盐藻中β—胡萝卜素的分离与测定纸层析法

盐藻中含有多种营养物质，其中蛋白质，甘油，叶绿素及β—胡萝卜素具有开发价值．利用β—胡萝卜素极性最小，易溶于石油醚的特点，用丙酮一石油醚提取盐藻中的β—胡萝卜素，纸层析分离，分光光度法于450um波长处测定，可定量测定出盐藻中的β—胡萝卜素的含量．本文利用此法对多个盐藻样品进行了测定，变异系数为7．4％，回收率在84．1％—112．0％之间．     

氮,磷对盐藻生长及其β—胡萝卜素积累的影响

本文研究了盐生杜氏藻（Ｄｕｎａｌｉｅｌａｓａｌｉｎａ，系中国科学院海洋研究所赠送）在２６℃、３０００ｌｘ试验条件下，不同氮、磷浓度对其细胞生长与β－胡萝卜素积累的作用．分别提供ＫＮＯ３或ＫＨ２ＰＯ４时，对盐藻生长的最适浓度分别为氮１ｍｍｏｌ／Ｌ，磷０．３ｍｍｏｌ／ｌ．而对细胞个体积累β－胡萝卜素的最适条件是无氮、无磷，经１０ｄ生长，其β－胡萝卜素含量分别达１１．２４ｐｇ／ｃｅｌ和１０．２８ｐｇ／ｃｅｌ．本文还讨论了以上结果的机理及意义，为建立盐藻高产β－胡萝卜素的控制模式提供了重要理论依据．     

天然β-胡萝卜素的研究

对天然β胡萝卜素的提取方法进行了研究．β胡萝卜素是最重要的维生素Ａ 原，而维生素Ａ 对人的视觉及多项生理机能具有极为重要的作用，为了避免化学合成法所得产品对人体副作用较多的缺点，并针对从盐藻中提取天然产品局限性较大等问题，以生产玉米淀粉的副产物玉米蛋白粉为原料，选择适当的萃取剂，采用萃取—层析法提取天然β胡萝卜素，取得较高收率．此方法与盐藻法相比，具有较高的社会与经济效益．     

天然β—胡萝卜素的研究

对天然β－胡萝卜素的提取方法进行了研究。β－胡萝卜素是最重要的维生素Ａ原，而维生素Ａ对人的视觉及多项生理机能具有极为重要的作用。为了避免化学合成法所得产品对人体副作用较多的缺点，并针对从盐藻中提取天然产品局限性较大等问题，以生产玉米淀粉的副产物玉为蛋白粉为原料，选择适当的萃取剂，具有较高的社会与经济效益。     

应用HPLC技术分析盐藻β-胡萝卜素分子顺反异构体

采用ＨＰＬＣ技术对盐藻中β－胡萝卜素顺反异构体进行分分析,探索适宜的分析条件．所用仪器为ＷａｔｅｒｓＨＰＬＣ分析系统,检测波长λ＝４３６ｎｍ;灵敏度ＡｕＦｓ０．０５;色谱柱为：２５０×４．６Ｃ１８柱（Ｎｕｃｌｅ－ｏｓｉ７μｍ）;洗脱条件为：甲醇∶氯仿＝６０∶４０（Ｖ／Ｖ）,流速为１ｍＬ／ｍｉｎ．所有操作过程均在避免高温、高湿度、强光照射、低ｐＨ值条件下进行．通过分析测出一种全反式和两种顺式异构体     

提高β－胡萝卜素保存率的研究

研究了胡萝卜制汁过程中造成β－胡萝卜素损失的因素，分析了去皮、热烫。脱气、杀菌等主要加工工序对β－胡萝卜素保存率的影响，筛选出β－胡萝卜素损失最小的最佳工艺条件，使β－胡萝卜素保存率可达８２．３％。     

