲霉＋5％黑曲霉混合菌种，制曲时间为2d。并通过四因素三水平正交设计方法确定了最佳pH、初始水分含量、原料配比、温度等制曲条件，其结果是：温度为31℃；米渣：麸皮=6：4；初始水分含量为35％及pH为5，在此条件下，糖化酶为4212U／g干曲，酸、中性蛋白酶活力分别为2130U／g干曲及2521U／g干曲。     

酱油生产中应用米曲霉和黑曲霉混合制曲的探索

该文考察了米曲霉和黑曲霉在单独制曲及混合制曲条件下,成曲的中性蛋白酶、酸性蛋白酶、糖化酶及孢子数,探讨了酱油多菌种制曲的可行性.实验以豆粕、麸皮为原料,以AS3.042米曲霉、AS3.350黑曲霉为菌种,探讨了2种制曲方式及不同配比制曲效果的影响.结果表明,米、黑曲霉分开制曲比混合接种制曲所得成曲效果好,米、黑曲霉分别以33℃制曲42h、48h得成品曲,再以2∶1混合所得成曲可获得较佳的酶活力,曲料总蛋白酶活力2748U/g与对照值相当,而酸性蛋白酶及糖化酶活力分别达712U/g、1090U/g,较对照分别提高55.8％、25.4％.     

响应面法优化曲霉型豆豉的双菌种制曲工艺

为了提高豆豉成曲的蛋白酶活力,根据单因素试验结果,通过Box-Behnken响应面法优化豆豉双菌种制曲工艺。结果表明:在制曲温度29.9℃、制曲时间65.9h、接种量0.24%、米曲霉与黑曲霉菌种配比(质量比)1.40:1的条件下,中性蛋白酶酶活力为358.6U/g,酸性蛋白酶酶活力为105.5U/g,多项验证实验值在95%的置信区间内符合了预测值,说明双菌种制曲能有效提高豆豉成曲中的蛋白酶活力。     

双菌株在酱油制曲中的应用

研究以豆饼、麸皮为原料,利用米曲霉、黑曲霉双菌株进行酱油制曲,通过单因素实验和正交试验确定了酱油制曲工艺中最合适的培养条件。结果表明:选用米曲霉、黑曲霉种曲配比为6∶2,将双菌株以2%的接种量接入到曲料中,控制制曲温度32℃,制曲时间43h,得到的成曲蛋白酶酶活力高达2787U/g,得到的成曲菌丝丰满,曲味芳香。     

Aspergillus ficuum菊粉酶的分离纯化及其酶解菊粉制备低聚果糖

采用硫酸铵分级沉淀、透析脱盐、DEAE-Cellulose离子交换色谱等分离纯化技术，从Aspergillus ficuum菌株混合酶系中分离得到4种菊粉酶组分，应用薄层层析法分离各组分水解菊粉的产物，发现其中3种组分主要含外切菊粉酶，一种主要含有内切菊粉酶。进一步对所得到的内切菊粉酶组分酶解菊粉制备低聚果糖进行了研究，研究了底物浓度、加酶量、反应温度和反应pH对低聚果糖制备的影响，确定其最适反应条件为：底物浓度50g／L、加酶量10U／g底物，反应温度45℃，反应PH6．0。在此条件下反应72h，菊粉酶解率达74％，低聚果糖得率可达50％以上，酶解产物以DP2～DP4为主。     

Aspergillus ficuum菊粉酶的分离纯化与鉴定

Aspergillus ficuum菊粉酶系经硫酸铵分级沉淀、透析脱盐、DEAE-Cellulose离子交换色谱、Sepharose CL-6B凝胶过滤色谱和制备电泳技术分离纯化,获得五个电泳纯酶:三个外切菊粉酶组分Exo-I、Exo-II、Exo-III和两个内切菊粉酶组分Endo-I、Endo-II。SDS-PAGE分析测得五种酶的分子量分别为:Exo-I:69961Da,Exo-II:39973Da,Exo-III:45561Da,Endo-I:33574Da,Endo-II:30769Da。     

食品工业用菌的病原性研究

为研究食品工业用真菌的致病性 ,将不同浓度的米曲霉和黑曲霉孢子经小鼠尾静脉注射 ,观察 14d内动物出现的中毒症状、死亡和体重变化 ,实验终结时测定脑、肝、肾、脾中的生存菌数 ,同时作病理组织学检查。结果表明 ,2个菌种对小鼠造成的主要损害为肾脏化脓性病变 ,1× 10 5以上剂量组小鼠 2个以上脏器同时检出活菌。米曲霉 1× 10 5以上剂量组动物出现了中毒症状和死亡 ,黑曲霉实验组动物未见中毒和死亡。致病性随染孢子量的增加而加重 ,呈正剂量 -反应关系。本研究为完善我国食品工业用菌安全性评价体系提供了依据     

