微波辅助分步酶解菜籽粕制备菜籽多肽的研究

以脱脂菜籽粕为原料,利用微波辅助技术,对碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步酶解菜籽粕蛋白的工艺进行了研究。结果表明,在最适微波条件下(碱性蛋白酶的微波温度46℃,风味蛋白酶50℃,微波功率均为500 W),碱性蛋白酶加酶量9 000 U/g,酶解3 min,风味蛋白酶加酶量37.5 LAPU/g,酶解13 min,得到的酶解产物的水解度为50.94%,氮收率为96%,多肽得率34.45%,氮溶指数84.22%,三氯乙酸氮溶指数77.90%。凝胶柱层析法分析表明,酶解产物为大量相对分子质量在1 000 Da的短肽。     

基于响应面优化杏仁蛋白酶解工艺的研究

以新疆甜杏仁为原料,选用碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解杏仁蛋白,采用响应面优化双酶水解杏仁蛋白的工艺条件。结果表明,底物浓度2.5%,杏仁蛋白酶解的最佳工艺条件为:碱性蛋白酶添加量3 500 U,酶解时间3.5h;风味蛋白酶添加量2 000 U,酶解时间3.0 h。在此条件下,杏仁蛋白最大水解度为24.65%。     

双酶法制备马鹿茸降血糖肽工艺优化及其对α-葡萄糖苷酶的抑制效果

为探索制备马鹿茸降血糖肽的最佳工艺条件,以α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,从碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶中筛选出两种酶,根据其体外降血糖效果确定酶的作用顺序,再以水解度、α-葡萄糖苷酶抑制率和蛋白质回收率为指标进行单因素试验和正交试验,优化降血糖肽制备工艺条件。结果表明:碱性蛋白酶和风味蛋白酶比中性蛋白酶和胰蛋白酶更适合用于制备马鹿茸降血糖肽。采用碱性蛋白酶-风味蛋白酶顺序对马鹿茸进行水解,所得酶解产物的α-葡萄糖苷酶抑制率、蛋白质回收率和水解度较高,分别为21.11%、39.12%、19.88%。通过单因素试验和正交试验确定双酶酶解最佳工艺条件为先用碱性蛋白酶在p H 8.0、60℃、底物质量分数12%、加酶量5 000 U/g条件下酶解3 h,再用风味蛋白酶于p H 6.5、45℃、底物质量分数5%、加酶量6 000 U/g条件下酶解1 h。双酶分步水解终产物的α-葡萄糖苷酶抑制率受质量浓度的影响,当质量浓度为3 mg/m L时,α-葡萄糖苷酶抑制率可达94.09%,IC50值为1.82 mg/m L。碱性蛋白酶-风味蛋白酶双酶分步水解马鹿茸可获得高α-葡萄糖苷酶抑制率的降血糖肽。     

分步酶解牛血红蛋白制备血红素多肽

为制备低苦味血红素多肽产物,以牛血红蛋白为原料,在木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶的最适温度及p H下,通过L16(45)正交试验进行单酶酶解,筛选出分步酶解用酶,并采用L9(34)正交试验考察了分步酶解过程中底物质量分数、酶添加量比例、水解时间、水解时间比例等因素对水解度、苦味值、血红素含量等指标的影响。结果表明:分步酶解法酶解效果优于单酶酶解法;采用碱性蛋白酶和风味蛋白酶进行分步酶解,条件在底物质量分数6%,酶添加量比例5︰5,酶解时间10 h,酶解时间比例1︰1时可获得苦味值较低的富血红素多肽产物。     

二次旋转正交设计优化鹰嘴豆蛋白酶解工艺的研究

实验选用碱性蛋白酶(Alcalase)和风味蛋白酶(Flavourzyme)分步依次酶解鹰嘴豆蛋白,采用二次旋转正交组合实验设计对其酶解工艺进行优化。结果显示,在初始p H8.5,初始温度55℃,鹰嘴豆蛋白酶解的最佳工艺条件为:底物浓度1%,碱性蛋白酶的添加量为2000U/g,作用时间为2.5h,风味蛋白酶的添加量为4000U/g,作用时间为3h。在此条件下,其最大水解度可达29.17%。     

