冻干保护剂对植物乳杆菌的代谢特性的影响

通过分析植物乳杆菌Lactobacillus plantarum CGMCC 6016(L. P. dy-1)冻干菌粉发酵后胞内游离氨基酸、有机酸、菌体蛋白的谱图变化,对比研究了不同冻干保护剂对L. P. dy-1冻干菌粉代谢特征的影响。结果显示,直接活化组L. P. dy-1的胞内氨基酸总量为625.23 μg/100 μL,10%菊粉保护剂组有所增加,为753.72 μg/100 μL;22.4%菊粉保护剂组、菊粉复合保护剂组和脱脂乳复合保护剂组则相对减少;直接活化组L. P. dy-1的胞内有机酸总量为62.84 mg/L,冻干保护剂组均显著降低,其中菊粉复合保护剂组与直接活化组最为接近,为52.99 mg/L;不同菊粉保护剂组冻干菌粉发酵后,菌体蛋白的谱图较为相近,且与直接活化组差异不大,脱脂乳复合保护剂组较未冻干菌体蛋白谱差异明显,表现为有较多条带的缺失,且谱带较浅。结果表明,与常用的脱脂乳复合保护剂相比,菊粉保护剂,尤其是菊粉复合保护剂的添加,能够使植物乳杆菌冻干菌粉的代谢特性更接近正常组。     

浩乳德用直投式发酵剂保护剂配方优化及应用

以植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）686为试验菌株,以甘油、山梨醇、脱脂乳、葡萄糖、菊粉、海藻糖、谷氨酸钠和谷胱甘肽为保护剂,以冻干存活率为评价指标,通过单因素试验及响应面试验优化发酵剂保护剂配方,用直投式（DVS）发酵剂制作浩乳德（奶豆腐）,并对其品质进行评价。结果表明,菌株686最佳保护剂配方为脱脂乳添加量12.5 g/100 mL、海藻糖添加量6.0 g/100 mL及谷氨酸钠添加量12.5 g/100 mL。在此优化配方条件下,菌株冻干存活率为81.59%。扫描电镜（SEM）观察结果表明,添加最优冻干保护剂的乳酸菌686完整无破碎,用其制作浩乳德的理化指标、鲜味及丰富度均有极大改善。     

直投式产γ-氨基丁酸植物乳杆菌冻干保护剂生产工艺的优化

采用单因素实验和正交实验对产γ-氨基丁酸(γ-amino butyric acid,GABA)的植物乳杆菌Lp-Lw-131冻干保护剂进行筛选和优化,得到最佳保护剂配方为脱脂乳粉15.0g/L,蔗糖20.0g/L,麦芽糊精25.0g/L,甘油3.0m L/L。冻干后存活率为75.3%。将植物乳杆菌添加与未添加保护剂冻干后得到的菌粉进行电镜观察,添加保护剂的菌体结构和形态保持较好。     

保加利亚乳杆菌冷冻干燥保护剂的研究

为获得对保加利亚乳杆菌最佳的真空冷冻干燥保护剂的配方,在以10％脱脂乳为基础保护剂的情况下,采用单因素和正交试验设计,以冻干后的存活率为指标,考察了不同冻干保护剂对保加利亚乳杆菌冷冻干燥的保护效果,获得了最优的保护剂配方,即脱脂乳100 g/L,谷氨酸钠25 g/L,抗坏血酸0.5 g/L,甘油60mL/L,酵母浸粉1 g/L.使用此保护剂配方,保加利亚乳杆菌冻干后的存活率可达60.59％.     

植物乳杆菌R23冻干保护剂的优选

目的:筛选对植物乳杆菌R23菌体细胞具有良好保护作用的冻干保护剂,为高活力菌剂的制备提供技术支撑。方法:通过均匀试验与正交试验相结合的方法,获得适宜的冻干保护剂成分与配比。结果与结论:植物乳杆菌R23的冻干保护剂配方:甘油2.5%,谷氨酸钠1.0%,苹果酸钠2.2%,海藻糖1.0%,山梨醇1.0%。在此条件下细胞存活率达95.3%,菌体含量7.71×1011cfu/g。     

