含血管紧张素转化酶抑制肽的酪蛋白水解物与紫薯提取物联用对原发性高血压大鼠血压的影响

以富含血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）抑制肽的酪蛋白水解物和富含花青素的紫薯提取物为原料,灌胃12 周龄雄性原发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats,SHR）和正常雄性Wistar大鼠,研究富含ACE抑制肽的酪蛋白水解物和紫薯提取物对SHR血压的影响。用不同剂量的酪蛋白水解物（10、20、30、40 mg/kg,以体质量计,下同）和紫薯提取物（5.4、10.8、21.6、32.4 mg/kg,花青素含量为9.25%）分别灌胃SHR和Wistar大鼠。然后选用酪蛋白水解物的2 个剂量组分别与紫薯提取物的3 个剂量组联合灌胃SHR。用智能无创血压计测量SHR血压变化。结果表明：富含ACE抑制肽的酪蛋白水解物和富含花青素的紫薯提取物,在实验灌胃剂量范围内均具有较好的降压效果,而且两者联用进行单次灌胃后降压效果显著提高（P＜0.05）。其中酪蛋白水解物（10 mg/kg）分别与紫薯提取物3 个剂量（5.4、10.8、21.6 mg/kg）联合灌胃SHR后4 h或者5 h,血压分别降低了（24.67±4.46）、（28.47±3.96）、（41.51±4.89） mmHg。用酪蛋白水解物（20 mg/kg）分别与紫薯提取物的3 个剂量（5.4、10.8、21.6 mg/kg）联合灌胃SHR后5 h或者6 h,SHR血压分别降低了（38.03±3.46）、（43.92±2.92）、（47.20±4.31） mmHg。两者联用灌胃后对Wistar正常大鼠的血压无影响。另外,酪蛋白水解物2 个剂量（10、20 mg/kg）和紫薯提取物（10.8 mg/kg）分别联合使用,间隔4 h灌胃1 次,每天灌胃2 次,SHR大鼠血压较灌胃前分别降低了（28.20±3.02）、（43.54±2.55） mmHg,而且能较长时间维持在较低血压水平。因此,富含ACE抑制肽的酪蛋白水解物和富含花青素的紫薯提取物联合食用对SHR的降压具有显著效果。     

HPLC法对比分析不同的蓝莓提取物

采用高效液相色谱法对两个不同厂家的蓝莓提取物和新鲜蓝莓中花青素的含量和种类进行对比,结果显示,A蓝莓提取物的花色苷种类单一,以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷为主,花青素含量40.96%;B蓝莓提取物的花色苷种类丰富,花青素含量43.15%;新鲜蓝莓花青素含量4.45mg/g。虽然两个样品均达到了产品规格(花青素含量≥25%),但A蓝莓提取物的色谱图与新鲜蓝莓果的的色谱图不符,该方法能明显对比出不同厂家蓝莓提取物的差异。     

蓝莓花色苷对东莨菪碱诱导小鼠学习记忆障碍的影响

研究蓝莓花色苷对东莨菪碱诱导小鼠学习记忆障碍的影响,并初步探讨其作用机制。雄性KM种小鼠60只,随机分为6组,分别为空白对照组、模型对照组、阳性对照组(吡拉西坦片200 mg/kg·d)、蓝莓花色苷高剂量组(400 mg/kg·d)、蓝莓花色苷中剂量组(200 mg/kg·d)、蓝莓花色苷低剂量组(100 mg/kg·d),各组连续给药14 d,从实验第15天开始,除空白对照组外,其余各试验组均注射东莨菪碱2 mg/kg,建立小鼠记忆障碍模型,末次给药2 h后,进行跳台试验训练。测试完毕,断头处死小鼠,检测蓝莓花色苷对脑组织乙酰胆碱酯酶(Ach E)活性的影响,免疫印迹法检测海马组织NF-κB p65和Cleaved caspase-3的影响。结果表明:蓝莓花色苷各剂量组能够明显延长小鼠跳台潜伏期,减少5 min内出现的错误次数(P0.05),且可以降低小鼠脑组织海马及皮层ACh E活性(P0.05)。免疫印迹结果表明,蓝莓花色苷能够降低东莨菪碱诱导小鼠海马组织NF-κB p65和Cleaved caspase-3蛋白的表达。蓝莓花色苷对东莨菪碱模型小鼠的学习记忆能力具有一定的改善作用,其机制可能通过影响NF-k B信号转导通路而抑制东莨菪碱诱导的氧化应激和炎性反应。     

