菠萝蛋白酶水解大豆分离蛋白工艺优化研究

以水解度为指标，研究了温度、pH、底物浓度、酶浓度等因素对菠萝蛋白酶水解大豆分离蛋白的影响。影响菠萝蛋白酶水解大豆蛋白的影响因素顺次为酶浓度、温度、底物浓度、pH。最佳参数组合是酶浓度为6％、温度为65℃、底物浓度为5％、pH为8．0。在此条件下，菠萝蛋白酶水解大豆分离蛋白的水解度在半小时内可以达到8．18％。     

木瓜蛋白酶与中性蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

研究了大豆分离蛋白经过加热预处理后用木瓜蛋白酶和中性蛋白酶水解的可行胜.以水解度(DH)为指标,考察了单因素水解条件得出:木瓜蛋白酶水解反应的最佳条件为反应底物浓度3.0%,pH 7.0,反应温度55℃,酶用量30μg/g;中性蛋白酶水解反应的最佳条件为反应底物浓度5.0%,pH 7.0,反应温度55℃,酶用量40 μg/g.在此条件下,大豆分离蛋白水解度分别为3.69%和9.80%.在一定条件下复合酶分步水解优于单一酶水解.     

枯草杆菌蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

采用枯草杆菌蛋白酶对大豆分离蛋白进行水解工艺条件的研究。通过单因素分析 ,正交试验 ,确定了枯草杆菌蛋白酶酶解大豆分离蛋白的最佳水解条件 ,即 pH7 0、温度45℃、酶浓度2000u/g大豆分离蛋白、底物浓度3 %。在此条件下水解6h ,水解度可达60 %以上     

Protamex复合蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

为优化大豆分离蛋白酶水解条件，本试验采用二次回归正交旋转组合设计方法对Protamex复合蛋白酶水解大豆分离蛋白的条件进行研究。建立了水解度(DH)与pH值、反应温度、反应时间、底物浓度、酶与底物浓度比之间的数学模型；并获得最佳水解工艺条件：pH值6．5，温度40℃，水解时间10h，底物浓度14％，酶与底物浓度比4．5％；主成分分析表明，pH对DH的贡献率最大。     

曲霉M3蛋白酶酶解特性研究

用曲霉M3蛋白酶水解大豆分离蛋白,对最佳预处理条件和酶解工艺条件进行了研究。结果表明:其最佳预处理条件为:80℃水浴处理10min;最佳酶解条件为:底物浓度5%(W/V)、加酶量4200u/g蛋白、温度50℃、pH7.5。在此条件下水解,测定不同水解时间的水解度,并品尝苦味。研究发现:曲霉M3蛋白酶水解液的水解度随着水解时间的延长而增大,且在任何水解时间水解液都没有苦味。     

枯草芽孢杆菌脱苦氨肽酶在水解大豆分离蛋白中的应用研究

研究了氨肽酶与碱性蛋白酶对大豆分离蛋白的有限水解作用,在单酶单因素水解条件的基础上,用正交实验优化两酶协同水解大豆分离蛋白的酶解条件,得出最佳水解条件为:温度50℃、pH8.5、两酶与底物浓度比均为10000U/g、底物浓度60g/L,水解时间4h,水解度达25.0%,水解液几乎不呈现苦味,且分子量低于1000的部分约占45%.     

双酶分步水解大豆分离蛋白制备缩氨酸

以大豆分离蛋白为原料,采用碱性蛋白酶、风味蛋白酶分步水解技术,结合膜分离技术与传统的纯化工艺制备大豆缩氨酸。通过单因素和正交试验得到最佳制备条件：碱性蛋白酶在pH值为9.0、酶用量为5%（W/V）、底物浓度为5%、温度为55℃条件下水解4h后灭酶,风味蛋白酶pH值为6.5、酶用量为5%（W/V）、温度为50℃,水解时间6h,水解度达到25.3%。在此条件下酶解液中Da〈1 000的多肽得率为49.12%。对其进行氨基酸分析,得出氨基酸总量和游离氨基酸的含量分别占寡肽溶液的3.21%和0.28%。     

大豆肽优化设计制备条件

用As1.398中性蛋白酶水解大豆分离蛋白,在单因素分析的基础上采用四因素五水平的中心组合设计和响应面方法优化大豆分离蛋白酶水解制备大豆肽的条件,应用SAS分析软件对实验数据进行处理,得到最佳酶条件为:温度41.4℃;pH7.0;酶与底物浓度比0.84%;底物浓度8.43%,水解时间3h.在此条件下大豆蛋白的水解度的预测值为11.09%,实际测定的水解度值为11.08%.     