水解金枪鱼碎肉制备高F值寡肽

以金枪鱼碎肉为原料,采用双酶分步水解法制备高F值寡肽。通过Box-Behnken设计,确定最佳酶解条件。酶解液经活性炭静态吸附去除芳香族氨基酸,用Sephadex G-25葡聚糖凝胶层析测定高F值寡肽的分子质量分布。试验结果表明:胃蛋白酶为第1步水解用酶,酶解的最优工艺条件为酶用量650 U/g,料水比1∶7(g/m L),温度35.9℃;风味酶为第2步水解用酶,酶解的最优工艺条件为酶用量50 700 U/g,p H 6.51,温度51℃。酶解液吸附脱芳的最优条件为p H 3.0,活性炭用量1∶20(g/m L),温度35℃,时间3 h。脱芳后的酶解液经层析得到2个高F值寡肽组分,分子质量分布在600~1 300 u,F值分别为37.52,32.08。     

玉米蛋白环(组氨酸-脯氨酸)二肽前体的制备及其鉴定（英文）

以玉米蛋白为原料,制备活性环(组氨酸-脯氨酸)二肽(cyclo(His-Pro))前体——His-Pro和Pro-His二肽。分别采用碱性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶对提取的玉米γ-醇溶蛋白进行单酶和双酶分步水解,筛选出最佳酶解工艺。采用碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解的水解产物中cyclo(His-Pro)前体的含量比其他水解产物要高。采用响应面和L_(16)(4~5)正交试验对碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解γ-醇溶蛋白的工艺进行了优化,最佳水解条件为:底物质量浓度32 mg/m L,先加入12 100 U/g的碱性蛋白酶水解6.5 h,再加入17 000 U/g的风味蛋白酶于p H7.5、55℃条件下水解6 h。采用超高效液相色谱法和电喷雾质谱法对cyclo(His-Pro)前体进行定量和定性分析,结果表明水解产物中含有较高含量的脯氨酸-组氨酸二肽(6.88 mg/g)。     

超声预处理双酶分步水解制备滑菇抗氧化肽

研究超声预处理双酶分步水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,为滑菇蛋白高附加值产品的开发提供理论依据。以羟自由基(·OH)清除率为指标,单因素试验研究功率、温度、时间等超声预处理参数对碱性蛋白酶水解效果的影响。从中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶等4种酶中筛选第二步水解的最适酶,通过正交试验优化其水解工艺。结果表明,超声波预处理的最佳工艺参数为:功率300 W、温度40℃、时间20 min,碱性蛋白酶水解产物的·OH清除率最高,为86.15%。风味蛋白酶作为第二步水解的最适酶,各因素对·OH清除率的影响程度依次为:水解时间酶浓度p H温度,其最佳水解工艺条件为:酶浓度3 000 U/g、p H 7.0、温度55℃、水解时间1.5 h。在此条件下,水解产物·OH清除率为93.17%。超声波预处理双酶分步水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺可行。     

酶解鹰嘴豆制备α-葡萄糖苷酶抑制肽的工艺研究

以鹰嘴豆为原料,以其酶解产物对α-葡萄糖苷酶的抑制率和水解度为指标,比较中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶对鹰嘴豆的酶解效果,并进一步对碱性蛋白酶的酶解工艺参数进行响应面法优化。结果表明碱性蛋白酶的酶解效果最好,响应面法优化得到碱性蛋白酶酶解鹰嘴豆制备α-葡萄糖苷酶抑制肽的最佳工艺条件为:酶解时间5.1 h,酶解温度57℃,底物浓度5.2%,p H 10.0,加酶量4 000 U/g。在该工艺条件下,鹰嘴豆蛋白水解度为14.51%,酶解产物对α-葡萄糖苷酶的抑制率可达32.79%。     

乳清蛋白酶解条件的研究

研究了中性蛋白酶、胃蛋白酶、碱性蛋白酶、复合风味蛋白酶4种水解乳清蛋白的酶,以水解度作为测定指标,考察不同酶酶解温度、时间、p H值、加酶量对水解条件的影响。结果为:确定碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶,复配酶最佳酶解条件为:酶解温度55℃;酶解时间4 h;每千克蛋白质中加酶量为6 g;碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶的质量比为1∶2。     

微波辅助酶解棉籽粕的条件优化及酶解产物功能性质研究

研究了微波辅助碱性蛋白酶和风味蛋白酶双酶酶解棉籽粕的工艺条件.通过单因素实验确定了碱性蛋白酶酶解的最佳工艺条件为:微波温度60℃,微波功率500 W,酶加量5％(以底物质量计),酶解时间15 min;风味蛋白酶酶解的最佳工艺条件为:微波温度60℃,微波功率600W,酶加量5％(以底物质量计),酶解时间15 min.参照单因素优化条件,对棉籽粕进行连续酶解,酶解液多肽含量为13.32 mg/mL.棉籽粕经过微波连续双酶酶解后,吸油性、起泡性、乳化性等功能性质得到改善.     

