抗辐射菌Deinococcus radiodurans一种新的DNA修复基因pprA的分子克隆测序及特性研究(英文)

抗辐射菌Ｄｅｉｎｏｃｏｃｕｓｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ具有显著的ＤＮＡ修复能力，包括对丝裂霉素（ＭＣ），紫外线（ＵＶ）及γ射线。通过化学诱导野生型菌株ＫＤ８３０１而得到的突变体ＫＨ３１１１，对ＭＣ，ＵＶ及γ射线敏感，对链霉素（Ｓｍ）具有抗性。ＫＨ３１１１的辐射抗性能够通过转染野生型抗辐射菌ＫＤ８３０１基因组中一个已被克隆的ＤＮＡ片断而得到恢复。转染实验表明，突变体具有很好的自然转化能力，即不缺乏重组修复能力。本研究确定了ＫＨ３１１１内发生突变的基因及其核苷酸序列，该基因（ｏｒｆ１４４ｂ）所编码的蛋白质由２８４个氨基酸组成，与其它已知的蛋白质不具有同源性，即它是一种新的蛋白质。通过ＤＮＡ测序分析，ＫＤ８３０１和ＫＨ３１１１的ｏｒｆ１４４ｂ序列只是一个碱基的改变，即由Ｇ突变为Ａ，所编码的第１４９位氨基酸由甘氨酸变为谷氨酰胺。说明甘氨酸是ＤＮＡ修复基因ｏｒｆ１４４ｂ所编码的蛋白质中的一个重要残基。用ＫＤ８３０１的ｏｒｆ１４４ｂ基因转染ＫＨ３１１１，得到转染体ＫＨ３１１２，其对ＭＣ，ＵＶ及γ射线都具有同母本（ＫＤ８３０１）一样的抗性。在抗辐射菌中，这种对多种ＤＮＡ损伤剂产生抗性所需要的基因（ｏｒｆ１４４ｂ），我们命名为     

抗辐射菌Deinococcus radiodurans辐射抗性研究

观察了野生型抗辐射菌Ｄｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓ ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ ＫＤ８３０１及其修复缺陷突变体ＫＨ３１１１对γ射线的抗性程度,探讨了影响辐射抗性的有关因素。ＫＤ８０３１和ＫＨ３１１１经大剂量γ射线照射（０．５￣１０ｋＧｙ）,制作剂量、存活曲线;利用荧光分光光度法测定细菌的ＤＮＡ含量。结果表明,野生型的ＫＤ８０３１对射线具有显著抗性,推定的ＬＤ９０为９．５ｋＧｙ,而其突变体ＫＨ３１１１的抗性明显     

二株丝裂霉素敏感的抗辐射菌Deinococcus radioduran …

抗辐射菌Ｄｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓ ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ具有显著的ＤＮＡ损伤修复能力，包括对丝裂霉素（ＭＣ），紫外线（ＵＶ）及电离辐射等所致的损伤。在用对ＤＮＡ损伤因子具有抗性的野生型抗辐射菌ＫＤ８３０１的基因组ＤＮＡ构建的基因文库中，有四个克隆能够通过其ＤＮＡ转化，使二株对ＭＣ敏感的Ｄｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓ ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ的突变体ＫＤ２６２１和３０２１回复对ＭＣ的抗性。克隆了二株突变体中受突     

IDENTIFICATION OF uvrA GENE MUTATION SITES IN TWO MITOMYCIN-SENSITIVE Deinococcus radiodurans STRAINS

抗辐射菌Ｄｅｉｎｏｃｏｃｕｓｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ具有显著的ＤＮＡ损伤修复能力,包括对丝裂霉素（ＭＣ）,紫外线（ＵＶ）及电离辐射等所致的损伤。在用对ＤＮＡ损伤因子具有抗性的野生型抗辐射菌ＫＤ８３０１的基因组ＤＮＡ构建的基因文库中,有四个克隆能够通过其ＤＮＡ转化,使二株对ＭＣ敏感的Ｄｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ的突变体－２６２１和３０２１回复对ＭＣ的抗性。克隆了二株突变体中受突变（ｍｔｃＡ或ｍｔｃＢ）影响的基因,并测定了该基因的核苷酸序列。理论上推定抗辐射菌ｕｖｒＡ基因产物的氨基酸序列是由１０３６个氨基酸组成,与许多细菌的ＵｖｒＡ蛋白质具有同源性。用ＰＣＲ技术扩增二株突变体基因组中相应的ＤＮＡ片段,并对其加以测序分析,确定了突变发生的位点。对于突变体３０２１,其ｕｖｒＡ基因中发生了１４４个碱基对（ｂｐ）的缺失突变（缺失部分包括ｕｖｒＡ的起始密码）,造成了３０２１的ｕｖｒＡ基因的失活。对于２６２１突变体,其ｕｖｒＡ基因内却发生了一个插入突变,造成了该基因的插入失活。该插入序列由１３２２ｂｐ组成,侧面与１９ｂｐ组成的末端反转重复（ＩｎｖｅｒｔｅｄＴｅｒｍｉｎａｌＲｅｐｅａｔｓ,ＩＴＲ）相连接,并产生     