真空冷冻干燥保护剂对植物乳杆菌67黏附能力的影响

黏附是乳酸菌在机体内发挥益生作用的关键，研究冻干保护剂对乳酸菌黏附能力的影响有助于益生菌产品的开发及其功能的进一步挖掘。研究单一保护剂对真空冷冻干燥后植物乳杆菌67的黏附率和存活率等的影响，筛选出保护效果较优的单一保护剂；并以黏附率和存活率等为指标优化保护剂配方，探究优化的复合保护剂对冻干后菌株67表面微观形态、黏附Caco-2细胞能力及其抑制肠道致病菌黏附Caco-2细胞能力的改善作用。结果表明，菌株67在分别去除了脱脂乳(skim milk, S)、菊粉(inulin, L)、蔗糖(sucrose, C)、谷氨酸钠(sodium glutamate, G)及海藻糖(trehalose, T)的5种复合保护剂中冻干后，对Caco-2细胞的黏附率均显著低于其他复合保护剂(P<0.05);在分别去除L、G和山梨醇后，存活率均显著低于其他复合保护剂(P<0.05)。菌株67分别在140 g/L S、80 g/L L、60 g/L C、90 g/L G及100 g/L T中冻干后对Caco-2细胞的黏附率均大于5.85%,显著高于各自保护剂的其他浓度(P<0.05);分别在...     

响应面法对干酪乳杆菌冻干保护剂的优化

采用响应面方法,以存活率为指标优化了干酪乳杆菌冻干保护剂的配方。Plackett-Burman实验表明,脱脂乳、乳糖和谷氨酸钠对存活率具有显著的影响,通过中心复合实验进一步优化保护剂的比例,当脱脂乳、乳糖和谷氨酸钠的质量浓度分别为15.8 g/100 mL,5.73 g/100 mL和0.42 g/100 mL时细胞存活率为92.4%,明显高于不添加保护剂时细胞的存活率(5.25%)。     

植物乳杆菌B002冻干工艺的条件优化

以植物乳杆菌B002为目标,研究了该菌株在冻干过程中菌泥和保护剂平衡时间、预冷冻时间和冻干保护剂对菌粉存活率的影响。结果表明,在以质量浓度100 g/L脱脂乳为基础保护剂的条件下,4℃,6 000 r/min离心15 min,菌泥和保护剂在室温下平衡40 min,厚度5 mm,-45℃预冷冻2 h,复合保护剂为质量浓度100 g/L的脱脂乳、80 g/L麦芽糊精、30 g/L谷氨酸钠和100 g/L海藻糖,在上述条件下真空冷冻干燥24 h,植物乳杆菌B002冻干存活率达到75.9%。     

干酪乳杆菌冻干保护剂研究

干酪乳杆菌为生产酸奶和奶酪的重要菌种,在真空冷冻干燥过程中会受到损伤,加保护剂可提高其存活率。通过计算干酪乳杆菌的存活率,利用单因素比较和响应面实验设计,确定冻干保护剂的最适配方。在单一保护剂作用筛选试验中,乳酸菌存活率较高的依次是:海藻糖、L-半胱氨酸、山梨醇、乙酸钠。复合保护剂作用中,干酪乳杆菌存活率最高的保护剂溶液配方为:海藻糖118.2g/L,L-半胱氨酸17.1g/L,山梨醇10.3g/L,乙酸钠1.7g/L,脱脂奶粉120g/L,干酪乳杆菌的存活率达98.74%。本试验结果对保存乳酸菌菌种和制备高活性发酵剂具有应用价值。     

嗜热链球菌M5-5冻干保护剂配方的优化

为了研究不同冻干保护剂在真空冷冻干燥过程中对嗜热链球菌M5-5菌体细胞的保护效果,采用单因素试验和正交试验,以冻干后的菌体存活率为评价指标,考察9种冻干保护剂在冷冻干燥过程中对M5-5菌体的保护效果,以期获得最优保护剂配方。结果表明,海藻糖、甘油和脱脂乳作为单一冻干保护剂时,菌体细胞存活率分别为43.85%、47.51%和40.86%,显著高于其他6种保护剂（P＜0.05）;通过正交试验确定冻干保护剂的最优配方为海藻糖60 g/L、谷氨酸钠20 g/L、甘油20 g/L、脱脂乳150 g/L,此时嗜热链球菌M5-5的冻干存活率可达88.41%。扫描电镜结果显示,添加保护剂配方组菌体细胞完整,表面光滑,说明该保护剂配方能有效减少冷冻干燥过程对菌体细胞的损伤。     

