响应面法优化超声波辅助复合酶法水解虾头蛋白的工艺

为充分提取虾头蛋白以提高虾头的利用价值,本研究以超声波辅助蛋白酶水解南美白对虾虾头蛋白,探究了蛋白酶类型、蛋白酶添加量、料液比、pH值、超声功率、超声时间、酶解温度和酶解时间等8个因素对虾头蛋白水解度的影响,并通过响应面法优化获得最佳的超声和酶解条件。结果得出,最佳提取工艺条件为:虾头泥以料液比1∶10(g/mL)调配→pH调节为7.5→超声功率180 W下处理30 min→料液中添加1%碱性蛋白酶和0.1%中性蛋白酶→50℃下酶解时间3 h→加热煮沸10 min→4000 r/min下离心20 min→取上清液,即水解蛋白液;该工艺条件下,虾头蛋白水解度可达到42.5%。     

超声波辅助葵花籽蛋白酶解条件优化

为进一步提高葵花籽蛋白酶解效率,以葵花籽粗蛋白为原料,酶解前期对其进行超声波预处理,利用碱性蛋白酶和风味蛋白酶进行分步酶解。酶解程度以水解度为评价指标并采用二次旋转正交组合设计优化超声波辅助酶解的工艺条件。结果表明:底物浓度为2%(g/mL),超声功率50W,超声波预处理时间35 min;碱性蛋白酶酶解温度55℃,pH=8.5,酶解时间1.5 h,加酶量1500U/g;风味蛋白酶酶解温度50℃,pH=7.0,酶解时间1.5 h,加酶量为3000 U/g。最终可达到最佳水解度为45.32%。     

超声波辅助酶法制备辣木籽ACE抑制肽工艺优化

为进一步提高辣木籽蛋白资源的开发利用,采用盐提法提取辣木籽蛋白,再采用超声波辅助酶法制备辣木籽ACE抑制肽。以水解度和ACE抑制率为评价指标,通过单因素实验探究超声波功率、超声酶解时间、超声酶解温度及料液比对制备ACE抑制肽的影响,采用响应面法对制备工艺条件进行优化。结果表明：超声波辅助酶法制备辣木籽ACE抑制肽的最佳酶解工艺条件为碱性蛋白酶添加量5.5 mg/mL、pH 9、超声波功率500 W、超声酶解时间1.7 h、超声酶解温度55℃、料液比1∶45,在此条件下制备的酶解物ACE抑制率达到78.32%,水解度为7.78%。以辣木籽为原料制备ACE抑制肽作为功能性蛋白肽产品,可有效提高辣木籽蛋白资源的开发利用。     

超声波对中性蛋白酶酶解谷朊粉影响的研究

以活性谷朊粉为原料,研究超声作用及超声功率对不同的底物浓度、酶浓度、反应温度、pH经中性蛋白酶水解的谷朊粉水解度的影响。结果表明,超声作用既不改变酶解反应的最适温度和pH,也不改变水解度与水解温度、pH、底物浓度、酶浓度之间关系曲线的变化趋势,但超声作用可明显提高水解度;200W的超声波对中性蛋白酶水解谷朊粉具有明显的促进作用。     

超声波辅助酶法水解鱼鳞胶原蛋白的工艺研究

采用超声波辅助木瓜蛋白酶水解鱼鳞胶原蛋白。研究超声波功率和作用时间对酶解反应的影响,应用正交设计优化酶解工艺条件。结果表明,最佳酶解工艺条件为:酶用量4 g/L、温度55℃、pH 5.5,在超声波功率为500 W、作用20 min后,继续酶解5 h。在此条件下,鱼鳞胶原蛋白的水解度为25.6%。与常规酶解方法比较,常规酶解8 h水解度为16.6%。说明超声波对木瓜蛋白酶水解鱼鳞胶原蛋白有促进作用。     

酶解法制备香菇酱工艺条件的研究

在蛋白酶水解法制备香菇酱的工艺中,首先研究了超声波对原料进行细胞破碎处理的操作条件,采用正交试验设计对影响蛋白酶水解效果的条件进行了选择优化.结果表明,超声波处理的最佳功率为200W、最佳处理时间为30min,蛋白酶水解的最佳工艺条件为酶解温度40℃、pH值4.5、酶用量1%、酶解时间60min,在此工艺条件下香菇酱的氨基酸含量为0.88%.     