抗辐射菌Deinococcus radiodurans的DNA结合蛋白的检测及分析

抗辐射菌Ｄｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓ ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ是微小球菌属的一种,它对电离辐射、紫外线及其他的化学诱变剂所诱导的ＤＮＡ抽伤都具有极强的修复能力,故倍受放射生物学界的关注。本研究旨在检测抗辐射菌的ＤＮＡ结合蛋白（ＤＮＡ－Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉ,ＤＢＰ）,并有选择地对其氨基酸序列加以分析,以进一步研究ＤＢＰ在抗辐射菌的辐生中的作用和意义。主要研究方法：分离提取抗辐射菌染色体ＤＮＡ并用地高     

抗辐射菌Deinococcus radiodurans DNA修复基因的分子克隆和功能分析

抗辐射菌(Deinococcus radiodurans)具有显著的DNA修复能力,包括对丝裂霉素(MC),紫外线(UV)及γ射线引起的DNA损伤的修复。通过化学诱导野生型菌株KD8301而得到的突变体KH3111,对MC,UV及γ射线敏感,对链霉素(Sm)具有抗性。本研究     

以PCC技术分析染色体辐射损伤的修复

采用ＰＣＣ技术，观察ＣＨＬ（Ｃｈｉｎｅｓｅｈａｍｓｔｅｒｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｃｅｌｌｉｎｅ）细胞受＾６０Ｃｏγ射线照射后，染色体的损伤及修复动力学，结果表明，染色体损伤的修复分为两个时期，快修复在照射后的３０ｍｉｎ左右开始，半修复时间约为６ｈ，与ＦＡＤＵ（ＦｌｕｏｒｏｍｅｔｒｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆＤＮＡｎｕｗｉｎｄｉｎｇ）技术观察ＤＮＡ损伤修复动力学比较，ＤＮＡ损伤修复在照射后５ｍｉｎ内即已开始     

抗辐射菌lexA基因的克隆及在大肠杆菌中表达

研究了旨在克隆抗辐射菌Ｄｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓ ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ的ｌｅｘＡ基因并构建其表达载体,以便于进一步研究ｌｅｘＡ基因的功能及其在辐射抗性中的作用。主要的实验步骤包括分离提取抗辐射菌基因组ＤＮＡ,分离出ｌｅｘＡ基因并测定其序列,克隆于质粒载体ＰＵＣ１９,用电击穿孔法将重组的质粒导入在肠杆菌ＪＭ１０９,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测基因的表达。用定点突变技术,改变ｌｅｘＡ基因核糖体结合位点（ＲＢＳ）     

抗辐射菌Deinococcus radiodurans DNA修复基因的分子克隆和功能分析(英文)

抗辐射菌(Deinococcus radiodurans)具有显著的DNA修复能力,包括对丝裂霉素(MC),紫外线(UV)及γ射线引起的DNA损伤的修复。通过化学诱导野生型菌株KD8301而得到的突变体KH3111,对MC,UV及γ射线敏感,对链霉素(Sm)具有抗性。本研究确定了KH3111内发生突变的基因及其核苷酸序列,该基因(orf144b)所编码的蛋白质由284个氨基酸组成,与其它已知的蛋白质不具有同源性,即它是一种新的蛋白质。KD8301和KH3111的orf144b序列只是一个碱基的改变,即由G突变为A,所编码的第149位氨基酸由甘氨酸变为谷氨酸。说明甘氨酸是DNA修复基因orf144b所编码的蛋白质中的一个重要残基。用KD8301的orf144b基因转染KH3111,得到转染体KH3112,其对MC,UV及γ射线都具有同母本(KD8301)一样的抗性。在抗辐射菌中,这种对多种DNA损伤剂产生抗性所需要的基因(orf144b),我们命名为pprA(Pleiotropic gene promoting DNA repair)基因。该基因能在大肠杆菌JM109中高水平表达,并使宿主大肠杆菌产生对MC,UV和γ射线的抗性。在野生型的KD8301中,正常情况下该基因不表达,经MC,UV和γ射线处理KD8301后,可诱导该基因表达。研究表明,PprA蛋白质是一种胞浆蛋白。     