冻干保护剂影响植物乳杆菌代谢途径的研究

本文利用代谢组学方法,对比研究了添加不同冻干保护剂对植物乳杆菌dy-1(L.P dy-1)冻干菌粉发酵过程中代谢途径的影响。研究采用气质联用技术(GC-MS)分析菌体胞内代谢物,通过偏最小二乘法(PLS)和模式识别分析不同冻干保护剂组的差异代谢物,并结合KEGG等数据库对差异变量参与的代谢途径进行解析。结果表明,分别添加10%菊粉、22.4%菊粉、菊粉复合保护剂和脱脂乳复合保护剂,对L.P dy-1冻干粉发酵过程中的能量代谢、氨基酸代谢和脂肪酸代谢的影响存在差异:菊粉的添加量由10%增加至22.4%,冻干菌粉与直接活化菌体在发酵过程中的代谢特征差异缩小;与脱脂乳复合保护剂相比,菊粉复合保护剂能够使冻干菌体在代谢特征上更接近于直接活化菌体。贮藏温度对冻干菌粉的代谢影响显著:与4℃相比,-20℃贮藏冻干菌粉更有利于维持菌体在发酵过程中的正常代谢。     

乳双歧杆菌冻干保护剂的研究及质量评价

为探究冻干保护剂对乳双歧杆菌存活率的影响,对乳双歧杆菌的冻干保护剂进行筛选及研究。结果显示,乳双歧杆菌冻干保护剂最佳配方为菊粉2%、脱脂乳粉6%、半胱氨酸盐酸盐0.6%、海藻糖9%,此条件下存活率达到83.8%。在70℃处理30 min,存活率达62%。在-20, 4, 20和37℃贮存60 d后,活菌数仍达109 CFU/m L以上。通过添加合适的冻干保护剂,能大幅改善冷冻干燥的效果,从而提高其存活率和稳定性。     

巨大芽孢杆菌NCT-2冻干菌剂的制备及冻干保护剂响应面优化

采用真空冷冻干燥法制备巨大芽孢杆菌NCT-2菌剂,采用单因素实验并用响应面方法对冻干保护剂配方进行了优化。以巨大芽孢杆菌NCT-2冻干存活率为考察因素,从离心浓缩条件、保护基质、保护剂筛选与复配、复水种类等方面探究影响。结果表明,离心条件为5000 r/min,10 min,选取新鲜培养基为保护基质时对巨大芽胞杆菌NCT-2冻干保护效果最佳。不同复水水质对菌体存活率无较大影响。当冻干保护剂浓度为:蔗糖4.51 mg/g、海藻糖0.90 mg/g、葡萄糖9.60 mg/g时冻干存活率最高,经验证存活率最高可达91.8%。     

产肌醇的植物乳杆菌ZJ2868菌粉制备工艺

为研究产肌醇的植物乳杆菌ZJ2868的菌粉制备工艺,以菌体的存活率为指标,研究植物乳杆菌ZJ2868菌粉制备过程中的离心转速、保护剂配方、菌粉复溶条件和菌粉贮藏稳定性。结果:菌体收集的最佳离心条件:4 000 r/min、10 min。最佳冻干保护剂配方:谷氨酸钠11%、脱脂乳14%和海藻糖9.0%。最佳复溶条件:在原保护介质中复溶30 min。最佳贮藏温度:4℃。制得植物乳杆菌ZJ2868冻干菌粉的活菌数为2.90×109CFU/mL,存活率达85.4%,水分含量3.7%。本研究结果为植物乳杆菌菌粉的制备提供了试验依据。     

直投式泡菜乳酸菌发酵剂冷冻保护的研究

以蔗糖、甘露醇、山梨醇、麦芽糖、谷氨酸钠为保护剂对筛自泡菜的嗜酸乳杆菌S1的冻干保护效果进行研究表明,乳糖为最佳保护剂,菌体存活率可达到了70%以上,其次是麦芽糖、山梨醇、蔗糖、甘露醇。对冻干前后及未加保护剂的菌体作电镜观察表明,所选保护剂对菌体有很好的保护作用。     