超声波酶法复合提取黑豆皮中花色苷工艺优化

为高效地获得花色苷色素,通过单因素试验确定酶解条件、超声温度、料液比和超声功率对提取黑豆皮中花色苷效果的影响。以提取液中花色苷质量分数为指标,首先原料经酶解处理,酶解条件为酶用量10μg/g、酶解温度50℃、酶解时间45 min、pH 4.0;在酶解的基础上再进行超声波处理。试验确定超声波酶法复合提取黑豆花色苷最佳工艺为:料液比1∶30,超声时间为30 min,超声温度50℃,超声功率280 W,此时花色苷质量分数4.95 mg/g.     

罗非鱼排酶解工艺的研究

选用中性蛋白酶酶解罗非鱼排,制备蛋白水解液。以水解度为优化指标,考察初始pH值、酶解温度、料液比、加酶量、酶解时间对水解度的影响,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken中心组合设计和响应面分析法,确定最佳工艺条件;并在最佳工艺条件下,考察水浴、高压蒸汽、超声波和微波等预处理方式对水解度的影响。结果表明:最佳工艺条件为温度49℃,加酶量1 824U/g,水解时间6h,此时罗非鱼排水解度(DH)可达33.7%;除了110℃的高压蒸汽和180w功率的超声波预处理有助于罗非鱼排的进一步水解,其它的预处理方式均不利于罗非鱼排的后续水解。     

辣椒粕分离蛋白酶解工艺条件的优化

从辣椒粕中提取粗蛋白,建立蛋白酶水解辣椒粕分离蛋白制备呈味肽的最佳条件。以水解度和肽得率为指标,对胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶4种酶水解辣椒粕分离蛋白的效果进行比较研究。结果表明:复合蛋白酶的水解效果最佳。通过单因素试验选取复合蛋白酶作用的固液比、酶用量、酶解时间、酶解pH值及酶解温度作为试验因素,初步确立复合蛋白酶的水解条件。并通过正交试验优化最终确定复合蛋白酶水解辣椒粕分离蛋白的最佳工艺条件为固液比110(mV),酶用量2.0%,酶解时间4h,酶解pH值6.5,酶解温度50℃。通过实验验证,在该条件下,复合蛋白酶对辣椒粕分离蛋白具有较好的水解效果,其水解度为19.60%,肽得率为6.30%。     

多种酶复合制备鸡皮胶原蛋白短肽

以鸡皮为原料,采用酶法提取胶原蛋白肽。研究了酶的种类、加酶量、酶解时间、酶解温度以及pH值对水解度和多肽质量浓度的影响,采用正交实验对酶解条件进行了优化。结果表明,当采用木瓜蛋白酶+胰蛋白酶+风味蛋白酶复合水解,加酶量为0.9%、酶解时间3 h、酶解温度45℃及pH为7时,为酶解最佳条件。     

芸豆蛋白酶解工艺的研究

以芸豆蛋白为原料研究芸豆抗氧化活性肽的酶解工艺。首先以DPPH.清除率和水解度为评价指标筛选最适用酶,并采用单因素及正交实验设计优化酶解工艺。结果表明,Alcalase碱性蛋白酶对芸豆蛋白水解能力最强,酶解产物的抗氧化能力最高;最佳酶解工艺条件为底物浓度4.0%,温度55℃,加酶量2000u.g-1,pH9.0,时间6h,该条件下水解度和DPPH.清除率分别为16.16%和74.10%,比优化前分别提高4.95%和7.63%;芸豆活性肽显示出较强的抗氧化活性。     