RADIONUCLIDES IN RICE IN HONG KONG

ＲＡＤＩＯＮＵＣＬＩＤＥＳ　ＩＮ　ＲＩＣＥ　ＩＮ　ＨＯＮＧ　ＫＯＮＧＫ．Ｎ．ＹｕａｎｄＳ．Ｙ．Ｍａｏ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈｙｓｉｃｓａｎｄＭａｔｅｒｉａｌｓＳｃｉｅｎｃｅ，ＣｉｔｙＰｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃｏｆＨｏｎｇＫｏｎｇ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：...     

RADIONUCLIDES IN NOODLES AND BREAD CONSUMED IN HONG KONG

ＲＡＤＩＯＮＵＣＬＩＤＥＳ　ＩＮ　ＮＯＯＤＬＥＳ　ＡＮＤ　ＢＲＥＡＤ　ＣＯＮＳＵＭＥＤ　ＩＮ　ＨＯＮＧ　ＫＯＮＧＫＮＹｕ（余君岳）ａｎｄＳＹＭａｏ（茅瑞恩）（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈｙｓｉｃｓａｎｄＭａｔｅｒｉａｌｓＳｃｉｅｎｃｅ，ＣｉｔｙＵｎｉ...     

γ射线后装设备获准投产

γ射线后装设备获准投产中国原子能科学研究院核技术应用所研制的ＨＧ－ＨＤＲ１８遥控自动驱动γ射线后装设备已通过了国家医药管理局的鉴定，获准投产。采用遥控自动驱动送源系统，将放射源准确送入病灶，使肿瘤得到有效治疗，而病人大大减少了不必要的受照剂量，又方便...     

抗辐射菌lexA基因对受γ射线照射和MMC作用的大肠杆菌敏感性的影响

研究抗辐射菌lexA基因在大肠杆菌细胞中的表达对其γ射线辐射抗性和丝裂霉素(MMC)敏感性的影响。应用电穿孔技术将携带有抗辐射菌lexA基因的重组质粒PZA172转入大肠杆菌JM109，其启动子为lacZ，用异丙基-硫代-β—D半乳糖苷(IPTG)诱导，(十二烷基磺酸纳)聚炳烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)凝胶电泳检测LexA蛋白的表达。经受不同剂量γ射线照射和不同浓度的MMC作用，平板菌落计数，绘制存活曲线。抗辐射菌lexA基因在大肠杆菌细胞中，经IPTG诱导能稳定地表达，lexA基因的显著表达降低了大肠杆菌经γ射线照射和MMC作用后的存活率。抗辐射菌lexA基因在大肠杆菌中的显著表达降低了大肠杆菌对γ射线和MMC的抗性，其作用机理还有待于进一步的研究。     

文献题录

ＨｅａｌｔｈＰｈｙｓｉｃｓ　Ｖｏｌ．７５Ｎｏ．３１９９８新网址介绍ＢＢｕｓｂｙ２６０名钚生产工作人员的死因ＢＧｏｌｄ等辐射致癌的阈模型ＤＧＨｏｅｌ等２３９Ｐｕ在小猎兔犬骨骼中的微分布ＥＰｏｌｉｇ等全球落下灰中３Ｈ所致日本人健康危险的估算ＲＮｉｓｈｉｍｕｒａ等用以估算Ｓａｖａｎｎａｈ河址大气中３Ｈ剂量的三参数模型ＤＭＨａｍｂｙ等受广岛原子弹中子照射的钢样品中残余６０Ｃｏ的活性ＫＳｈｉｚｕｍａ等高能医用加速器附近多球中子谱测量ＫＧＶｅｉｎｏｔ等日本室内氡浓度与陆地γ辐射所致空气中剂量率的相互关系ＫＦ…     

小剂量辐射诱导淋巴细胞DNA合成的适应性反应

通过＾３Ｈ－ＴｄＲ参入法研究了小剂量辐射诱导淋巴细胞ＤＮＡ合成的适应性反应。结果表明，体外培养２４ｈ的人外周血淋巴细胞经小剂量γ射线０．５－４．０ｃＧｙ照射后，均产生了适应性反庆，诱导适应性反主尖的最适剂量为１．０ｃＧｙ。Ｄ１和Ｄ２照射间隔为２４ｈ时，适应必应最强，随时间间隔延长，适应性反应明显减弱。１Ｇｙ－７Ｇｙ的Ｄ２照射，均可显现适应性反应，３．０Ｇｙ照射，反应表现最强，剂量过大，适应性反应不     

