高效液相色谱法测定酵母浸粉中维生素B_6的含量

建立了高效液相色谱法测定酵母浸粉中维生素B6含量的方法。色谱条件为Symmetry-C18柱(3.9 mm×150mm,5μm);流动相:A相为甲醇,B相为含0.05 g/L的EDTA和1.1 g/L的庚烷磺酸钠的2.5%的乙酸溶液(p H 3.40),以V(A)∶V(B)为1∶6比例等度洗脱;流速为0.8 m L/min;柱温为30℃;检测波长为280 nm;样品分析时间为10 min。结果表明:维生素B6的线性范围为0.10~100.00μg/m L(r=0.999 9)。该方法检出限位16.0μg/100 g,定量限为50.0μg/100 g。日间和日内精密度均小于15%,低、中、高三种浓度下酵母浸粉样品中维生素B6的提取回收率分别平均为93.16%±2.00%、96.70%±2.08%、93.76%±1.79%(n=4)。此法操作简便、快速、准确,可作为酵母浸粉中维生素B6含量的检测方法。     

RP-HPLC同时测定保健食品中维生素D_2和D_3的含量

建立反向高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定保健食品中维生素D_2和D_3的检验方法。片剂和硬胶囊剂采用超声提取,软胶囊采用皂化提取制备,Zorbak ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm×5μm),以甲醇-乙腈(9∶1,V/V)为等度流动相,检测波长为264 nm,流速为1.0 m L/min,柱温35℃。结果表明,维生素D_2在0.07~7.14μg/m L质量浓度范围、维生素D_3在0.08~8.62μg/m L质量浓度范围内呈线性关系(r=0.999 5),维生素D_2和维生素D_3的回收率分别为83.49%~98.56%和83.71%~98.43%,定量限为0.45μg/100 g。经方法学验证符合相关标准。该方法简便快捷,准确度高,能满足含维生素D类保健食品的含量测定要求。     

高效液相色谱法测定乳粉中维生素K_1的改进

建立了固相萃取-高效液相色谱法分析乳品中维生素K1的方法。样品经磷酸盐缓冲液和脂肪酶酶解,正己烷提取和三氧化二铝柱纯化后,以正己烷定容,以Eclipse XDB C8色谱柱(配柱后锌粉衍生柱)分析,溶解了10 mmol氯化锌、5 mmol乙酸钠和5 mmol冰醋酸的甲醇为流动相,在0.8 m L/min的流速下,激发波长243 nm,发射波长:430 nm检测。维生素K1的加标回收率为86.4%~92.6%,变异系数为1.3%~2.4%,线性范围为0.05~10.0μg/m L,相关系数为0.9994,方法的检出限为10μg/kg。该方法线性范围广,灵敏度高,净化效果好,可满足实际样品分析的需求。     

2种液相色谱法测定保健品软胶囊中的维生素K2

目的建立正相和反相液相色谱法测定保健品种维生素K_2的含量的分析方法。方法正相法采用硅胶正相色谱柱,流动相为乙酸乙酯:正己烷(0.5:99.5, V:V);流速为1.8 mL/min;反相法采用C18反相色谱柱,流动相为甲醇;流速为1.0 mL/min。紫外检测波长均为270 nm。结果 2种方法维生素K_2浓度在5～100μg/g的范围内线性关系良好,回归系数均大于0.999。维生素K2在5.00、25.00和50.00μg/g添加水平的回收率为93.20%～99.28%,相对标准偏差小于1.8%(n=5)。正相法和反相法的检出限均为5μg/g。结论 2种方法均具备操作过程简单、回收率较高的特点,但反相色谱法具有更好的检测稳定性,更适合保健品软胶囊中维生素K2的分析检测。     

高效液相色谱法测定饮料中B族维生素

建立高效液相色谱测定饮料中B族维生素含量的方法。采用直接或者稀释后0.22μm孔径滤膜过滤直接上样,使用Phenomenex C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,采用水、乙腈、甲醇三相梯度洗脱,紫外检测波长为266 nm。结果显示,5种B族维生素在1μg/m L~100μg/m L范围内线性关系良好(R~2=0.997 5~0.999 4),平均加样回收率为95.75%~102.38%,平均相对标准偏差(RSD)为1.39%~2.92%。该方法简便、快速、准确、灵敏,可用于饮料中B族维生素含量的测定。     

超高效合相色谱法同时测定米酒中4种脂溶性维生素方法的研究

为检测米酒中微量维生素(维生素A、维生素B1、维生素C、维生素K),建立了一种利用超高效合相色谱串接二极管阵列检测器的检测方法。样品经过正己烷萃取前处理后,以BEH C18色谱柱为分离柱,CO2和甲醇为流动相进行梯度洗脱,经超高效合相色谱(UPC2)分离,采用二极管阵列检测器进行检测。4种维生素线性范围在5~25μg/m L内,拟合所得线性相关系数均大于0.999。在3个加标水平下,得到样品平均回收率为97.1%~111.3%,相对标准偏差(RSD)均控制在5%以内。该方法简单快捷、准确可靠,可用于米酒中4种脂溶性维生素的同时检测。     