序贯设计优化大豆多肽制备工艺

以大豆分离蛋白为原料,在pH渐变条件下用碱性蛋白酶水解制备大豆多肽。采用序贯设计的方法考察了底物浓度、起始pH、温度、酶浓度、酶解时间对大豆蛋白水解的影响,并由此确定了最佳的酶解工艺条件:底物浓度4.92%、酶与底物蛋白比为2 758 kat/g蛋白、温度55℃、起始pH 11.0、水解时间7 h。在优化的条件下大豆蛋白的水解度可达到39.10 mg/100 g,多肽得率为63.21%。     

微波连续化辅助酶解大豆分离蛋白的工艺研究

研究了微波连续条件下,碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白的工艺。通过单因素和正交设计试验,得到的最佳工艺条件为,微波功率500 W、底物浓度4%,酶底物比9%,酶解时间15 min,在此条件下水解度为27.33%,多肽含量为13.04 mg/mL,水浴对照实验发现微波连续辅助酶解15 min和普通水浴酶解1.5 h相当。电泳结果表明,酶解物分子量在20 000 u以下。     

大豆粕蛋白酶酶解条件和产物分析研究

以水解度为衡量指标,通过正交试验设计,对木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和As1.398蛋白酶酶解大豆粕的最佳水解条件进行了筛选.试验结果表明:木瓜蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH7.0、温度60℃、时间5 h、酶浓度5%.胰蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH7.0、温度50℃、时间7 h、酶浓度5%;As1.398蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH6.5、温度50℃、时间7 h、酶浓度5%.对酶解产物进行超滤和SDS-PAGE电泳分析表明,因酶解条件不同,大豆粕酶解产物中蛋白质和肽的组成及其数量也不同;酶的种类不同,大豆粕酶解产物组成也不同;大豆粕水解度越高,其酶解产物中小分子肽数量越多.     

氨肽酶与中性蛋白酶协同水解大豆分离蛋白的研究

以大豆分离蛋白为底物,游离氨基酸含量、多肽分布、水解度为指标,氨肽酶ProteAXG为对照,开展中性蛋白酶和氨肽酶双酶协同水解的研究。在底物质量浓度6 g/dL,中性蛋白酶添加量5000 U/g,氨肽酶添加量9.75×105U/g,pH 8.5,温度50℃,水解4 h后,水解液中游离氨基酸含量13.6 mg/mL,多肽相对分子质量在1100以下,其中600左右的多肽约占16%,二肽三肽约占75%,水解度达50.8%。氨肽酶与中性蛋白酶优化后,水解度达62%。结果表明:该氨肽酶无论单独或与中性蛋白酶组合水解,都能达到较为深度的水解效果。     

变性豆粕中蛋白质的酶水解特性的研究

变性豆粕是由大豆浸油后,经高温脱溶所得。本文以高温变性脱脂大豆粕为原料,用正交实验法对变性后在蛋白酶作用下的水解特性进行了深入研究。选用国产1398中性蛋白酶为水解酶对变性豆粕进行水解,研究了变性豆粕中蛋白质溶出率随温度、pH值、时间、底物浓度及用酶量的变化规律,找到了水解变性豆粕的最佳实验条件。为生产实践提供了基础数据,该研究结果对其它蛋白质原料的水解特性研究也具有参考价值。研究结果表明：1398中性蛋白酶水解高温变性豆粕的最佳条件为：温度45℃,时间3h,底物浓度1．0％,用酶量1600u/g,pH值7．0,在此条件下,变性豆粕中蛋白质可有90．71％水解溶出。     

两种来源酶多种方式水解牛骨蛋白

选用两种不同来源的枯草杆菌中性蛋白酶与木瓜蛋白酶,以水解度为特征性指标,采用5种不同水解方式水解牛骨蛋白。结果表明：枯草杆菌中性蛋白酶与木瓜蛋白酶同步水解,效果优于木瓜蛋白酶与枯草杆菌中性蛋白酶分步水解两种方式,最佳酶体系反应条件为pH7.05、温度51℃、加酶总量7000U/g(枯草杆菌中性蛋白酶与木瓜蛋白酶用量比1:1)、150r/min 振荡水解6h,水解度可达27.54%。     

