草鱼鱼鳞胶原蛋白提取及活性肽制备研究

以草鱼鱼鳞为原材料,探讨其胶原蛋白酸-酶组合提取工艺,并进一步研究相应抗氧化活性肽和血管紧张素转换酶抑制(ACEI)活性肽的制备方法。结果表明,草鱼鱼鳞胶原蛋白提取的最优工艺为:乙酸浓度0.3 mol/L、乙酸提取固液比1∶15(g/m L)条件下低温下提取24 h;离心后剩余残渣再按1∶10(g/m L)的比例浸入浓度为2%的胃蛋白酶溶液中低温下提取48 h;在该条件下鱼鳞胶原蛋白提取得率可达49.58%。以草鱼胶原蛋白粗提液为原料,制备抗氧化活性肽的最优工艺为:控制胶原蛋白浓度12.5 mg/m L,按10∶1(体积比)的比例加入浓度为4%的木瓜蛋白酶,60℃下酶解75 min,所得酶解液对ABTS~+自由基的抑制率可达45.7%;制备ACEI活性肽的最优工艺为:控制胶原蛋白浓度20 mg/m L,pH值调节为4.0,每10 m L加入6 000 U的酸性蛋白酶,37℃酶解3 h,所得酶解液对血管紧张素转换酶(ACE)的抑制活性可达98.8%。本研究结果,有望为水产品加工副产物的资源化利用提供参考。     

微波辅助酶解前处理对鱼鳞胶原蛋白肽粉品质的影响

为了在兼顾成本的情况下制取较高品质的胶原蛋白肽粉,采用微波辅助水提法作为酶解前处理鱼鳞的方式,并酶解制取鱼鳞胶原蛋白低聚肽粉。经对微波辅助水提法与无微波辅助水提法制取的胶原蛋白肽粉的得率及品质进行分析。结果表明,鱼鳞在功率为10kW的微波干燥机中处理15s的条件下,胶原蛋白肽粉收率最高达57.8%,分子量小于1000u的胶原蛋白肽比例占87.84%,感官值为9,均高于非微波处理条件下制取的胶原蛋白肽;但是在此条件下,澄清度未表现出明显的差异性。     

响应面法优化木瓜蛋白酶提取草鱼鱼鳞胶原蛋白的研究

以草鱼鱼鳞为原料,用木瓜蛋白酶解提取草鱼鱼鳞中的胶原蛋白,并对其性质进行初步研究。在单因素试验的基础上,采用响应面法Box-Behnken试验设计,对影响提取率的酶解温度、加酶量、底物质量分数3个因素进行优化,建立并分析各因素与胶原蛋白提取率关系的数学模型。确定木瓜蛋白酶提取鱼鳞胶原蛋白的最佳条件为酶解温度50℃,加酶量3.5g/L,底物质量分数22%,经过验证胶原蛋白提取率为15.4%。得到鱼鳞胶原蛋白吸水性接近于甘油,保水性优于甘油,具有一定的乳化性和乳化稳定性。     

鱼鳞抗氧化肽的酶法制备工艺及特性

采用碱性蛋白酶(alcalase)水解草鱼鱼鳞制备鱼鳞抗氧化肽。用单因素及正交试验考察温度、加酶量、底物水平、酶解时间等因素对酶解反应的影响,确定最适条件。以肽得率、水解度和对羟自由基清除率为考察指标,得出酶解草鱼鱼鳞的较佳工艺条件为温度55℃、底物水平10%、加酶量3%、时间5h、pH9.0;此时酶解液中鱼鳞肽得率为55.2%,羟自由基清除率为98.86%;高效液相色谱法测定鱼鳞抗氧化肽的相对分子质量排布,分子质量在1000D以下的占91.8%,等电点为2.6左右,在pH2～12的条件下溶解度均在98%以上,可广泛应用于食品中。     

热力法和酶解法提取鱼鳞胶原蛋白的工艺及性质研究

以草鱼鱼鳞为原料,采用热力法和酶解法提取鱼鳞中的胶原蛋白,用正交实验优化提取工艺,分析所得胶原蛋白的性质。酶解法提取草鱼鱼鳞胶原蛋白的最佳工艺条件为:每克蛋白中加入7500U的Alcalase碱性蛋白酶,鱼鳞∶水=1∶20(w/v),60℃水解4h,胶原蛋白的水解度为6.43%。热力法提取的最佳工艺条件为,鱼鳞∶水=1∶20(w/v),121℃提取15min,提取率为45.47%。酶解法提取的胶原蛋白的黏度、吸水性和起泡性大于热力法提取的,但保水性、乳化能力和乳化稳定性及泡沫稳定性小于热力法提取的。     

酶解鱼鳔蛋白制备胶原蛋白肽饮品

通过酶解鱼鳔蛋白制备分子量低于2000 Da的胶原蛋白肽液,并配制成胶原蛋白肽饮品.采用木瓜蛋白酶对鱼鳔蛋白进行酶解,利用响应面优化方法分析酶解温度、酶解时间、加酶量对酶解液中胶原蛋白肽分子量的影响,以相对分子质量低于2000 Da的胶原蛋白肽所占比例为考察指标,确定最优酶解条件,并添加低聚果糖将其配制成胶原蛋白肽饮品...     