酶法制备汉麻籽蛋白抗氧化肽

采用不同蛋白酶酶解汉麻籽蛋白,确定Alcalase 2.4L碱性蛋白酶是酶解汉麻籽蛋白制备抗氧化肽的优良酶源。通过单因素和响应面回归分析,得到Alcalase 2.4L碱性蛋白酶酶解汉麻籽蛋白的优化条件为:底物浓度50 mg/mL、水解时间2 h、温度50℃、加酶量2.2%、pH 9.4。优化酶解条件下,水解度约为20%,10 mg/ mL酶解产物的DPPH自由基清除率为82.65%,显示出较好的抗氧化活性。     

响应面法优化制备南瓜籽抗氧化肽的工艺

以南瓜籽分离蛋白为原料,采用酸性蛋白酶酶解制备南瓜籽抗氧化肽。选用加酶量、酶解温度、pH值、底物质量浓度、酶解时间作为研究对象,以酶解液对DPPH自由基的清除率为评价指标,在单因素试验的基础上,运用Plackett-Burman筛选试验确定显著因素,然后通过三因素三水平的Box-Behnken响应面分析法优化制备南瓜籽抗氧化肽的酶解工艺条件。结果表明：酸性蛋白酶酶解南瓜籽蛋白质的最佳工艺条件为：酶解温度50℃、pH2.5、酶解时间5h、底物质量浓度0.05g/mL、加酶量6000U/g pro,在此条件下,DPPH自由基清除率可达到92.82%。     

杏仁蛋白Alcalase水解工艺及其体外抗氧化活性的研究

为深入开发利用杏仁蛋白资源,采用Alcalase蛋白酶水解杏仁蛋白,以水解度为指标对酶解过程进行研究,在单因素试验基础上以水解度和DPPH自由基清除率为指标进行酶解正交试验.结果表明制备抗氧化能力较强的杏仁蛋白水解物的最佳条件为:pH 8.0,温度55 ℃,酶底比4%,底物浓度5%.在此条件下进行水解试验,水解度为21.02%,水解物对DPPH自由基的清除率为66.13%.     

银鲳酶解物抗氧化活性研究

选用胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶对银鲳蛋白进行酶解以制备蛋白酶解物,以羟基自由基清除活性为指标确定银鲳最佳水解酶。结果显示,碱性蛋白酶的水解物抗氧化活性最强。实验对碱性蛋白酶水解银鲳的酶解条件(时间、温度、pH、酶添加量和固液比)进行正交实验设计,并对最佳水解条件下所获得的酶解物进行抗氧化活性测试。结果表明,银鲳蛋白碱性蛋白酶水解物对DPPH自由基和羟基自由基具有清除作用,其自由基清除效果呈现剂量依赖性,而且银鲳蛋白水解物还具有明显还原能力。所有这些体外抗氧化数据说明,银鲳蛋白水解物有明显的抗氧化效力。     

巴旦木蛋白水解物的制备及其抗氧化活性

以巴旦木蛋白为底物,采用正交试验优化碱性蛋白酶水解巴旦木蛋白的条件,研究巴旦木蛋白肽的还原能力、对羟自由基、超氧阴离子自由基以及二苯代苦味酰基自由基的清除能力。结果表明:最优酶解工艺参数为底物浓度20%、酶浓度4%、pH值9.5、酶解温度60℃,在此条件下巴旦木蛋白的水解度为36.6%。巴旦木蛋白肽的还原能力随肽浓度的增大而增大,对OH.、O2-.以及DPPH.均具有良好的清除能力,清除效果随着巴旦木蛋白肽浓度的增大而增强,两者之间存在着量效关系,但当肽达到一定浓度时,其抗氧化效果基本不受浓度影响。     

Hydrolysis conditions for antioxidant peptides derived from enzymatic hydrolysates of sandfish (<Emphasis Type="Italic">Arctoscopus japonicus</Emphasis>)