超高压提取蓝莓渣花色苷的工艺优化及其抗氧化活性

本文旨在优化蓝莓渣花色苷的超高压提取工艺并考察其抗氧化活力。本文以蓝莓渣为原料,采用单因素实验和Box-Behnken响应面分析法对蓝莓渣花色苷的提取工艺进行优化,以维生素C（V_C）为阳性对照,通过DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率和FRAP铁离子还原能力的测定,评估蓝莓渣花色苷的体外抗氧化活性,并采用高效液相色谱法（HPLC）对蓝莓渣花色苷组分进行分析。结果表明:蓝莓渣花色苷的最佳提取工艺条件为:提取压力400 MPa,提取时间9 min,乙醇浓度60%,料液比1:20 g/mL,此条件下花色苷的提取量为5.93±0.06 mg/g,与传统溶剂浸提法（CSE）、超声波辅助提取法（USE）相比,超高压辅助提取（UPE）法的提取效果更好,花色苷提取量分别提高25.11%、10.02%;蓝莓渣花色苷对DPPH?清除能力最强,与同浓度的V_C相比,无显著性差异（P>0.05）;其对?OH的清除率以及FRAP铁离子还原能力则显著弱于同浓度V_C（P<0.05）;HPLC分析结果表明,蓝莓渣花色苷包含13种花色苷单体,其中锦葵色素-3-半乳糖苷含量最高。因此,超高压辅助提取是一种高效的蓝莓渣花色苷提取方法,且蓝莓渣花色苷因其较强的抗氧化活性具有较好的应用价值。     

海苔发酵提取物对原发性高血压大鼠的降压效果研究

使用可以产生GABA的植物性乳酸菌对海苔进行发酵,得到富含10.5%GABA的海苔发酵提取物。本实验验证了海苔发酵提取物对原发性高血压模型大鼠(SHR)的降压效果。单次经口灌胃给药实验中,分别以2mg/kg·bw和0.2mg/kg·bw剂量的海苔发酵提取物一次性灌胃给药,给药后2、5、9、24h进行血压测定。结果表明,海苔发酵提取物2mg/kg·bw剂量组在给药后5h和24h均有显著降压效果(p<0.05,p<0.01)。长期摄食给药实验中,含有海苔发酵提取物0.001%和0.003%的饲料剂量组对成长期SHR和老龄期SHR分别摄食给药,给药后每2～3d进行一次血压和体重测量,结果显示含有海苔发酵提取物0.003%的饲料剂量组使成长期SHR和老龄期SHR血压均显著下降(p<0.01,p<0.05)。     

大孔树脂-中压柱层析联用分离纯化蓝莓花色苷

以蓝莓果实为原料,采用大孔树脂-中压柱层析联用分离纯化蓝莓花色苷。分别比较6 种不同类型树脂 对蓝莓花色苷静态吸附-解吸效果,优化大孔树脂分离纯化蓝莓花色苷的工艺。结果表明：D101大孔树脂对蓝莓 花色苷的分离效果最佳,对花色苷的吸附属于多分子层吸附。在柱压力为1 MPa、温度25 ℃、上样液质量浓度为 0.073 mg/mL、洗脱剂乙醇体积分数为80%、流速5 mL/min条件下,经D101大孔树脂柱分离后,花色苷纯度从5.53% 增加到75.58%,提高了12.67 倍。采用Sephadex LH-20中压柱层析对蓝莓花色苷进一步分离纯化,主要得到1 种花 色苷组分,通过高效液相色谱和高效液相色谱-电喷雾质谱联用对蓝莓花色苷进行定性和定量分析,确定该组分为 矢车菊-3-O-葡萄糖苷,纯度达到90.88%。     