草鱼鱼鳞中胶原蛋白的提取工艺及其功能性质研究

以草鱼鱼鳞为提取原料,经过原料粉碎、脱钙、提取、纯化等工艺得到胶原蛋白。以胃蛋白酶为提取用酶,柠檬酸为提取介质,用正交试验优化提取工艺,并测定了鱼鳞的基本组成成分及所得胶原蛋白的功能性质。最终由正交试验确定酸酶法提取胶原蛋白的最佳工艺为：胃蛋白酶质量分数1．5％,料液比1：10,酶解时间6h,酶解温度5℃。     

草鱼鱼鳞酶溶性胶原蛋白肽脱腥脱苦工艺研究

以草鱼鱼鳞提取的酶溶性胶原蛋白肽(papain soluble collagen peptide,PSCP)为研究对象,研究不同截留分子量纳滤膜对PSCP回收率的影响;并以正交实验L9(34)研究了不同β-环糊精添加量、水浴时间、水浴温度对PSCP腥苦味及回收率的影响;最后分析了PSCP中氨基酸的含量和比例。结果显示,纳滤膜截留分子量为400~600u时,PSCP回收率最小(16.71%),推测PSCP分子量介于300~600u之间。β-环糊精最佳包埋条件为:添加量4%、水浴温度70℃、水浴时间40min,在此条件下鱼鳞胶原蛋白肽的回收率为92.21%,感官评分为9.30,脱腥脱苦效果最好。PSCP氨基酸分析结果显示,有16种氨基酸含量大于1%,共占总氨基酸含量的99.07%,其中羟脯氨酸含量大于8%。该方法及优化后的工艺参数为工业化生产提供了依据。     

酶法水解真鲷鱼皮和鱼鳞制取胶原蛋白肽

以真鲷鱼鱼皮、鱼鳞为材料,研究了酶法制取胶原蛋白肽工艺。以水解度为指标,研究蛋白酶种类、酶解条件对水解度的影响,并采用正交试验对鱼皮、鱼鳞胶原肽制备工艺进行优化。结果表明,采用胰蛋白酶水解鱼皮,在加酶量950 U/g,pH 7.0,温度55℃,料液比1︰8,酶解反应6 h的优化条件下,胶原蛋白时水解度最高,达到29.73%;高压液相色谱(HPLC)分析表明,水解液中甘氨酸含量最高,不含色氨酸,符合胶原蛋白氨基酸特征。     

罗非鱼鱼鳞与珍珠贝外套膜胶原蛋白酶解液的钙螯合能力对比研究

利用Ⅰ-型胶原蛋白多肽制备螯合钙的研究已有较多报道。为了探索水产Ⅴ型胶原蛋白肽的钙螯合能力,利用4种酶酶解罗非鱼鱼鳞胶原蛋白(Ⅰ-型胶原蛋白)与珍珠贝外套膜胶原蛋白(Ⅴ-型胶原蛋白),得到胶原蛋白多肽,对鱼鳞胶原蛋白肽与珍珠贝外套膜胶原蛋白肽的钙螯合率做对比。发现4种酶中,无论用哪种单独处理得到的珍珠贝外套膜胶原蛋白肽均比同种酶处理得到的鱼鳞胶原蛋白肽钙螯合率高,且木瓜蛋白酶处理的2种胶原蛋白肽钙螯合率最高,分别为28.2%(鱼鳞)和34.5%(外套膜)。另外,对上述2种胶原蛋白肽利用5000 u的超滤膜分别过滤后,进行钙螯合率对比。结果,相对分子质量小于5000 u的V型胶原蛋白肽具有更强的钙螯合能力。该研究为珍珠贝外套膜的开发和利用提供了新的理论依据。     

鲢鱼鳞胶原蛋白的制备及性质研究

采用胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶3种蛋白酶对鱼鳞中的胶原蛋白进行初步提取,选取效果最好的酶用正交实验优化胶原蛋白制备工艺。结果表明,用胃蛋白酶提取鱼鳞胶原蛋白效果最佳,最佳工艺条件为:40℃、48h、酶量4%、pH2,提取率为56.8%。经SDS-PAGE分析,所提取胶原蛋白分子量主要分布在30.0～94.0ku之间。氨基酸组成分析表明,鲢鱼鳞酶解蛋白液中甘氨酸(Gly)含量最高,脯氨酸(Pro)和谷氨酸(Glu)含量次之,而半胱氨酸(Cys)与酪氨酸(Tye)含量较低,符合I型胶原蛋白的组成特征。鱼鳞胶原蛋白随温度的升高黏度下降,乳化性次于对照的I型胶原蛋白。     