HPGeγ谱仪对体源的效率与源高度近似关系的验证

用γ谱仪分析环境样品时，常遇到样品量或样品盒高度与原刻度时的不一致，如能用事先确定的体源效率与源高度的关系对刻度系数作适当修正，则是一种实用、简便的近似方法。本实验室曾用实验方法对ＨＰＧｅγ谱仪（美国ＯＲＴＥＣ公司产品），对圆柱形体源的效率εｖ与体源高度Ｈｓ得到了一个拟合公式εｖ＝１／（ｃ１＋ｃ２Ｈｓ＋ｃ３Ｈｓ＾２）（Ｈｓ在１０￣７５ｍｍ）。本文介绍了用实际的土壤样品对该经验公式进行实验验证的方法     

微细胞介导染色体转移法提高AT5 BIVA细胞对电离辐射的抗性

ＡＴ５ＢＩＶＡ细胞是一株经ＳＶ４０病毒转化的ＡＴ病人皮肤成纤维细胞，对γ射线高度敏感。实验用ＦＤ３（含人第１１号染色体的人鼠杂种细胞）、ＦＤ８（不含人第１１号染色体的人鼠杂种细胞）、ＬＭ／ＴＫ鼠细胞）为洪体，通过微细胞介导染色体转移（ＭＭＣＴ）向ＨＴ５ＢＩＶＡ细胞导入人或鼠的完整染色体，经两次３Ｇｙγ射线照射筛选后，获得ＡＴ５ＢＩＶＡ与ＦＤ３微细胞融合的杂合细胞ＡＴ／ＦＤ３－１，对γ射线抗性有显著提高。而ＦＤ８或ＬＭ／ＴＫ的微细胞与ＡＴ５ＢＩＶＡ细胞的杂合细胞，对γ射线抗性未增加。枝型分析表明ＡＴ／ＦＤ３—１细胞中包含了来源于ＦＤ３细胞的人第１１，１４号染色体和数条鼠染色体。通过对照实验，排除了人１４号和鼠染色体提高ＡＴ／ＦＤ３－１细胞对γ射线抗性的可能性．确认人第１１号染色体与ＡＴ细胞对电离辐射敏感性相关，提示人第１１号染色体上可能存在决定细胞对γ射线抗性的相关基因。     

微细胞介导染色体转移法提高AT5BIVA细胞对电离辐…

ＡＴ５ＢＩＶＡ细胞是一株经ＳＶ４０病毒转化的ＡＴ病人皮肤成纤维细胞，对γ射线高度敏感。实验用ＦＤ３，ＦＤ８，ＬＭ／ＴＫ为供体，通过微细胞介导染色体转移向ＡＴ５ＢＩＶＡ细胞导入人或鼠的完整染色体，经两次３Ｇｙγ射线照射筛选后，获得ＡＴ５ＢＩＶＡ与ＦＤ３微细胞融合的杂合细胞ＡＴ／ＦＤ３－１，对－γ射线抗性有显著提高。     

γ射线所致哺乳动物细胞hprt基因突变分子机理的初步探讨

为研究电离辐射致突的分子机理，采用限制性片段长度多态性分析法（ＲＦＬＰｓ）观察γ射线诱导的ＣＨＯ－Ｋ１和ＨｅＬａＭＲ突变细胞ｈｐｒｔ基因结构的变化，并用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和狭缝杂交方法分析了ＣＨＯ－Ｋ１突变细胞ｈｐｒｔ基因的表达情况。实验结果提示：电离辐射引起ｈｐｒｔ基因结构损伤并进而导致ｍＲＮＡ转录的缺陷。     

γ射线诱导的肝癌细胞DNA双链断裂

为了揭示辐射生物学效应的机理,用倒转脉冲场凝胶电泳（ＰＩＧＥ）研究了γ射线辐照肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞诱导的ＤＮＡ双链断裂（ＤＳＢ）及其修复２４、４８ｈ后的产额和片段的分布情况。结果表明：修复０ｈ和２４ｈ的样品,ＤＮＡ片段释放百分比（ＰＲ）随着剂量的增加而增加;诱导的ＤＳＢ片段主要是１Ｍｂｐ－２Ｍｂｐ的大片段;ＤＳＢ产额分别为０．３８ＤＳＢｓ／１００Ｍｂｐ．Ｇｙ和０．０６ＤＳＢｓ／１００Ｍｂｐ．