血管紧张素转化酶抑制剂产生菌的筛选及发酵条件优化

以大豆分离蛋白为基质,以血管紧张素转化酶（ACE）抑制活性和多肽含量为评价指标,筛选高产ACE抑制剂的菌株,并以 ACE和蛋白水解度（DH）为考察指标对其产ACE抑制剂的发酵条件进行单因素优化。 通过微生物发酵法筛选出一株具有高ACE抑制 活性的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）BS90。 经单因素试验确定最优发酵条件为：采用液态发酵,大豆蛋白含量5%,初始pH值9.0,培 养温度35 ℃,培养时间40 h。 在此发酵条件下,DH和ACE抑制活性分别达到89.1%和81.8%,较优化前分别提高69.5%、13.4%。 为后续 ACE抑制肽的分离制备奠定了基础。     

不同酶切方式引发大豆蛋白构象变化及功能特性评价

本研究以枯草杆菌碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶、枯草杆菌中性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶酶解大豆分离蛋白产物为研究对象,借助十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外吸收光谱、荧光光谱、红外光谱解析不同酶切条件下蛋白产物构象变化,并对其乳化性及抗氧化活性等功能特性进行评价。结果表明：酶解促进蛋白解折叠,内部氨基酸暴露,并受到酶切方式的影响;菠萝蛋白酶酶解作用范围宽泛,疏水性氨基酸浓度达到最大值(27.10±0.08)%,氨基酸存在微环境发生改变,形成柔性结构单元,其乳化性及抗氧化性都得到明显改善,为具有最佳功能特性的酶解蛋白;酶特异性作用位点导致酶解作用程度较低的枯草杆菌碱性蛋白酶、枯草杆菌中性蛋白酶、胃蛋白酶及胰蛋白酶水解产物功能特性均高于未处理样品。值得注意的是,水解程度最低的胰蛋白酶水解产物呈现优异乳化稳定性,这是因为大豆中胰蛋白酶抑制剂抑制蛋白过度水解,提升蛋白溶解度同时,肽段长度适宜稳定包裹油滴。     

酶法制取鲮鱼皮胶原蛋白寡肽工艺的研究

本文以水解度为指标,在2709碱性蛋白酶、537酸性蛋白酶、A.S.1.398中性蛋白酶三种蛋白酶中确定2709碱性蛋白酶为最佳水解用酶.在单因素试验的基础上利用通过响应面法优化2709碱性蛋白酶水解鲮鱼皮制取胶原蛋白寡肽的最佳工艺条件为:底物浓度120g/L,pH值10.0,酶与底物比2200U/g,温度50℃,水解时间2h,最大水解度为28.23%.     

As1.398水解菜籽蛋白的酶水解条件的研究

用响应面分析法（RSM）对影响菜籽蛋白的酶水解的因素进行分析,得到Asl.398的最佳酶水解条件为温度49.6℃,pH为7.6,酶与底物浓度比（E/S）7420PU/g,底物浓度9.4%(w/v）,水解时间6h,最佳酶水解条件下的水解度为16.2%,在最佳酶水解条件下对水解度和时间的关系进行了研究,证实了预测值和实测值是一致的。     

双酶分步水解牛骨蛋白工艺的优化

以新鲜牛骨为原料,探讨牛骨粉的制备工艺。选用枯草杆菌中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白,以水解度为特征性指标,采用L9(34)正交试验设计优化双酶水解牛骨粉的工艺条件。结果表明：牛骨粉蛋白质含量高达30.72%,约为鲜骨蛋白质含量的3倍;采用胰蛋白酶先水解,中性蛋白酶后水解的方式分步水解牛骨蛋白,其效果优于两种酶同时水解及中性蛋白酶先水解,胰蛋白酶后水解;中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白的最佳工艺条件：固液比1:2,起始pH8.0,胰蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃、150r/min振荡水解3h,然后用中性蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃以150r/min振荡水解3h,水解度达18.34%;粒径小的活性炭对酶解液脱苦、脱色及除腥效果优于粒径大的活性炭。     

大豆蛋白水解物物化特性的研究

本文就高变性豆粕水解产物——大豆多肽在不同环境条件下的物化特性进行了测定。结果表明,水解产物在水中的溶解度较之大豆分离蛋白有大幅度的提高,提高幅度达90%;水解产物的粘度较之大豆分离蛋白有所下降,且其粘度在一定pH范围内随pH降低而升高;木瓜蛋白酶酶解物的苦味阈值为0.410%,As1.398蛋白酶水解的苦味阈值为0.520%;水解产物的吸水值随pH的下降而升高,且木瓜蛋白酶水解物的粘度值与As1.398蛋白酶的酶解产物基本相同。