鮰鱼皮胶原蛋白肽酶解法制备工艺条件研究

以鮰鱼鱼皮为原料,选用多肽水解酶,分别从酶解时间、加酶量、酶解温度和酶解pH值等因素来研究多肽水解酶对鮰鱼皮酶解所形成肽含量的影响,并通过正交试验优化了酶解条件,其最佳酶解条件为加酶量0.5%,酶解pH值为8.0,酶解温度55℃和酶解时间3.5h,所得的水解液中多肽含量为18.84mg/mL,且鱼皮胶原蛋白肽中分子量在180Da~5000Da的占94.89%。     

鲢鱼鱼鳞胶原蛋白抗氧化活性肽提纯及结构鉴定研究进展

为了利用鲢鱼鱼鳞生产胶原蛋白,采用生物酶解技术制备胶原蛋白抗氧化活性肽,可以提高水产品加工附加值且更好地保护环境。本文综述了鲢鱼鱼鳞胶原蛋白抗氧化活性肽的不同制备方式(包括固相化学合成法、液相化学合成法、酶水解法、DNA重组法等)和分离纯化方法(包括超滤法、离子交换色谱法、凝胶色谱法、反相高效液相色谱法等),并对其结构鉴定方式(包括质谱分析、连续流快原子轰击质谱、电喷雾离子化质谱、基质辅助激光解析等)做了阐述,以期为鲢鱼鱼鳞胶原蛋白抗氧化活性肽的进一步开发利用提供理论依据。     

酶法制取罗非鱼鱼鳞胶原蛋白寡肽的工艺

利用酶工程技术,以罗非鱼鱼鳞为研究对象,研究开发罗非鱼鱼鳞胶原蛋白寡肽制品。以蛋白酶种类、底物浓度、酶解时间、加酶量、温度、pH为实验因素,以胶原蛋白的提取率、平均分子量等为指标,确定酶解最佳条件为:在pH6,温度50℃,底物浓度150 g/L,加酶量1%MG+1%HHM的条件下,水解12 h,可得胶原提取率为55%,平均分子量为920 u左右。     

复合酶法制备高纯度鱼基质胶原蛋白肽

利用废弃的青鱼鱼鳞制备胶原蛋白肽,不仅能够减少环境污染,还可以明显提高鱼类加工废弃物的综合利用,提高经济效益。采用青鱼鱼鳞为原料,通过测定胶原蛋白溶出率及脱钙率,优化温水清洗及盐酸脱钙的预处理条件;测定酶解液水解度及低聚肽占成品百分含量,确定并优化复合酶水解的条件,得到所需的肽。最佳工艺条件:(1)采用料液比为1∶15的50℃温水水洗2 h,可得表面无杂质、胶原蛋白溶出率仅为2.2%的鱼鳞;(2)在0.4 mol/L盐酸与料液比为1∶10条件脱钙30 min,脱钙率达94%,而其工艺过程中的胶原蛋白溶出率仅有0.15%;(3)采用2 000 U/g的木瓜+菠萝+碱性蛋白酶(1∶1∶2),50℃自然p H下酶解5 h,获得水解度47%的胶原蛋白低聚肽,其分子质量主要分布在180~1 000 u和1 000~2 000 u两段,含量分别为73.3%和16.6%。成品胶原蛋白低聚肽颜色为白色泛微黄,具有很好的溶解性。     

海蜇胶原蛋白肽的生物活性研究

以海蜇加工下脚料为原料提取胶原蛋白,酶解制备胶原蛋白肽并对酶解液进行抽滤分离,并对所得不同分子量的胶原蛋白肽进行生物活性研究。结果表明:抽滤分离到四种不同分子量的胶原蛋白肽:分子量>10 kDa(JCP1)、分子量3~10 kDa(JCP2)、分子量1~3 kDa(JCP3)和<1 kDa(JCP4)。生物活性研究表明,JCP1具有最强的超氧阴离子自由基清除能力和酪氨酸酶双酚酶抑制效果,其IC₅₀值分别为22.6和11.96 mg/mL,JCP1对酪氨酸酶的抑制类型为可逆混合竞争型抑制;JCP3具有最强的还原力、羟自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力和血管紧张素转换酶(ACE)抑制活性,其IC₅₀值分别为14.9、2.21、0.61和15.8 mg/mL;JCP4具有最强的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力,其IC₅₀值为28.3 mg/mL。     