响应面法优化虾壳促钙吸收肽的酶解工艺

采用酶法水解虾壳制备促钙吸收肽。通过单因素实验研究了pH、酶添加量、酶解时间、酶解温度和底物浓度对水解度和钙结合活性的影响。以钙结合量为主要指标,应用响应面分析法(RSM)进一步优化促钙吸收肽酶解工艺。结果表明:以碱性蛋白酶为试验用酶,最佳酶解条件为pH10.2,酶添加量4100 U/g,酶解时间5.5 h,酶解温度55℃,底物浓度10%。在此条件下水解度可达到16.33%±0.27%,钙结合量达(1.954±0.020) mg/mL。     

六种商品蛋白酶对鲢鱼蛋白水解效果比较研究

选用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、动物蛋白水解酶、风味蛋白酶对鲢鱼蛋白进行酶解,以水解度为评价指标筛选出各种蛋白酶的最佳水解工艺条件,通过水解度和水解液综合风味选出水解效果最佳的酶.结果表明:风味蛋白酶、动物蛋白水解酶和木瓜蛋白酶为水解效果较好的酶,其水解度和水解液综合风味评分分别为:风味蛋白酶16.97％和8.4,动物蛋白水解酶23.38％和7.0,木瓜蛋白酶26.34％和5.6;三种酶的最佳水解条件分别为:风味蛋白酶酶用量为0.7％(W ∶ W),温度55℃,pH值8.0,液固比5 ∶ 1(W∶ V),时间4 h;动物蛋白水解酶酶用量为0.7％(W∶ W),温度55℃,pH值8.0,液固比5∶ 1(W ∶ V),时间4 h;木瓜蛋白酶酶用量为0.7％(W ∶ W),温度55℃,pH值7.0,液固比5 ∶ 1(W ∶ V),时间4h.     

脱脂菜籽粕中蛋白质的分步酶水解研究

以脱脂菜籽粕为原料，对碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解其中的蛋白质进行了研究。结果表明，在碱性蛋白酶和风味蛋白酶的最适作用温度和起始pH值下，先用3000U／g碱性蛋白酶水解4h后，再用3000U／g的风味蛋白酶水解4h，水解产物的水解度和氮收率分别为10％和91．14％。水解产物的口味平淡，三氯乙酸氮溶解指数为90．18％。     

双齿围沙蚕多肽的制备及其抗肺癌A549细胞活性

探讨双齿围沙蚕酶解多肽制备的关键技术及其对肺癌A549细胞的作用。以增殖抑制率为指标,确定最佳酶种并根据单因素试验和正交试验确定其最佳酶解工艺。经超滤获得1~3 ku的酶解液,通过阴离子色谱、凝胶过滤色谱和制备色谱对其进行进一步的分离纯化。采用四甲基偶氮唑蓝法测定沙蚕多肽PAP对肺癌A549细胞的增殖抑制率并通过倒置显微镜、吖啶橙/溴化乙锭荧光染色及Hoechst荧光染色观察其细胞形态的变化。实验结果表明最佳酶种是碱性蛋白酶,其最佳酶解条件为:酶解温度50℃、pH 11、料液比1∶1(g/mL)、酶解时间6 h、加酶量300 U/g。经纯化获得的多肽命名为PAP,其氨基酸序列为Ile-Glu-Pro-Gly-Thr-Val-Gly-Met-Met-Phe,且PAP对A549细胞的作用呈时间与剂量依赖关系,作用后细胞出现了凋亡的形态学特征。因此,PAP能明显抑制肺癌细胞A549增殖,可以诱导其发生凋亡而发挥抗肿瘤作用。     