黑曲霉抗产毒黄曲霉作用的初步研究

采用90 × 2.6 × 1013N+/cm2 注入黑曲霉筛选能抗黄曲霉(Aflavus)生长的突变菌株,以利发酵中控制被黄曲霉污染的原材料的再污染。进行产毒黄曲霉与被离子注入的黑曲霉混合对峙、原黑曲霉菌株与黄曲霉单独培养生长及混合对峙培养实验。结果显示经离子注入的菌株及未注入菌株均对黄曲霉产生抑制作用,但后者仅有微弱抑制,前者不仅表现出几乎不能使黄曲霉生长,且已长出的黄曲霉菌丝体较瘦小,并呈灰白色。从培养基中提取物检验结果显示,黄曲霉组表现出有较明显的荧光反应,而黑曲霉菌株对峙培养物提取物中有微弱的荧光反应,其黑曲霉突变株对峙培养物未见荧光反应检出。这表明黑曲霉原菌株虽然能对黄曲霉只有微弱抑制,但表现出黄曲霉产毒和合成色素能力下降。与对照组相比,突变株有较强抑制黄曲霉生长能力。     

黑曲霉、米曲霉和解脂假丝酵母协同处理竹片

在相同发酵工艺条件下,探索黑曲霉、米曲霉、解脂假丝酵母、黑曲霉 米曲霉、黑曲霉 解脂假丝酵母、米曲霉 解脂假丝酵母、黑曲霉 米曲霉 解脂假丝酵母七组中的最优处理竹片茵种,然后确定其最佳发酵工艺,最后进一步研究接种量和接种比例的影响。研究结果表明,黑曲霉 米曲霉 解脂假丝酵母是最优处理竹片菌种,其最佳处理工艺为温度35℃,pH7.0,定时通氧,添加营养液,处理时间8d,接种量影响不大,接种比例以2:1:1(黑曲霉:米曲霉:解脂假丝酵母)为佳。     

微生物预处理竹片最佳工艺探讨

本文主要从一个新的角度——降解竹子中的抽出物（主要包括粗脂肪、淀粉和蛋白质）等组分，探索了黑曲霉、米曲霉、解脂假丝酵母、黑曲霉＋米曲霉、黑曲霉＋米曲霉＋解脂假丝酵母五组菌种处理竹片的最佳处理工艺（温度、pH值、通氧方式、处理时间、培养方式），其目的是提高药液的渗透率，减少后续化学药品的消耗量，降低能耗，减轻对环境污染，以符合保护生态环境战略目标，并且为后续提高浆料的可漂性、降低浆料的返黄值，改善纸浆的性能等打下基础。研究结果表明，五组菌种的处理工艺中的通氧方式、处理时间和培养方式基本相同，但是温度和pH值有所变化，并且黑曲霉＋米曲霉＋解脂假丝酵母的降解效果最好。     

酶联免疫吸附法快速检测储存粮食中的污染曲霉

以曲霉属特异性抗体为材料,运用酶联免疫吸附法对稻谷、小麦、玉米等几种储存粮食中 胞外多糖含量进行了检测,并和平板计数法的曲霉菌落数进行比较,结果表明,两者间有很好的线性相关性。因此酶联免疫吸附法可用于储存粮食中污染曲霉的快速检测。     

Ochratoxin A and the occurrence of ochratoxin A‐producing black aspergilli in stored peanut seeds from Córdoba,Argentina

Since there is no available information about the natural occurrence of ochratoxin‐producing fungi and ochratoxin A (OTA) in peanut seeds in Argentina, the aims of this work were to isolate and identify Aspergillus section Nigri and to evaluate the natural occurrence of OTA in stored peanut seeds. Likewise, the capacity to produce OTA by Aspergillus section Nigri was studied. Forty‐seven samples of peanut seeds were obtained from a storage plant in the south of Córdoba Province, Argentina. Each sample of 100 seeds was surface‐disinfected and plated onto a dichloran 18% glycerol agar (DG18). OTA was detected by HPLC. The production of OTA in strains belonging to section Nigri was tested in YES medium (2% yeast extract, 15% sucrose). Aspergillus spp., the most frequent mould, occurred in 100% of samples, followed by Penicillium spp. (87%) and Eurotium spp. (6.4%). A. flavus was isolated in 100% of the samples, followed by A. niger var. niger, A. niger var. awamori and A. carbonarius at a lower frequency, 89%, 68% and 4%, respectively. OTA was found in 32% of the peanut seed samples, with mean levels ranging from 0.5 to 170 ng g^?1. The mean recovery of the method used was 85 ± 2%. Forty‐three isolates (27%) of Aspergillus section Nigri, were found to be OTA producing strains. The highest percentage of ochratoxigenic strains (57%) was found within the A. carbonarius ssp. These results indicate a human exposure to OTA in Argentina through the ingestion of peanut seeds and peanut products. Copyright © 2006 Society of Chemical Industry     

Overexpression of Aspergillus aculeatus cellobiohydrolase I in Aspergillus oryzae

To express the cbhI gene, encoding Aspergillus aculeatus cellobiohydrolase I (CBHI), in Aspergillus oryzae, a plasmid was constructed. The strain that displayed the strongest CBHI activity among the transformants produced about 941 mg/l in liquid culture. It was confirmed by a PCR method that the plasmid was integrated at the niaD locus.