高效液相色谱-柱后衍生法测定保健品中维生素B_1的含量

文章建立了测定保健品中维生素B_1含量的高效液相色谱-柱后衍生法。方法采用色谱柱:Ultimate XB-C18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:(0.01%辛烷磺酸钠+1.5%乙酸+5%甲醇+0.12%三乙胺)-甲醇(65∶35);流速:1.0 mL/min;柱温:35℃;检测波长:Ex=375nm,Em=435nm。研究发现该柱后衍生法测定同一样品中维生素B_1含量得到的峰面积是柱前衍生法测定结果的1.6-18.8倍,维生素B_1含量在0.01-32μg/mL范围内线性良好,R2=0.999,检出限为1 ng/mL。该方法灵敏、简便、准确,重现性好,可用于保健品中维生素B_1含量的测定。     

超高效液相色谱-大体积流通池荧光法检测配方乳粉中维生素A及维生素E

文章建立了超高效液相色谱-大体积流通池荧光检测器同时测定配方乳粉中维生素A和维生素E的方法。样品经碱溶液皂化、石油醚萃取、水洗、旋蒸、定容后，采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.8μm)分离，以甲醇-水(V_甲醇:V_水=95∶5)为流动相洗脱，大体积流通池荧光检测器检测。结果表明，维生素A在0.2～10μg/m L、维生素E在2～100μg/m L内线性良好(r>0.999)，检出限分别为0.6μg/100 g、0.8μg/100 g。荧光法受干扰小，测定维生素E的灵敏度是紫外法的30倍。配方乳粉3个浓度水平的加标回收率为85.2%～103.4%，相对标准偏差(n=6)为2.5%～5.6%。该方法具有重复性好、专属性强、灵敏度高、结果准确等优点，适合于批量检测配方乳粉中脂溶性维生素含量。     

液相色谱-质谱联用法同时测定保健食品中维生素D3和维生素K1的含量

目的 建立液质串联法同时测定维生素D3和维生素K1的含量。方法 样品经过前处理, 5mmol/L甲酸铵甲醇为流动相, 等度洗脱, 经C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,2.6 μm）分离, 并于相应条件下进行检测。结果 维生素D3在浓度0.05461~0.5461μg/mL之间呈现良好的线性关系, r=0.9990, 平均回收率为92.15%~98.99%, 相对标准偏差为2.4%;维生素K1在浓度0.1337~1.3370 μg/mL之间呈现良好的线性关系, r=0.9990, 平均回收率在94.15%~101.01%之间, 相对标准偏差为2.2%。结论 该方法能同时测定维生素D3和维生素K1含量, 耗时短、操作简便、准确、重现性好,可在实验室推广。     

高效液相色谱-荧光检测法测定食品中维生素K_2的含量

建立了高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)同时快速分离检测猪肉、猪肝、纯牛奶、酸奶、黄油、鸡蛋、豆豉、纳豆8种食品中2种维生素K_2的方法。样品经酶解、皂化、萃取、氮吹复溶处理后,用Agilent ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离,柱后锌粉还原柱(35 mm×4.6 mm)衍生,以甲醇(含有二氯甲烷10%、冰醋酸0.03%、氯化锌1.5 g/L、无水乙酸钠0.5 g/L)为流动相,进入荧光检测器进行检测。结果表明,四烯甲萘醌(Menatetrenone4,MK-4)、七烯甲萘醌(Menatetrenone7,MK-7)在15 min内分离出峰。2种维生素K_2在各自的线性范围内关系良好,相关系数r=1.0000。当取样量为2 g,定容2 mL时,MK-4的检出限为0.01μg/100 g,定量限为0.04μg/100 g;MK-7的检出限为0.06μg/100 g,定量限为0.2μg/100 g。当取样量为10 g,定容2 mL时,MK-4的检出限为0.002μg/100 g,定量限为0.008μg/100 g;MK-7的检出限为0.012μg/100 g,定量限为0.04μg/100 g。精密度(RSD)均不超过3.56%,回收率为80.6%～95.5%。8种食品中,猪肉、纯牛奶、酸奶、黄油、鸡蛋中仅含有MK-4,其中纯牛奶中含量最低,仅为(0.34±0.02)μg/100 g,鸡蛋中含量最高,达(25.38±0.85)μg/100 g。猪肝、豆豉、纳豆中仅含MK-7,其中猪肝含量较低,为(25.45±0.83)μg/100 g,纳豆中含量最为丰富,高达(923.20±11.45)μg/100 g。该法准确、可靠、高效,可用于食品中维生素K_2的高通量检测。     

