红细胞吸附释放法纯化新城疫病毒

制备50％的醛化红细胞，将新城疫病毒（NDV）感染的鸡胚尿囊液采用醛化红细胞吸附释放法进行纯化，然后分别对纯化的病毒液及弃去的上清进行血凝检测，并与差速离心法进行比较，结果表明：使用50％的醛化红细胞基本能将病毒全部吸附，SDS-PAGE电泳显示其纯度较高，因此醛化红细胞吸附释放法是一种经济实用、操作简便，并有较高纯化效率的方法．     

红细胞吸附释放法纯化新城疫病毒

制备50%的醛化红细胞,将新城疫病毒(NDV)感染的鸡胚尿囊液采用醛化红细胞吸附释放法进行纯化,然后分别对纯化的病毒液及弃去的上清进行血凝检测,并与差速离心法进行比较,结果表明:使用50%的醛化红细胞基本能将病毒全部吸附,SDS-PAGE电泳显示其纯度较高,因此醛化红细胞吸附释放法是一种经济实用、操作简便,并有较高纯化效率的方法.     

水酶法提取麦胚水解蛋白的纯化及功能特性研究

水酶法提取的麦胚水解蛋白由于含有大量可溶性糖致使纯度不高,采用3种疏水性大孔吸附树脂对其进行纯化,结果表明:当水解液pH为4时,DA201-C型大孔吸附树脂对麦胚蛋白的吸附量最高,体积分数为55%的乙醇可以解吸80%以上的吸附蛋白.经纯化后,麦胚水解蛋白产品中可溶性总糖含量由33.72%降至10.95%,蛋白质含量由43.82%增加到76.64%.和碱提酸沉法提取的麦胚蛋白以及商品大豆分离蛋白相比,水酶法提取的麦胚水解蛋白溶解性、乳化性和吸油性更好,但起泡性、起泡稳定性和乳化稳定性降低.     

荧光RT-PCR与常规RT-PCR检测禽流感病毒比较研究

采用目前公认的2种敏感特异的检测方法———荧光RT-PCR和常规RT-PCR———检测标准毒株禽流感病毒H9亚型(鸡胚尿囊液)及部分待检样品,进行灵敏度、特异性、安全性等方面的比较.结果表明:荧光RT-PCR方法在4 h内就能得出结果,检测尿囊液的禽流感病毒灵敏性达到10-7;RT-PCR方法6 h出结果,其灵敏度为10-5,且荧光RT-PCR不需电泳,不接触EB,更安全.因此,荧光RT-PCR比常规RT-PCR更灵敏、快速和安全.     

大豆主要过敏原Gly m Bd 28K基因的克隆表达、纯化及多抗血清的制备

RT-PCR克隆大豆主要过敏原Gly m Bd 28K基因,根据序列设计引物,扩增目的基因的开放阅读框,与MBP载体连接,测序鉴定,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,并用IPTG诱导表达.亲和层析法纯化重组蛋白,SDS-PAGE验证蛋白的纯度,免疫新西兰大白兔,收集多抗血清,用ELISA法测效价.扩增出含Gly m Bd 28K目的基因片段,诱导并获得高浓度和预期相符的表达产物,经层析纯化出Gly m Bd 28K蛋白,免疫新西兰大白兔,获得效价为1∶1.6×106多抗血清.     

聚酰胺树脂分离纯化罗布麻叶总黄酮的工艺研究

以聚酰胺树脂对罗布麻叶总黄酮的吸附量及解吸率为指标,通过静态解吸附试验,确定适合分离纯化罗布麻叶总黄酮的聚酰胺树脂类型,通过动态吸附与解吸试验,采用单因素试验与响应面法优化并确定聚酰胺树脂分离纯化罗布麻叶总黄酮的工艺参数,最终确定最优工艺条件为:上样液质量浓度(生药量)为4.7 mg·m L-1,p H值为4.8,流速为1.1 BV/h,最大上样量为1.6BV,用5 BV体积的70%乙醇洗脱,经纯化后的罗布麻总黄酮得率为74.5%,且罗布麻总黄酮在浸膏中含量由纯化前的28.42%提高到纯化后的78.13%,纯化物中总黄酮纯度为78.13%。聚酰胺树脂可用于分离纯化罗布麻总黄酮,所得纯化物中总黄酮纯度较高,确定的工艺条件对罗布麻总黄酮工业化生产提供了依据。     