不同鱼鳞胶原蛋白黏度特性研究

以四种鱼鳞为原料,用胃蛋白酶提取鱼鳞胶原蛋白,对胶原蛋白的分子量与不同条件影响下的黏度进行了研究。结果表明:同条件下制得的胶原蛋白分子量,鲤鱼主要分布约在94·0kDa以上,草鱼主要分布在约70·0kDa以上,鲫鱼主要分布约在65·0kDa以上,鲢鱼鱼鳞胶原蛋白分子量主要分布约在60·0kDa以上。鱼鳞胶原蛋白的黏度随着浓度的增加而增加;pH在3～4之间时,四种鱼鳞胶原蛋白黏度最大;NaCl与CaCl2对四种鱼鳞的胶原蛋白黏度的影响都呈现出相同的趋势,两者都使胶原蛋白黏度随其浓度增加而减小,但CaCl2对黏度的影响比NaCl的影响幅度变化大;四种鱼鳞胶原蛋白的黏度随丙三醇和乙醇的浓度增加而增加;鲢鱼胶原蛋白变性温度约为26℃,鲫鱼胶原蛋白变性温度约为23℃,草鱼胶原蛋白变性温度约为22℃,鲤鱼胶原蛋白变性温度约为24℃。     

鱼鳞胶原蛋白的酶法提取工艺研究

以草鱼鱼鳞为原料,采用酶解法提取鱼鳞中的胶原蛋白,用正交实验优化提取工艺,并测定了鱼鳞的基本组成成分和鱼鳞胶原蛋白的氨基酸组成。     

罗非鱼皮/鳞胶原蛋白肽加工性能及抗氧化性质比较研究

为探究企业提供的5种不同标称分子量的罗非鱼鱼皮和鱼鳞胶原蛋白肽的加工性能及其抗氧化活性,对几种胶原蛋白肽产品的吸湿性、吸油性、乳化性、起泡性、还原力、超氧阴离子自由基(O2-·)以及羟自由基(·OH)清除效果进行了系统的研究比较。结果表明,采用凝胶渗透色谱(gel permeation chromatography,GPC)测得标称分子量为1、3、5 k Da罗非鱼鱼皮胶原蛋白肽的重均相对分子质量分别为823、1 196、2 753 Da,标称分子量为3、5 k Da罗非鱼鱼鳞胶原蛋白肽重均相对分子质量分别为1 189、1 926 Da;标称为5 k Da的鱼鳞肽吸湿性最强,为0.26 g/g;标称为1 k Da的鱼皮肽吸油性最强,为2.57 m L/g;标称为5 k Da的鱼鳞肽乳化性最强,达到51.8%,5 h内乳化稳定性最优;5种产品的起泡性很接近,在165%~170%之间;60 min内,5 k Da的鱼皮肽和鱼鳞肽起泡稳定性均较好;以铁氰化钾还原法、超氧阴离子自由基(O2-·)和羟自由基(·OH)法对5种肽产品的抗氧化性进行分析显示,肽产品3种抗氧化能力均随样品浓度增大而增强;肽产品的还原力和O2-·清除效果略差于维生素C,5种产品中标称为1 k Da鱼皮肽的还原力最佳,标称5 k Da罗非鱼鱼鳞肽O2-·清除能力最佳;而标称3 k Da和5 k Da的罗非鱼鱼鳞胶原蛋白肽对羟自由基(·OH)的清除效果则比维生素C显优,其中5 k Da的鱼鳞肽对羟自由基(·OH)的清除效果最高达到84%;肽产品的抗氧化性与肽的分子量和来源有密切关系。研究表明,5种肽产品的标称分子量与实际分子量均有一定的差异,但具有良好的加工性和较好的抗氧化性,研究结果可为这5种肽的进一步开发利用提供支持。     

木瓜蛋白酶制备草鱼鳞胶原肽的工艺优化及产物特性分析

以草鱼鱼鳞为对象,研究木瓜蛋白酶酶解条件对鱼鳞蛋白酶解产物水解度和氮收率的影响,以获得较高氮收率及水解度的鱼鳞胶原肽。结果表明,水解温度、起始pH值、底物浓度和加酶量对木瓜蛋白酶水解产物的水解度和氮收率都有显著影响(p<0.05);木瓜蛋白酶在底物浓度为5%、起始pH值为5.0、加酶量为3000 U/g蛋白、水解温度为60℃条件下水解鱼鳞120 min,鱼鳞水解产物的水解度和氮收率都较好,其水解度为12.68%、氮收率为89.42%;且水解产物在酸性、中性及碱性条件下的溶解性均在97%以上,分子量呈连续分布,主要分布在200～ 5000 u之间。