不同因子胁迫盐藻积累β—胡萝卜素异构体的HPLC动态规律分析

本文采用ＨＰＬＣ技术研究了光强、温度、盐度三因子对盐藻积累β－胡萝卜素的动态协同胁迫作用．结果表明：它们存在着很强的协同胁迫作用,在温度２５℃,自然光照射时,２４０‰盐度积累β－胡萝卜素量大于１８０‰（０．７１６μｇ／ｍｌ＞０．３３７μｇ／ｍｌ）,但在３２℃,光强１００００ｌｘ时,１８０‰盐度积累量大于２４０‰（（２．９４８μｇ／ｍｌ＞０．９８８μｇ／ｍｌ）;这一动态过程的时间曲线为“抛物”曲线;强胁迫条件有利于全反式异构体积累,弱胁迫条件有利于顺式异构体积累     

应用HPLC技术分析盐藻β—胡萝卜素分析顺反异构体

采用ＨＰＬＣ技术对盐藻中β－胡萝卜素顺反异构体进行分分析,探索适宜的分析条件,所得仪器为ＷａｔｅｒｓＨＰＬＣ分析系统,检测波长λ＝４３６ｎｍ;灵敏度ＡｕＦｓ０．０５;色谱仪为：２５０＊４．６Ｃ１８柱;洗脱条件为：甲醇：氯仿＝６０：４０（Ｖ／Ｖ）,流速为１ｍＬ／ｍｉｎ。 所操作过程在避免高温,高湿度,强江照度,低ＰＨ值条件下进行。通过分析测出一种全反式和两种顺式异构体。     

盐藻microRNAs高通量测序和生物信息学分析

小核糖核酸(microribonucleic acid,microRNA或miRNA)是一类内源性长约21~24个核苷酸碱基(nucleotide,nt)的非编码RNA,在真核生物的基因转录后调控中起着重要作用.杜氏盐藻(Dunaliella salina)是β-胡萝卜素含量最高的真核微藻,为探究其是否存在内源miRNA,构建了小RNA文库,通过Illumina HiSeq~(TM)2500高通量测序的方法对盐藻进行小RNA测序.测序共获得11 542 169条clean tags(3个盐藻文库clean tags数的平均值).比对Gnen Bank数据库、Rfam数据库及盐藻的参考基因组数据,筛选后的clean tags数据再比对miRBase数据库,3个盐藻生物学重复分别获得已知miRNA为42、41和44个.比对盐藻参考基因组及其miRNA前体发卡结构预测,3个重复分别获得盐藻新的miRNA为920、880和957个.预测所有miRNA的靶基因,并对其进行功能富集,发现靶基因在细胞代谢进程、分子功能的结合和催化活性方面较多.首次鉴定了杜氏盐藻中具有miRNA的存在,对揭示miRNA这一调控机制广泛存在于单细胞真核绿藻提供了依据.     

Mg^2＋对三孢布拉霉合成β—胡萝卜素的影响

补加Mg^2 对三孢布拉霉合成β—胡萝卜素及其生长的影响研究表明，在一定范围内，质量浓度低的Mg^2 促进菌体生长，质量浓度高的Mg^2 抑制菌体生长，但β—胡萝卜素比产量增加．发酵48h补加0．3g／dL Mg^2 ，β-胡萝卜素产量增加40％．同时，补加Mg^2 和β-紫罗酮比仅添加β—紫罗酮、β-胡萝卜素产量提高约11％．     

多种辅助方法复合处理提高β-胡萝卜素含量研究

研究了冻融、酶法、超声波、微波四种辅助方法复合处理对提高胡萝卜汁中β-胡萝卜素含量的影响。试验结果表明：采用超声波法→冻融法→微波法→酶法,并以此先后顺序对胡萝卜浆液进行处理,所得胡萝卜汁中β-胡萝卜素含量最高,与空白相比,β-胡萝卜素提取率增加269%。     

β—胡萝卜素裂解温度对其裂解产物的影响

分别对β-胡萝卜素在300，400，500，600，700，800℃裂解时形成的产物进行了研究．结果表明：β-胡萝卜素高温裂解是一个十分复杂的过程，其产物为许多化合物的混合物，而且裂解的温度不同，裂解时所得到的产物也不相同．在相对较低的温度下进行裂解时，形成芳香物质的种类比较多，含量也比较高，随着裂解温度的升高，这些芳香物质的含量逐渐减少；到600℃时，β-紫罗兰酮和二氢猕猴桃内酯已完全消失，取而代之的是，茶、蒽和菲等稠环化合物的含量迅速增加；到800℃时，产物基本上是苯、甲苯、二甲苯、乙基苯等芳环化合物以及萘、蒽和菲等稠环化合物。     