利用牡蛎制备ACE抑制肽的工艺优化

运用正交试验和响应面法优化牡蛎血管紧张素转换酶(angiotensin-Ⅰconverting enzyme,ACE)抑制肽的分步酶解制备工艺。采用复合蛋白酶和碱性蛋白酶对牡蛎进行分步酶解,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析和ACE抑制率为考核指标优化工艺参数。结果表明,第1步复合蛋白酶最佳工艺参数为:料液比1∶4、加酶量1.2%、pH 7.0、反应温度50℃、酶解时间1 h;第2步碱性蛋白酶最佳工艺参数为:加酶量0.42%、pH 8.3、反应温度53℃、酶解时间73 min。凝胶过滤色谱法测得牡蛎酶解液分子质量在3 000 D以下小肽所占比例为99.72%,其ACE抑制活性IC50为0.8 mg/mL。同时,氨基酸组成分析表明,牡蛎肽中Glu含量最高,Cys含量最低;必需氨基酸和疏水性氨基酸含量分别占总氨基酸的36.6%和37.2%。本研究制备的低分子质量、高ACE抑制活性牡蛎肽,可为牡蛎资源的开发利用提供理论参考。     

利用碱性蛋白酶改性麦芽蛋白功能特性的研究

利用碱性蛋白酶对麦芽蛋白进行酶法改性。通过对水解度(DH)的控制,来改善麦芽蛋白的某些功能特性。系统考察了酶量、pH值、酶解时间和酶解温度对功能特性的影响。通过单因素试验和正交试验,确定了最佳工艺条件：pH10、酶解时间15min、加酶量4000U/g。改性后麦芽蛋白的起泡性、溶解性和乳化性均有大幅提高,分别达到167%、22.68%和13.8%,比未改性前的麦芽蛋白分别提高了7.35倍、2.47倍和0.28倍。     

基于超声预处理的脱脂玉米胚芽ACE抑制肽的制备

为了研究超声辅助酶解制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的较优工艺,通过三种超声设备对脱脂玉米胚芽预处理,碱性蛋白酶酶解,酶解液体外模拟胃肠消化,以消化液ACE抑制率和酶解过程中玉米胚芽水解度(DH)为指标对超声预处理和酶解的参数进行单因素逐级优化。实验结果表明,最佳超声工作模式为20~40 kHz聚能式逆流双频交替超声模式;超声工作参数为功率密度120 W/L,超声预处理时间15 min,初始温度30℃,物料浓度5%;酶解条件为加酶量3000 U/g,酶解时间30 min,pH9.0,酶解温度50℃。在此条件下,酶解液的IC₅₀为4.166 mg/mL,比对照组降低了5.08%;胃肠消化液的IC₅₀为3.986 mg/mL,比对照降低了4.44%。制备的酶解产物,经模拟胃肠消化后具有较强的ACE抑制活性。优化获得的制备脱脂玉米胚芽ACE抑制肽的工艺是可行的。     

酶解丝素蛋白制备ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽的研究

探讨利用碱性蛋白酶酶解丝素蛋白制备ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽的工艺条件。以丝素肽对ɑ-葡萄糖苷酶的体外抑制活性和水解度(DH)为主要评价指标,通过正交试验优化了ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽的工艺条件。结果表明,在最佳工艺条件为温度60℃、反应pH8.5、底物质量浓度5%、加酶量为1200 U/g、反应时间100 min下测得丝素肽对ɑ-葡萄糖苷酶具有较高抑制率,为44.90%,此时DH为16.80%。其抑制活性与浓度有较大的依赖关系,而作用时间控制在40 min即可。此外,通过对丝素蛋白肽蔗糖和葡萄糖含量的检测,结果表明,尽管丝素肽中含有微量的葡萄糖,但抑制干扰作用甚微。     

双酶法制备银杏抗氧化肽工艺研究

为获得制备银杏抗氧化肽的最佳工艺,采用2709碱性蛋白酶和胃蛋白酶分步水解银杏种仁蛋白,以总还原能力为指标,考察酶用量、酶解温度、pH值和酶解时间这4个因素对银杏种仁蛋白酶解效果的影响。通过响应面试验得出2709碱性蛋白酶的最佳酶解工艺为：酶用量为6976U/g、酶解温度为55℃、pH值为8.9、酶解时间为5h,此时银杏种仁蛋白酶解液的总还原能力(A700nm)为1.278;通过正交试验,得到胃蛋白酶的最佳酶解工艺为：酶用量为9000U/g、pH值为3.0、酶解温度为50℃、酶解时间为2h,此时银杏种仁蛋白酶解液的A700nm为1.636。