双水相分离纯化R-藻红蛋白

为了获得优于食品级的R-藻红蛋白(R-PE),采用双水相体系从坛紫菜中分离纯化R-PE.结果表明,聚乙二醇(PEG)/酒石酸钾钠双水相体系,当PEG相对分子质量为1 500且p H为8.06、系线长22.30%、体积比0.12时纯化效果最佳,R-PE纯度由细胞破碎液的0.43提高到1.47,回收率为84.42%.经过二次双水相纯度达1.55,纯化因子为3.60.得到的R-PE具有较高的生物活性.PEG相对分子质量1500/酒石酸钾钠双水相体系成功分离纯化R-PE,操作简单,成本低,适于工业化.     

二步超离心法分离纯化人血浆ApoB100及兔抗人ApoB100抗血清制备

建立一种从人血浆中分离纯化ApoBl00的方法,并制备兔抗人ApoBl00抗血清。将血浆用溴化钾调成1．019g／mL的密度液进行差分超速离心,将分离产物在溴化钾不连续密度梯度液（1．006-1．210g／mI。）中进行等密度超速离心。用G-100葡聚糖凝胶柱纯化ApoB100,以ELISA双抗体夹心法检测浓度,真空冷冻干燥。取冻干粉与弗氏佐剂混合后免疫新西兰白兔,制备兔抗人ApoB100抗血清,利用双向免疫扩散检测抗原纯度与抗血清效价。结果是一步超离法分离的ApoB100最高浓度为0．91μg／mL;二步超离法分离的ApoB100最高浓度为1．40μg／mL,对应的抗血清效价为1：64。结果表明二步超离心法提高了人血浆ApoB100的分离效果。     

棉籽蛋白提取工艺的研究

采用碱提取和盐提取法提取棉籽蛋白,通过单因素实验和正交实验对提取工艺参数进行优化,并从蛋白提取率及纯度等方面对蛋白提取方法进行比较.得出采用亚硫酸钠提取棉籽蛋白最佳,其工艺条件为：温度40℃,质量浓度20 g/L,液粕比10∶1,提取时间70 min.此时蛋白质提取率为32.15%,蛋白质纯度99.6%.     

离子交换法分离纯化猪硫酸软骨素的研究

研究离子交换法直接从猪鼻骨酶解液中分离纯化猪硫酸软骨素的工艺,并与传统酶解-氧化法进行比较.采用阳离子交换树脂对猪鼻骨酶解液进行分离纯化,以树脂对蛋白和硫酸软骨素的吸附率为指标,筛选得到一种能从酶解液中有效分离硫酸软骨素的树脂,并研究了温度、NaCl浓度和上样流速等因素对分离效果的影响.研究表明:HZ-016型阳离子交换树脂能从猪鼻骨酶解液中分离纯化硫酸软骨素,优化后的工艺条件:室温25℃,上样质量浓度20.5 mg/mL,上样流速1.0 mL/min,最大上样量1 BV(Bed Volume).与传统酶解-氧化法相比,收率提高6.5％,产品质量分数提高5.6％,杂蛋白含量降低28.6％,且工艺条件温和、乙醇耗量低和操作简单,具有良好的产业化应用前景.     

不同纯化兔抗苏丹红ⅠIgG方法的比较

采用辛酸-硫酸铵法和亲和层析法两种方法纯化兔抗苏丹红I IgG。纯化产物通过BCA法、琼脂双向扩散、SDS-PAGE凝胶电泳试验进行蛋白浓度、效价及纯度的验证。实验结果表明,利用辛酸硫酸铵纯化的产物蛋白质浓度高于亲和层析法,但经亲和层析纯化的产物纯度和效价均优于饱和硫酸铵。因此亲和层析法是一种快速高效的纯化方法,纯化产物可适用于免疫学检测方法的研究,为今后食品中苏丹红添加剂的快速检测奠定了良好的基础。     

