白地霉发酵过程中菌体量检测方法的研究

探讨了白地霉发酵过程中菌体量的检测方法,对白地霉的细胞组分麦角固醇和氨基葡萄糖,能否作为菌体量检测指标的可行性进行了比较分析。结果表明:氨基葡萄糖在白地霉细胞中的含量较为稳定,在不同的培养时间、培养条件和培养基中都有较好的稳定性,可以作为白地霉菌体量的检测指标;麦角固醇受培养时间和培养基成分的影响较大,含量不稳定,不太适合作为白地霉菌体量的检测指标。用氨基葡萄糖法测得的白地霉生长曲线与用干重法测得的生长曲线变化一致,能够较为准确地反映白地霉菌体量变化。将此方法应用到白地霉固态发酵中,可快速得到白地霉固态发酵过程中的菌体量变化,为以后固态发酵菌体量的测定提供了依据。     

高产纤维素酶的米曲霉菌种的筛选和以甘蔗糖蜜为碳源对培养基的优化

目的:根据生物量和纤维水解圈从米曲霉40636,41478,M1,M2 4株菌中确定40636为实验菌种。方法:在单因素试验基础上,进行正交试验设计。确定米曲霉40636的液体培养基为糖蜜25%,硫酸铵0.75%,蛋白胨0.375%,酵母粉0.375%,KH2PO4添加量为0.27%,MgSO4添加量为0.105%,氯化钠添加量为0.12%。在此条件下,米曲霉菌体干重达到20.2940g/L。     

微生物发酵法制备太平洋牡蛎水解液

将米曲霉Aspergillus oryzae AS3.951接种到太平洋牡蛎(Ostreagigas thunberg)肉匀浆液中发酵培养,利用米曲霉产生的蛋白酶和淀粉酶水解牡蛎肉制备牡蛎水解液。通过单因素试验及正交试验探索发酵条件对太平洋牡蛎蛋白质回收率和糖原回收率的影响,发现起始pH为7.0时,蛋白质浓度为15%,装液量20%(V/V),140 r/min,30℃发酵48h,蛋白质回收率和糖原回收率最大,分别为85.33%和90.52%。这表明利用米曲霉发酵太平洋牡蛎制备水解液是可行的,并为进一步利用统计学方法提高米曲霉发酵太平洋牡蛎制备高蛋白回收率和糖原回收率水解液奠定基础。     

红曲菌适生性薏苡基质培养优化研究

为探究红曲菌开发利用薏苡及其副产物的可能性,对红曲菌在薏苡基质中的适生性进行研究,并利用正交试验分别对培养基和培养条件进行了优化。得到红曲菌薏苡基质培养的最佳培养基配方为薏苡碎米60 g/L,薏苡糠麸60 g/L,麦芽糖50 g/L,氯化铵3 g/L,硫酸镁2 g/L;最佳培养条件为接种量5%,初始p H值为6,温度34℃,装液量为30 m L/250 m L。采用最佳培养基及培养条件在34℃下培养5 d,红曲扩培后菌体干重≥65.0 g/L(活菌量≥1.0×10~8 cfu/m L),且菌丝球均匀,形态饱满,活力强。     

油茶饼粕发酵条件的研究

以油茶饼粕和血粉为主要原料,以黑曲霉、米曲霉、绿色木霉和产朊假丝酵母组成的混合菌种为发酵剂,研究了油茶饼粕进行菌体蛋白饲料生物转化时发酵条件和培养基原料配比对发酵产物菌体干重的影响.通过正交实验,确定最佳培养基配比为:m茶粕:m血粉＝17:3,m料:V水＝1:1.2,初始pH为5.0～5.5;最佳发酵条件为:250 mL三角瓶,装料量15 g,总接种量10%,其中霉菌与酵母菌的接种比为1:1,培养时间为4 d.在最佳培养基和发酵条件下,得到的菌体干重为一最大值21.25 g/L.     