大分子乳化剂稳定的纳米乳中β-胡萝卜素的降解

分别以乳清分离蛋白、热处理乳清分离蛋白、乳清分离蛋白与麦芽糖糊精的混合物和美拉德反应复合物为乳化剂,制备β-胡萝卜素纳米乳,并考察其乳滴粒径分布及β-胡萝卜素的降解。结果表明：乳清分离蛋白与麦芽糖糊精共价复合后,形成的纳米乳液平均粒径更小,但复合物加速纳米乳中β-胡萝卜素的降解。而热处理乳清分离蛋白能显著抑制纳米乳中β-胡萝卜素的降解,其机制可能是蛋白质大分子聚集体的形成对β-胡萝卜素起保护作用。     

提高胡萝卜汁中β-胡萝卜素含量的研究

采用微波辅助技术,对提高胡萝卜汁中β-胡萝卜素含量的工艺技术进行了研究,探索了微波处理的最佳工艺参数:即微波输出功率600W,料液比1∶3,处理时间58s,处理次数3次,β-胡萝卜素(与对照相比)平均增长率为117.25%。     

提高β—胡萝卜素保存率的研究

研究了胡萝卜制汁过程中造成β－胡萝卜素损失的因素，分析了去皮，热烫，脱气，杀菌等主要加工工序对β－胡萝卜素保存率的影响，筛选出β－胡萝卜素损失最小的最佳工艺条件、使β－胡萝卜素保存率可达８２．３％。     

正交旋转回归法优化β-胡萝卜素发酵培养基

用正交旋转回归法研究了棉籽饼粉和玉米粉对三孢布拉霉（Blakeslea trispora）液体发酵生产β-胡萝卜素的影响,并拟合出了回归方程．回归分析表明：培养基中棉籽饼粉、玉米粉的含量及其配比对β-胡萝卜素产量有显著影响、通过岭脊分析寻优得出：棉籽饼粉最佳浓度为2．4％、玉米粉最佳浓度为1．6％,在此优化条件下β-胡萝卜紊产量可以达到1275．1mg／L,比优化前提高了25％．     

β-胡萝卜素发酵培养基的优化

研究了应用三孢布拉霉生产β-胡萝卜素的发酵工艺.首先用 Plackett-Burman筛选出影响β-胡萝卜素产量最为重要的3个因素,即玉米粉、玉米浆粉、MnSO4·H2O,接着用最陡爬坡实验逼近β-胡萝卜素最大产量区域,然后根据最陡爬坡实验的结果用RSM对发酵培养基进行了优化,得到了一个稳定的工艺条件,β-胡萝卜素产量达到2.55 g/L,比优化前提高了39%.     

超声法提取三孢布拉氏霉中的β-胡萝卜素

采用正交试验优化了超声法提取三孢布拉霉中β-胡萝卜素的工艺条件。最佳工艺条件为:15倍量的乙酸乙酯,35℃,100 W超声提取40 min;二级提取。加入抗氧化剂可使β-胡萝卜素提取率提高5.7%,达到89.2%。     

β—胡萝卜素与油脂稳定性的研究

本研究对二级菜籽油、菜籽色拉油、二级大豆油、大豆色拉油添加适量的β—胡萝卜素,以提高油脂的稳定性.研究结果表明:经添加β—胡萝卜素的油脂稳定性优于未添加的油脂.同时还对不同种类的油脂添加量进行对照试验,找出了β—胡萝卜素的最佳添加量.     

β-胡萝卜素生理功能及提取技术的研究进展

β-胡萝卜素是人体内VA的重要来源，对人体具有重要的生理功能。它可以预防、延缓和治疗某些疾病，尤其是癌症，同时也能提高机体的免疫功能。但提取方法目前报道不多，作者针对其生理功能及其提取方法做一综述。