赤小豆芽超氧化物歧化酶的性质研究

采用硫酸铵分步沉淀，以40％硫酸铵饱和度去除杂蛋白，以95％硫酸铵饱和度沉淀酶蛋白。酶的耐热性一般，抗胰蛋白酶水解能力强，该酶在紫外光区的吸收峰为275nm，呈现Cu．Zn—SOD的特征谱线。     

酯交换法合成碳酸二苯酯的工艺研究

通过对碳酸二甲酯与苯酚酯交换法反应合成碳酸二苯酯的研究,寻找最佳的反应条件．实验结果表明反应在160～180℃下,苯酚、碳酸二甲酯与催化剂的摩尔比为4：1：0．016,反应时间为12h,碳酸二苯酯的产率可以达到40％以上,经碱洗、重结晶处理后纯度可以达到99．0％．     

猪血凝血酶的分离与纯化

报道了以猪血为材料制备凝血酶的新方法：先将猪血浆在-20℃条件下冷冻2d，离心除去纤维蛋白原，再等电点沉淀，得凝血酶原，经CaCl2激活后，通过DEAE—SepHarose Fast Flow离子交换柱层析纯化，获得比活为1807．9U／mg的电泳纯凝血酶制剂，其收率为48．9％。该方法生产工艺简单，所得产品纯度高，对凝血酶的生产具有一定的指导价值。     

电解稀硫酸铵溶液生产过硫酸铵

以抚顺石化公司腈纶化工厂生产丙烯腈的副产品———稀硫酸铵溶液为原料 ,采用电解法生产过硫酸铵。一定温度下 ,采用Pt作阳极 ,Pb作阴极 ,聚四氟乙烯阳离子膜为隔膜 ,加入一定量的自制抑制剂为添加剂 ,电解制备过硫酸铵。转化率可达 95 %。采用结晶法分离产物 ,并用碘量法对产品纯度进行测定 ,过硫酸铵质量分数达99%。同时考察了添加剂的种类、用量 ,隔膜的种类、电流密度、电解时间对产物产率的影响。实验表明 ,用此法生产过硫酸铵产品 ,工艺简单 ,操作容易 ,生产过程污染小 ,产品易分离 ,纯度高 ,是利用稀硫酸铵溶液生产过硫酸铵的最佳方法     

黄酮类活性成分的分离提纯

研究了酶转化芦丁产物异槲皮甙的分离提纯。酶反应产物用硅胶柱层析法提取,可以得到高纯度的异槲皮甙。通过高效液相色谱检测纯度,结果表明异槲皮甙转化率为70%,纯度为90%以上。通过核磁共振测定,确定此酶反应产物是异槲皮甙。     

开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷的分离与纯化

为了得到较高纯度的开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷（SDG），先使用65％的乙醇水溶液从脱脂亚麻籽粉中提取SDG聚合物，再选用A出8大孔树脂从脱脂亚麻籽的乙醇提取物中分离纯化SDG。结果表明，此法可使SDG的纯度达到58．9％，以亚麻木脂素粗提物中的SDG含量为基准，算得产物的得率为40．1％。     

开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷的分离与纯化

为了得到较高纯度的开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷(SDG),先使用65%的乙醇水溶液从脱脂亚麻籽粉中提取SDG聚合物,再选用AB-8大孔树脂从脱脂亚麻籽的乙醇提取物中分离纯化SDG。结果表明,此法可使SDG的纯度达到58.9%,以亚麻木脂素粗提物中的SDG含量为基准,算得产物的得率为40.1%。     

姬松茸发酵液多糖的分离纯化及理化性质分析

采用Sevag法脱蛋白、H2O2脱色、透析、DEAE—cellulose层析、Sephadex G-200凝胶过滤等一系列方法，对姬松茸发酵液多糖进行分离纯化，得到其中的主要成分AbEXP1-a．凝胶过滤色谱和醋酸纤维薄膜电泳结果表明AbEXP1-a为均一组分．经常规理化分析、元素分析和紫外扫描证明，AbEXP1-a是含结合态蛋白的水溶性多糖．除微溶于甲醇和乙醇外，不溶于其他有机溶剂．经HPLC法检测，AbEXP1-a的分子量为50kD．