降脂红曲高产Monacolin K生产工艺优化

为了提高降脂红曲中功能性成分Monacolin K的产量,降低生产成本,作者从多株红曲菌中筛选出高产Monacolin K的菌株为红色红曲菌9901。以不同品种的大米作为红曲菌固态发酵基质,确定广西早籼米为红色红曲菌9901产Monacolin K的最适基质,并对其高产的原因进行了初步分析,随后对发酵时间、抖料次数、变温时间、加水量及接种体积分数进行单因素实验。在此基础上用Design-Expert对红色红曲菌9901固态发酵产Monacolin K进行响应面分析,确定最适合红色红曲菌9901固态发酵产Monacolin K条件为:以初始含水量为10%左右的广西早籼米作为固态发酵基质,加水量为45 mL,接种体积分数为10%,先于30℃培养50 h,然后变温到25℃培养至20 d,在此条件下Monacolin K产量达到10453.07 mg/kg,比优化前提高了48.97%。     

耐高糖面包酵母发酵工艺优化

为了优化耐高糖酵母发酵工艺,基于培养温度、摇床转速、装液量、初始p H、菌体接种量五个因素的单因素实验的结果,之后对装液量、初始p H、菌体接种量进行响应面优化实验。结果表明,最佳工艺条件为:培养温度30℃,摇床转速200 r/min,装液量8.4%,p H4.7,接种量7.4%,在此条件下,酵母细胞干重提高了55.72%。同时,利用5.0 L机械搅拌罐以溶氧反馈流加、恒速流加、间歇流加三种糖蜜补充方式进行酵母细胞培养,绘制生长曲线,发现以溶氧反馈流加方式补充糖蜜更有利于酵母繁殖,最大酵母湿重达到143.95 g/L,达到了耐高糖面包酵母高密度发酵的实验水平,确定了酵母最佳的流加补料方式。     

红曲发酵藜麦基质适生性研究

为提高藜麦的食用价值,将益生菌与藜麦结合,为藜麦微生物固态发酵提供了基础。该研究以藜麦为发酵基质,选择红曲菌为发酵菌种,探究红曲发酵藜麦基质适生性,分别对藜麦添加量、碳源添加量、氮源添加量等因素进行单因素试验影响分析,并以菌体干重为评定指标进行正交优化试验,获得最优种子液配方,利用最优种子液配方进行藜麦固态发酵,对未发酵藜麦和固态发酵藜麦进行风味物质分析及感官评定分析。结果表明,应选择蔗糖为附加碳源,蛋白胨为最适氮源,所得最优种子液配方为:藜麦添加量100 g/L、蔗糖添加量30 g/L、蛋白胨添加量30 g/L,且利用最优种子液配方进行固态发酵后,红曲固态发酵藜麦感官评定及风味物质种类和含量均优于未发酵藜麦。     

混合菌种生物转化甘薯原料为菌体蛋白饲料的研究

通过少孢子根霉和树状假丝酵母混合菌种的直接生物转化 ,由甘署原料制得了菌体蛋白饲料。在较佳培养条件下 ,经 2 8℃浅盘发酵 72h ,产物干基粗蛋白含量为 2 2 .1% ,采用自制固态生物反应器 2 8℃固态发酵 4 8h ,每 10 0 g甘薯粉可得 82 .8g发酵产物 (折干 ) ,其粗蛋白含量为 15.9% ,每 g湿料中酵母数为 36亿个 ,氨基酸含量较原料提高 1倍。甘薯原料经混合菌种于 10l外循环气升式发酵罐液态发酵 4 8h后 ,培养液中菌体干重为 38.2mg/ml,粗蛋白含量为 4 6.4 % ,蛋白产量达 17.7mg/ml,总糖利用率为 75.0 %。     