蓝莓果渣花色苷大孔树脂纯化工艺研究

以蓝莓果渣为原料,利用大孔树脂分离纯化蓝莓果渣花色苷。对比了D101和AB-8两种不同极性的大孔树脂静态吸附和解吸效果。结果表明,AB-8型大孔树脂吸附率和解吸率分别为88.5%、64.7%;D101型大孔树脂吸附率和解吸率分别为86.7%、61.2%,AB-8型大孔树脂吸附率和解吸率均优于D101型大孔树脂,故选用AB-8型大孔树脂对蓝莓果渣进行纯化试验。AB-8型大孔树脂最佳吸附和解吸条件为吸附平衡时间4 h,解吸平衡时间4 h,花色苷溶液pH 3.0,解吸液pH 3.0,解吸液乙醇体积分数60%,上样质量浓度1 mg/mL,上样流速1 mL/min,洗脱流速1 mL/min。纯化后蓝莓果渣花色苷色价约为纯化前的3倍,糖和蛋白质等杂质大幅降低,纯度有了较大提高。     

超声-闪式联合法制备蓝莓花色苷提取物及其体内外抗肿瘤活性评价

以蓝莓为原料,采用超声-闪式联合法提取花色苷,探究超声功率、闪提转速、提取时间、料液比和乙醇体积分数对花色苷含量的影响。在单因素试验的基础上,利用遗传算法优化超声-闪式联合法提取蓝莓花色苷的工艺参数。体外实验采用MTT法和Annexin V-FITC/PI双标记染色法探究不同质量浓度花色苷提取物对S180细胞增殖和凋亡的影响;体内实验利用S180荷瘤小鼠模型和酶联免疫吸附测定法探究花色苷提取物的抗肿瘤活性及其机制。结果表明:超声-闪式联合法提取蓝莓中花色苷的优化工艺参数为提取时间10 min、超声功率450 W、闪提转速8 400 r/min、料液比1∶30(g/mL)和乙醇体积分数68%,在此条件下花色苷含量和纯度分别为(2.71±0.08)mg/g和(31.79±0.53)%。体外实验发现花色苷提取物能有效抑制S180细胞增殖,诱导S180细胞凋亡,使细胞阻滞于S期。荷瘤小鼠体内抑制肿瘤实验表明:花色苷提取物低、中、高剂量组瘤体质量显著低于模型对照组(P0.05),抑瘤率分别为26.36%、33.33%、46.51%;花色苷提取物低、中、高剂量组荷瘤小鼠血清中的IL-12和TNF-α含量显著高于模型对照组(P0.05),而IL-10含量显著低于模型对照组(P0.05)。综上,超声-闪式联合提取法是一种高效的花色苷提取方式,所得的花色苷提取物可通过诱导细胞凋亡和增强机体免疫抑制肿瘤生长。     

野生蓝莓酒皮渣花色苷及其抗氧化活性研究

该研究比较了蒸馏前后野生蓝莓酒皮渣中的总酚及花色苷含量、花色苷单体的组成和抗氧化活性。结果表明,蓝莓酒皮渣中总花色苷含量为（8.64±0.13） mg/g,总酚含量为（77.24±1.42） mg/g,抗氧化活性为Trolox当量浓度（3.59±0.11） μmol/g;单体花色苷含量较多的是二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷（29.90%）、3′-甲基花翠素-3-O-葡萄糖苷（21.31%）和花翠素-3-O-葡萄糖苷（20.44%）。蒸馏后,皮渣中的总酚及花色苷含量分别下降为（68.11±1.20） mg/g和（5.05±0.09） mg/g,其单体降解率变化在21.64%～43.47%。其中,二甲花翠素-3,5-O-二葡萄糖苷稳定性最差,降解率为43.47%;花青素-3-O-葡萄糖苷较为稳定,降解率为21.64%;Trolox当量浓度下降为（3.07±0.07） μmol/g,皮渣抗氧化能力也降低了14.64%。因此,野生蓝莓果酒发酵产生的皮渣具有较高的利用价值,开发时应尽量避免高温处理。     