甲醇超声提取法测定保健食品中维生素A

目的 采用甲醇超声方法提取保健食品中的维生素A。用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)法进行含量测定, 并与GB/T 5009.82-2016进行比较, 同时进行方法学验证。方法 样品前处理方法为甲醇超声提取法。采用C18(4.6 mm×250 mm, 5 μm)色谱柱, 甲醇为流动相, 检测波长为325 nm, 流速为1 mL/min, 柱温为30 ℃, 进样量为20 μL。结果 超声时间为5~15 min提取效率最高, 工作曲线在1.00~10.00 μg/mL范围内线性关系良好, 相关系数为0.9998, 相对标准偏差为1.82% (n=6), 平均回收率为101.09%, 方法检出限为10 μg/100 g, 定量限为31 μg/100 g。结论 和国标法相比, 本方法操作简单、准确度高, 适用于保健食品中维生素A含量的测定。     

高效液相色谱-荧光检测法测定保健食品中维生素K2的含量

目的建立高效液相色谱-荧光检测法快速检测保健食品中维生素K_2(四烯甲萘醌)的分析方法。方法样品使用GIST C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,柱后经锌粉还原柱(4.6 mm×50 mm,50～70μm)衍生,以甲醇(含有四氢呋喃10%、冰醋酸0.03%、氯化锌1.5 g/L、无水乙酸钠0.5 g/L)为流动相,流速为1.0 mL/min,进入荧光检测器进行检测。结果四烯甲萘醌保留时间约为10 min,在浓度0.1099～2.197μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r~2=0.9999。重复性实验RSD为0.794%,3个浓度级别的加标回收率在97.1%～101.9%之间。当取样量为1.5 g,总定容体积为500mL时,四烯甲萘醌的检出限为71μg/100 g,定量限为236μg/100 g。结论该方法准确性高、重现性好、操作简单,可用于保健食品中维生素K_2的含量测定。     

高效液相色谱-多波长荧光检测法同时检测多维生素片中维生素A和维生素E的含量

目的建立高效液相色谱-多波长荧光法同时快速检测多维生素保健品中维生素A和维生素E的含量方法。方法采用WATERS SUNFIRE-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱进行分离,甲醇与水梯度洗脱,控制柱温30℃,荧光检测器定量检测。结果维生素A和维生素E在质量浓度为0.3～30μg/ml范围内线性关系良好(R20.995);检测限:维生素A为0.08μg/ml、维生素E为0.10μg/ml;维生素A和维生素E 3个浓度点回收率均在91.4%～104.2%;维生素A和维生素E方法重复性(n=6)分别为2.32%和3.11%。结论此法简单、可靠、准确,可用于多维生素保健品中维生素A和维生素E含量的测定。     

高效液相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中的维生素B1、维生素B2

目的建立高效液相色谱法快速测定婴幼儿配方乳粉中的维生素B1、B2的含量。方法样品进行前处理后,采用Waters Xbridge C18色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5μm)进行分离。以0.05 mol/L乙酸钠溶液-甲醇为流动相等度洗脱,柱温为30℃,流速为1 mL/min,荧光检测器进行检测,外标法定量。结果在优化的实验条件下,维生素B1、维生素B2可以有效分离,线性范围为0.05～1.00μg/mL,相关系数均大于0.999。维生素B1的加标回收率为87.4%～99.1%,相对标准偏差为1.2%～3.06%,检出限为0.03 mg/100 g;维生素B2的加标回收率为90.6%～97.8%,相对标准偏差为0.97%～3.44%,检出限为0.02 mg/100 g。结论此方法简单、快捷、高效,适用于婴幼儿配方乳粉中维生素B1、维生素B2的测定。     

固相萃取-高效液相色谱法测定婴幼儿配方粉中维生素A和维生素E的含量

目的建立固相萃取-高效液相色谱法同时测定婴幼儿配方粉中维生素A和维生素E的含量。方法样品经高温皂化反应后,将皂化液通过EXtrelut NT20固相萃取柱,对目标待测物进行净化,洗脱液经氮气吹干复溶后,过滤膜直接进样,以甲醇作为流动相,通过Zorbax C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)分离,外标法定量。结果维生素A标准溶液在0.5~5.0 mg/L范围内,维生素E标准溶液在5.0~50 mg/L范围内均呈现良好的线性关系,相关系数(r~2)均≥0.999;样品3个水平加标回收率分别为86.0%~104.6%和89.0%~104.0%,相对标准偏差(RSD)均3.0%;检出限分别为1.0和10μg/100 g。结论该方法可用于婴幼儿配方粉中维生素A和维生素E的同时检测,操作简单、快速、准确。     