红色红曲菌液态发酵产胞外淀粉酶的研究

通过对红曲菌胞外淀粉酶活力的检测初步研究了红色红曲菌液态发酵产淀粉酶的特性。研究表明,红色红曲菌在液态发酵培养过程中分泌的胞外淀粉酶主要为葡萄糖淀粉酶,产酶时间略提前于红曲菌菌丝体生长高峰期,在培养第2天达到最高值。葡萄糖淀粉酶分泌的最适碳源为6%淀粉,最适氮源为2%蛋白胨,发酵最适条件为32℃,初始pH6,接种量5%。红曲菌产葡萄糖淀粉酶的较佳培养条件与红曲菌较适生长条件基本相符。红曲菌在液态发酵过程中几乎不产胞外α-淀粉酶。无论是固态培养还是液态发酵,红色红曲菌的产淀粉酶能力均低于紫色红曲菌。     

高甾醇含量热带假丝酵母细胞的培养条件研究

以大豆油脱臭馏出物为唯一碳源,研究了高产甾醇的热带假丝酵母（Candida tropicalis）1253细胞的培养条件。研究发现,无机氮源培养使得菌体甾醇含量显著高于有机氮源培养。当尿素与牛肉膏复合作为氮源时,菌体甾醇含量最高（7.55%）。最佳培养基配方为：脱臭馏出物50.0 g/L、尿素1.0 g/L、牛肉膏1.0 g/L、甘氨酸0.02 g/L、十二烷基苯磺酸钠0.5 g/L、MgSO4 0.1 g/L、K2HPO4 0.2 g/L、KH2PO4 0.2 g/L。最适培养条件为：初始pH 7.0、摇床转速200 r/min。采用上述最适的发酵条件,按10%（V/V）接种量接入热带假丝酵母1253种子液,30 ℃摇床振荡培养96 h。发酵结束后,经过测定,酵母细胞中甾醇含量为8.83%。     

冰核活性细菌Xanthomonas ampelinaTS206实验室水平发酵生产工艺条件优化的研究

优化冰核活性细菌XanthomonasampelinaTS206实验室水平发酵生产的工艺条件为将冰核活性细菌应用在工业化生产提供了重要的技术资料。本文对冰核活性细菌XanthomonasampelinaTS206实验室水平的发酵生产工艺条件进行了系统的研究,结果表明这种冰核活性细菌的最适培养条件为:培养温度18℃,装液量40ml/250ml,摇床转速180r/min,接种量3%,发酵液的初始pH8。实验还确定了冰核活性细菌在发酵48h时达到对数生长期。采用上述发酵条件培养XanthomonasampelinaTS206可以使细菌在冰核活性不降低的条件下发酵液的菌体浓度达到2.87×1010个/ml,菌体干重增加了37.7%。     

枯草芽孢杆菌Z-3产木聚糖酶固态发酵工艺优化

以木聚糖酶活力为响应值,通过单因素及响应面试验优化克氏原螯虾肠道来源枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Z-3产木聚糖酶的固态发酵工艺。结果表明,最优固态发酵工艺为培养时间3 d、培养温度37 ℃、初始pH值5.0、装料量30 g/250 mL,接种量2.5%,碳源为麸皮与玉米芯混合物,麸皮占比60%,氮源为氯化铵。在此最优发酵工艺条件下,木聚糖酶活力为3 459.58 U/g湿基,较未优化前（2 079.1 U/g湿基）提高66.40%。     

热带假丝酵母处理红麻亚铵法制浆废液的研究

以红麻亚铵法制浆废液为原料,对热带假丝酵母菌的培养条件进行了研究,结果表明:在原废液浓度9°Be、pH 6.0、发酵温度30℃、接种量10%、发酵时间48h、摇床转速140 r/min、摇瓶装液量50mL/250mL的优化条件下,菌体干重可以达到7.874g.L-1,原废液COD cr下降33%左右,为红麻亚铵法制浆废液资源化利用和降低排放量提供了新的途径。     