Sandfish (Arctoscopus japonicus) meat and roe were used as natural materials for the preparation of antioxidant peptides using enzymatic hydrolysis. Meat and roe were hydrolyzed using Alcalase 2.4 L and Collupulin MG, respectively. Optimal hydrolysis conditions were determined through the effects of pH, temperature, enzyme concentration, and hydrolysis time on the radical scavenging activity of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH). The optimal hydrolysis conditions for meat hydrolysate (MHA) obtained via Alcalase 2.4 L treatment were a pH of 6.0, temperature of 70 °C, enzyme concentration of 5% (w/w), and a hydrolysis time of 3 h. The optimal hydrolysis conditions for roe hydrolysate (RHC) obtained via Collupulin MG treatment were pH 9.0, 60 °C temperature, 5% (w/w) enzyme concentration, and 1 h hydrolysis time. Under the optimal conditions, the DPPH radical scavenging activities of MHA and RHC were 60.04 and 79.65%, respectively. These results provide fundamental data for the production of antioxidant peptides derived from sandfish hydrolysates.     

复合酶协同水解法制备绿豆抗氧化多肽

研究复合酶协同水解法制备绿豆抗氧化活性多肽的最佳条件,并探究其体外抗氧化活性。以水解度为指标,在单因素实验的基础上,以pH、温度、底物浓度、酶用量为实验因素,通过L₉(34)正交实验设计筛选出制备绿豆多肽的最佳水解条件,使用DPPH自由基、超氧阴离子自由基及羟自由基的清除能力评价其抗氧化活性。结果表明:复合酶协同水解绿豆蛋白的最适反应条件为pH8.5,温度56 ℃,底物浓度8%,酶用量4%,水解度可达到33.95%。所得绿豆抗氧化多肽对DPPH自由基、超氧阴离子自由基及羟自由基清除率分别为82.8%、76.82%和56.85%,具有较强的抗氧化活性,在天然抗氧化剂和保健食品领域有一定的开发利用价值。     

2种蛋白酶酶解曲拉干酪素条件优化及抗氧化性比较

以曲拉干酪素为原料、水解度为指标,在酶解时间、酶解温度、pH值、曲拉干酪素质量浓度、酶添加量单因素试验基础上,采用响应面试验对碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解工艺条件进行优化,并对2 种酶解液的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基清除率,Fe2＋、Cu2＋螯合能力和还原力等抗氧化性指标进行比较。结果表明,碱性蛋白酶和胰蛋白酶分别在酶解时间3.8、2.5 h,酶解温度49.8、47.8 ℃,曲拉干酪素质量浓度60、35 g/L,pH 8.5、7.5,酶添加量140、2 900 U/g时水解度最大,为24.25%和13.57%。碱性蛋白酶解液超氧阴离子自由基清除率、Fe2＋螯合能力显著低于胰蛋白酶解液（P＜0.01）;羟自由基清除能力高于胰蛋白酶解液（P＞0.05）;2 种蛋白酶酶解液在酶解液质量浓度1～5 mg/mL时,Cu2＋螯合能力、DPPH自由基清除率和还原力随质量浓度均呈上升趋势,Cu2＋螯合能力低于Fe2＋螯合能力（P＞0.05）,DPPH自由基清除率和还原力二者差异显著（P＜0.01）。2 种蛋白酶对酶解物抗氧化性指标影响不同,碱性蛋白酶酶解物抗氧化性相对较优。     

响应面法优化草菇抗氧化肽的酶法制备工艺

以草菇为原料提取蛋白质,蛋白酶酶解蛋白制备抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为指标,在单因素实验基础上,结合响应面法优化草菇抗氧化肽的提取工艺。通过超滤分离纯化获得不同分子量的肽段,采用DPPH自由基清除率、Fe2+螯合率和还原力法测定超滤组分的抗氧化活性。结果表明:中性蛋白酶为最优酶解蛋白酶,最佳酶解工艺条件为酶解时间3.70 h,加酶量3.81%,底物质量浓度3.11 g/100 mL,在此条件下,酶解产物的DPPH自由基清除率为69.85%±2.52%。通过超滤分级制备所得分子量最小的肽段F1（<3 kDa）具有最高的抗氧化活性,其DPPH自由基清除率、Fe2+螯合率和还原力分别为78.81%±1.56%、91.05%±1.65%、0.47±0.02。草菇抗氧化肽可作为潜在的天然抗氧化剂来源得到开发利用。