蓝莓果渣花色苷超声提取工艺优化及组成分析

为了充分利用加工副产物蓝莓果渣,提高蓝莓的综合利用价值,超声辅助提取蓝莓果渣中花色苷提取工艺得到了研究优化。在考察了提取溶剂、超声功率、超声时间、料液比和pH 5个因素对花色苷提取得率影响的基础上,根据Box-Behnken(BBD)试验设计原理,通过响应面分析优化出超声辅助提取蓝莓果渣中花色苷的最佳工艺条件为:乙醇55%(v/v)、超声功率367.57W、超声时间18.49 min、料液比1:40 g/mL、pH=1。采用最佳提取工艺条件平均提取得率为4.12mg/g,与优化模型预测值4.13 mg/g基本一致(相对误差为0.24%),验证了模型的可靠性。采用高效液相色谱与质谱联用(HPLC-MS)对花色苷提取物进行成分分析,得到3种游离花青素、11种花色苷成分,其中蓝莓果渣中花色苷成分最多的是锦葵色素糖苷(43.20%)和飞燕草素糖苷(28.97%)以及牵牛花色素糖苷(17.50%)。该文为蓝莓果渣的有效利用提供了基础和依据。     

蓝莓加工过程中出汁率及花青素的稳定性研究

研究果胶酶对蓝莓出汁率的影响,对果胶酶提高蓝莓出汁率的工艺条件进行优化,并研究了pH值、温度、光 照、金属离子以及部分添加剂对蓝莓果汁中花青素稳定性的影响。结果表明：果胶酶的最佳酶解条件为果胶酶添加量（质 量分数）0.06%、酶解温度35 ℃、酶解时间2 h。在此条件下蓝莓的出汁率可达到82.1%,与对照组相比,出汁率提高了 24.6%。蓝莓果汁中的花青素在pH≤3时比较稳定;对光和高温比较敏感。VC可以增加花青素的稳定性,而苯甲酸钠以及 蔗糖对花青素的稳定性无显著影响。K+、Na+、Ca2+、Cu2+、Fe2+对果汁中花青素的稳定性无显著影响;Fe3+以及浓度达到 0.1 mol/L的Mg2+对果汁中花青素的稳定性具有破坏作用;浓度低于0.05 mol/L的Mg2+能增加果汁中花青素的稳定性。     

不同品种蓝莓品质特性及聚类分析

通过对山东省14 个主栽蓝莓品种的感官品质、营养品质、加工品质等指标进行测定,并采用聚类分析法评价蓝莓品种的综合品质,从而筛选出品质较佳的蓝莓品种。结果表明：不同品种蓝莓品质存在差异,以抗氧化物质含量、出汁率、固酸比差异较大。品种‘L5’花色苷含量最高（617.46 mg/100 g）且固酸比最大（47.78%）;‘蓝塔1’出汁率最高（78.43%）;‘蓝塔2’总糖含量最高（10.75%）。14 个品种可聚为5 类,第1类为‘37-1’、‘奥尼尔’、‘北陆’和‘B’;第2类为‘埃利奥特1’、‘布尔吉塔’、‘蓝丰’及‘蓝塔1’;第3类包括‘埃利奥特2’、‘杜克’和‘Z’;‘H34’和‘蓝塔2’聚为第4类;‘L5’为第5类。经分析初步评价,第2类为适宜加工果汁果酒的优良品种;第3类为适宜贮藏的蓝莓品种;第4类为适宜鲜食的优良品种;第5类为加工果酱、果脯的优良品种。     