山梨醇、甘露醇及甜菜碱等对两歧双歧杆菌冻干的影响

通过单因素实验,研究了NaCl、山梨醇、甘露醇、谷氨酸、谷氨酸钠、甜菜碱添加到MRS优化培养基中对双歧杆菌冻干存活率和单位菌粉活菌数的影响,确定了适合两歧双歧杆菌最佳冻干条件。结果表明:添加物NaCl、山梨醇、甘露醇、谷氨酸、谷氨酸钠、甜菜碱的浓度分别为0.5%、0.6 g/L、0.9 g/L、0.3 g/L、0.2 g/L、0.4 g/L时双歧杆菌冻干存活率分别达到最大。     

萧山萝卜干发酵乳酸菌冻干保护剂的优化研究

采用响应面分析法优化乳明串珠菌冷冻干燥的保护剂配方。以菌体存活率为指标,采用Plackett-Burman设计法筛选出脱脂乳、谷氨酸钠和硫酸锰3个显著因素。通过最陡爬坡试验确定3因素的水平并作为响应面优化试验的中心点。利用Box-Behnken优化设计建立菌体存活率与3因素的回归方程,并通过响应面分析各因素对响应值的效应关系。获得最佳保护剂各组分配比为:脱脂乳23.79 g/100 mL,谷氨酸钠4.37 g/100 mL,硫酸锰0.08 g/100 mL,在此条件下预测的菌体存活率为80.84%。应用优化保护剂进行3次重复冻干试验,菌体冻干存活率的平均值为80.80%,与预测值基本相符,表明该模型具有应用意义。     

冷冻干燥对乳酸菌代谢活力的影响

以保加利亚乳杆菌和植物乳杆菌ST-Ⅲ为研究对象,用15%蔗糖、10%海藻糖、15%蔗糖＋2%谷氨酸钠及10%脱脂乳为冷冻保护剂,与不加冷冻保护剂的样品进行冻干后菌种活力的对比,测定冷冻干燥后菌体中己糖激酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶的活力,胞外蛋白及胞内Ca2＋的浓度变化。结果表明：冷冻干燥对菌体的己糖激酶和丙酮酸激酶影响不显著,对乳酸脱氢酶具有显著性的影响。同时,不加保护剂菌体的胞外蛋白含量明显高于添加保护剂的,而胞内Ca2＋却远低于其他组。这一结果说明,冷冻干燥使代谢关键酶如乳酸脱氢酶失活,同时对细胞膜造成了损伤,从而引起细胞代谢活力的下降。     

植物乳杆菌YI-Y 2013冻干保护剂配方优化

为制备鲜湿米粉发酵剂,以分离自米粉自然发酵液的植物乳杆菌YI-Y 2013的菌体存活率为目标,在单因素试验基础上,经过Plackett-Burman试验筛选出有显著效果的3种保护剂:山梨醇、麦芽糊精和甘油,进一步通过中心组合试验设计和响应面分析得到显著性的拟合回归方程。结果表明,最佳保护剂配方为:山梨醇浓度1.1g/100g,麦芽糊精浓度24.8g/100g,甘油浓度2.4g/100g,该条件下菌体存活率为(76.08±2.68)%,与预测值较为接近。     

泡菜直投式乳酸菌发酵剂的制备

以泡菜生产用的戊糖片球菌PP、植物乳杆菌P158为菌种,通过补料和等pH培养的方式实现菌种的高密度培养,以10%脱脂乳为基础,添加海藻糖、蔗糖、谷氨酸钠为冻干保护剂,优化预冻条件及保护剂配方。结果表明,采用补料与等pH培养时,戊糖片球菌PP与植物乳杆菌P158的最高活菌数分别可达9.01×109cfu/mL和2.14×1010cfu/mL;戊糖片球菌PP、植物乳杆菌P158的最适预冻条件均为液氮中预冻15min;戊糖片球菌PP的最适保护剂组合为:海藻糖7%,蔗糖7%,谷氨酸钠3%;植物乳杆菌P158的最适保护剂组合为:海藻糖7%,蔗糖7%,谷氨酸钠5%;在最适培养及冻干条件下,戊糖片球菌PP和植物乳杆菌P158的冻干存活率分别达到95.8%和75.6%。