反相高效液相色谱法测定维生素K2中 七烯甲萘醌的含量

目的建立维生素K2产品中七烯甲萘醌(MK-7)的反相高效液相色谱定量检测的方法。方法采用Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为50%甲醇/水(含0.1%乙酸)(95:5=V:V),50%异丙烷。流速为等速1.0 m L/min,检测波长270 nm,柱温40℃。结果 MK-7在浓度0.355~2.132 mg/m L的范围内具有良好的线性关系,相关系数在0.9999以上。重复性实验中相对标准偏差为0.41%,加标回收率为98.15%。结论此方法准确性高、重现性好、操作简单,可用于维生素K2中MK-7含量测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定竹笋中百草枯的残留

目的运用超高效液相色谱-串联质谱联用技术,建立竹笋中百草枯残留的检测方法。方法样品用甲醇-0.1 mol/L盐酸溶液(1∶1,V/V)提取后,经Oasis WCX固相萃取柱(60 mg/3 ml)净化,采用UPLC BEH HILIC色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,正离子多反应监测模式监测,外标法定量。结果百草枯在10~500μg/L范围内具有良好线性关系,相关系数为0.998 2,检出限为2μg/kg,定量限为5μg/kg。进行5、50和200μg/kg三个浓度的样品加标试验,回收率为82.2%~104.8%,相对标准偏差为8.3%~10.9%。结论该方法简便、灵敏、准确,适合于竹笋中百草枯的检测。     

酶联免疫法检测婴幼儿配方奶粉中的维生素B_(12)

建立酶联免疫法检测婴幼儿配方奶粉中维生素B_(12)的分析方法,该方法线性相关系数大于0.996,范围在3~243μg/kg。奶粉样本经60%甲醇-水提取,再做1︰4稀释,通过酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定样本中维生素B_(12)。加标浓度为20μg/kg,奶粉中维生素B_(12)的回收率在95%~118%;加标浓度0,3,6,20和50μg/kg,样本的加标回收率在87%~102%;方法检出限为3μg/kg;与高效液相色谱法检测结果的相对标准偏差小于10%。方法操作简便,准确度和灵敏度高,可适用于婴幼儿配方奶粉中维生素B_(12)的检测。     

二维液相色谱同时测定婴幼儿配方乳粉中多种脂溶性维生素

建立二维液相色谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中维生素A、维生素E、维生素D_2、维生素D_3及β-胡萝卜素含量的方法。样品经皂化后以石油醚提取,经旋转蒸发浓缩后以乙腈/甲醇/四氢呋喃(75∶25∶5,体积比)定容,以二维液相色谱同时分析维生素A、维生素E、维生素D_2、维生素D_3及β-胡萝卜素,以InfinityLab Poroshell 120 EC-C8(3.0 mm×150 mm,2.7μm)为一维色谱柱,流动相乙腈/甲醇/四氢呋喃(75∶25∶5,体积比)-水/四氢呋喃(95/5,体积比)0.6 mL/min梯度洗脱,以Zorbax Eclipse PAH(4.6 mm×250 mm,5μm)为二维色谱柱,流动相甲醇0.3 mL/min,柱温25℃,一维DAD检测器采用波长切换方式检测(VA∶325 nm;VE∶294 nm;β-胡萝卜素:450 nm),二维DAD检测器检测((维生素D_2与维生素D_3∶264 nm)。)。结果维生素A在0.0945μg/mL～14.17μg/mL浓度范围内线性关系良好,维生素E在1.21μg/mL～181.5μg/mL浓度范围内线性关系良好,β-胡萝卜素在0.0163μg/mL～2.445μg/mL浓度范围内线性关系良好,维生素D_3在0.0163μg/mL～2.445μg/mL浓度范围内线性关系良好,维生素D_3在0.0150μg/mL～2.500μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数r大于0.999。分析时间为25 min。本方法可快速准确测定婴幼儿配方乳粉维生素A、维生素E、维生素D_2、维生素D_3及β-胡萝卜素。     

微波萃取-反相高效液相色谱法测定钙片中维生素D3的含量

目的建立微波萃取-反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定钙片中维生素D3含量的分析方法。方法以甲醇为萃取溶剂,微波萃取保健食品中的维生素D3。甲醇为流动相,检测波长264 nm,流速1 ml/min,经C18反相高效液相色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)分离分析,测定钙片中维生素D3的含量。结果采用本方法的线性范围为0~4μg/L(r=0.999 8),检出限为0.02μg/L,回收率为98.8%~100.0%,RSD为0.4%(n=9)。结论本文建立的方法具有操作简单、快速,准确度高,稳定性好等优点,适用于实验室测定钙片中维生素D3的含量。