辽宁主栽蓝莓品种加工适应性的研究

以10 种蓝莓品种果实为实验材料,对其理化和营养指标进行测定分析。结果表明：不同蓝莓品种间的单果质量、密度、硬度等物理指标有一定差异;不同蓝莓品种间的出汁率、总酸、糖酸比、VC、粗蛋白和花色苷的差异较大。伯克利的出汁率最大（78.47%）,杜克的出汁率最小（44.75%）。不同蓝莓品种间糖酸比范围为11.01～51.75,可溶性固形物、电导率、pH值和总酚含量差别较小,可溶性固形物含量范围为8.9%～13.3%。不同蓝莓品种间的过氧化物酶活性和多酚氧化酶活性有较大差异。通过聚类分析以及感官评定初步评价,杜克、日出为鲜食的优良品种;伯克利、北陆1和北青为适宜果汁果酒加工的优良品种;圣云、北陆3为适合加工果酱的优良品种。     

蓝莓花青素的提取工艺及其免疫调节活性

采用单因素试验和五元二次正交旋转组合设计试验优化蓝莓花青素的提取工艺,并通过体外细胞培养评价 蓝莓花青素对脾细胞增殖活力以及协同ConA促进小鼠脾细胞分泌干扰素-α和白细胞介素-2的活性。结果表明：乙 醇体积分数、料液比、提取温度和提取时间对蓝莓花青素提取率有显著影响;蓝莓花青素最佳提取工艺条件为： 酒石酸为酸化剂、乙醇体积分数74.6%～76.2%、料液比1∶6.6～1∶6.8（g/mL）、浸提温度52.5～53.4 ℃、浸提液 pH 3.0～3.1、浸提时间144.8～148.5 min,此工艺条件下蓝莓花青素的提取率均大于35 mg/g,具有促进小鼠脾细胞 增殖和协同ConA促进小鼠脾细胞分泌干扰素-α和白细胞介素-2活性,且呈一定的剂量相关性。     

蓝莓酒渣、果、酒中花色苷成分鉴定及酒渣与果中花色苷抗氧化活性比较

采用XAD-7HP大孔树脂对蓝莓果及蓝莓酒渣花色苷进行纯化,用固相微萃取小柱对蓝莓酒花色苷进行纯化浓缩。通过高效液相色谱-二极管阵列-电喷雾-串联质谱法鉴定了蓝莓果、酒渣、酒中花色苷的组成,并对蓝莓果和蓝莓酒渣花色苷的抗氧化性进行了评价。结果表明：通过XAD-7HP大孔树脂纯化所得的蓝莓果、蓝莓酒渣及利用固相微萃取小柱纯化所得的蓝莓酒中花色苷含量分别为（210.52±5.74）、（151.12±0.88）、（8.93±0.14）mg/g。蓝莓果中鉴定出11 种花色苷;蓝莓酒渣中鉴定出12 种花色苷,其中包括3 种酰化花色苷;蓝莓酒中鉴定出9 种花色苷,其中包含1 种酰化花色苷。蓝莓果和蓝莓酒渣花色苷抗氧化性实验结果表明,蓝莓果和蓝莓酒渣花色苷清除2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐自由基IC50值分别为（1.43±0.02）、（1.19±0.03）μg/mL,清除1,1-二苯基-2-苦基肼自由基IC50值分别为（3.28±0.03）、（2.41±0.01）μg/mL;蓝莓果和蓝莓酒渣花色苷清除自由基能力及还原力均显著优于VC,蓝莓酒渣花色苷抗氧化性显著强于蓝莓果花色苷。     

明胶吸附单宁酸的机理探讨及其在蓝莓汁脱涩中的应用

分别用0.01～0.11 g的明胶吸附25 mL 900 mg/L单宁酸模拟溶液,根据明胶吸附量和单宁酸去除率得到明胶的最佳用量,然后研究最佳用量的明胶对25 mL 900 mg/L单宁酸模拟溶液的吸附动力学方程和吸附等温线方程,最后研究明胶对单宁酸质量浓度为900 mg/L的25 mL蓝莓汁的脱涩效果。结果表明：吸附25 mL 900 mg/L单宁酸模拟溶液时,明胶最佳用量为0.03 g,其明胶吸附量为527.5 mg/g,单宁酸去除率为70.33%。明胶吸附单宁酸的过程符合准二级动力学方程,其吸附等温线符合Langmuir吸附方程,为单分子层吸附。当脱除单宁酸含量为900 mg/L的25 mL蓝莓汁的涩味时,明胶用量0.03 g、温度15 ℃、振荡时间20 min,在该条件下,其明胶吸附量为420.8 mg/g,单宁酸去除率为56.11%,脱涩效果良好。     