米曲霉发酵牛乳工艺条件的研究

利用米曲霉对牛乳进行发酵,通过单因子及正交试验以菌丝体干重、氨基酸态氮为考察指标对其发酵牛乳工艺条件进行了研究。结果表明,发酵是在pH值自然状态下,接种量为5%,装液量为25mL,摇床转速为180r/min时,菌丝体干重可达到2.71g/100mL。氨基酸态氮达0.3088g/100mL。     

分批补料高密度培养米根霉As3.819产L-乳酸的研究

采用分批补料方式对米根霉As3.819高密度培养产L-乳酸的效果进行研究。摇瓶实验确定的最佳培养条件为：接种量5%、接种时间24h、装液量40%、补料液中葡萄糖与硫酸铵的质量比为20:1。罐发酵的最佳补料方式为葡萄糖浓度反馈流加。通过流加培养获得了较高的菌体密度,菌体干重达18.45g/L;重复发酵5批次,产L-乳酸效率达2.25g/L·h;菌体干重和产酸效率较分批培养分别提高了92.9%和82.9%。     

巴斯德芽孢杆菌培养基及培养条件的优化

通过单因素和正交实验对巴斯德芽孢杆菌(Bacillus pasteurii)培养基组分及培养条件进行研究。结果表明,最适培养基配方(g/L)为甘露醇40、大豆蛋白胨25、氯化铵3、氯化钠10,pH为8.0;最适培养条件为温度30℃,摇床转速200r/min,接种量4.0%(V/V),装瓶量75mL/250mL;在优化条件下,菌体培养24h达到生长高峰期,活菌数达9.52×109cfu·mL-1,分别是普通LB培养基和牛肉膏蛋白胨培养基的1.71、1.55倍。     

利用啤酒废酵母深层发酵培养假蜜环菌的研究

明确了假蜜环菌试验菌株摇瓶培养条件为:碳源浓度25g/L,氮源浓度0.336g/L,初始pH4.0,种龄为7d的液体种子接种量为10%(V/V),在27℃,摇床转速140r/min。对照此培养条件,确定假蜜环菌深层发酵培养基的组成为:经过破壁处理啤酒废酵母粉4.8g/L,葡萄糖24g/L。相同培养条件下,菌丝体收获量为干重13.5g/L,生物量高于利用蛋白胨培养基扩大培养的产量:13.0g/L。     

高产橙黄色素低产桔霉素红曲菌的液态发酵条件优化

红曲菌在发酵过程中产生多种次级代谢产物,其中红曲色素作为一种使用历史悠久的天然色素,广泛应用于食品、医药、化妆品等行业领域中。但伴随着红曲色素的合成,会产生具有肾毒性的真菌毒素——桔霉素,使红曲色素的应用受到限制。为找到最佳培养基成分及培养条件,提高红曲色素产量的同时,降低桔霉素含量,以色素色价、菌体干重、桔霉素含量为考察指标进行筛选。结果表明,红曲菌高产橙黄色素、低产桔霉素的最佳发酵条件为:可溶性淀粉60 g/L,氮源为10 g/L(NH_4)_2SO_4,2 g/L K_2HPO_4,2. 0 g/L MgSO_4,0. 02 g/L Zn SO4;装液量50 m L/250 m L,初始p H 3,转速200 r/min,在28℃下培养5 d。在此工艺条件下,橙、黄色素分别比之前提高了6倍和4倍,桔霉素含量降低了30%。     

中国被毛孢液体发酵培养条件优化

以中国被毛孢为试验菌株对药瓶发酵培养基配方和发酵条件进行优化。在单因素试验的基础上进行正交试验结果表明最佳发酵培养基配方:葡萄糖3%,蚕蛹粉2%,土豆20%,KH_2PO_4 0.2%,MgSO_40.1%,水解酪蛋白0.1%,复合维生素0.07%。最佳摇瓶发酵条件:初始pH 6.5,装液量100 mL/500 mL,接种量为5%,温度为16℃,摇床转速150 r/min。菌丝体干重为16.53 g/L,腺苷含量为1.85 mg/g。与优化前相比,菌丝体干重提高了36.2%,腺苷含量提高了46.8%。