Improving the Extraction of Juice and Anthocyanins from Blueberry Fruits and Their By-products by Application of Pulsed Electric Fields

Pulsed electric field (PEF) treatments (1–10 kJ/kg at 3 kV/cm) were applied before pressing of blueberry fruits to improve the yield and quality of expressed juice as well as the recovery of anthocyanins from blueberry by-products (press cake) via solid–liquid extraction. A PEF pre-treatment at 1 kJ/kg was sufficient to significantly increase the juice yield (by 32%) with respect to the untreated sample. Higher energy input (10 kJ/kg) was most favorable for the largest increment of anthocyanin content (55%) and antioxidant capacity (36 and 41%, determined by ferric reducing antioxidant power (FRAP) and 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl hydrate (DPPH) assay, respectively) in juice. Extracts obtained from the press cake of PEF-treated blueberries at 10 kJ/kg possessed an anthocyanin content (75%) and antioxidant capacity (71 and 109%, determined by FRAP and DPPH assay, respectively) higher than that of the extracts obtained from non-treated berries press cake. HPLC analyses revealed the major classes of the detected anthocyanins as glycosides of delphinidin, cyanidin, petunidin, peonidin, and malvidin, and no significant degradation of individual anthocyanins due to PEF application was observed. The present PEF pre-treatment could be a promising approach to facilitate efficient extraction of juice and antioxidants especially anthocyanins from blueberry and their by-products.     

蓝莓汁抗坏血酸体系非酶褐变反应动力学

通过构建蓝莓汁抗坏血酸非酶褐变体系,测定蓝莓汁在贮藏（4、25 ℃和37 ℃）过程中的相关指标,并相应分别用零级、一级和复合动力学模型拟合。结果表明：褐变指数（A420 nm）符合复合动力学模型;贮藏过程中抗坏血酸不断降解,符合一级动力学模型;5-羟甲基糠醛含量的变化符合零级动力学模型。根据Arrhenius方程进行线性拟合,反映各指标随温度变化情况,在各贮藏温度下5-羟甲基糠醛的产生与褐变指数的变化呈现良好线性关系（R2≥0.949）。     

中国野生蓝莓总花青素对氯化镉诱导的慢性肝损伤的保护作用

目的:研究中国野生蓝莓总花青素对CdCl₂诱导小鼠慢性肝损伤的保护作用。方法:将50只实验小鼠随机分为以下5组,空白对照组、镉损伤组、蓝莓总花青素低、中和高剂量干预组。除空白对照组外,其他组均以1.0 mg/kg/d剂量的CdCl₂灌胃小鼠建立镉损伤模型,蓝莓总花青素低、中和高剂量干预组分别以10.0、20.0、40.0 mg/kg/day的蓝莓总花青素剂量灌胃模型小鼠,空白对照组以等体积生理盐水代替。饲喂90 d,观察小鼠的生长情况并测定肝脏Cd2+含量、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽-S转移酶(GST)含量、还原型谷胱甘肽(GSH)含量以及血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量。结果:中国野生蓝莓总花青素可极显著降低慢性肝损伤小鼠中Cd2+的蓄积以及血清中ALT和AST含量(p<0.01),显著降低肝脏中MDA含量(p<0.05),小鼠肝脏T-AOC、GST含量、GSH含量与镉损伤组相比则显著增加(p<0.05)。结论:中国野生蓝莓总花青素对CdCl₂致慢性肝损伤具有一定的保护作用。