冬虫夏草液态发酵菌丝体中化学成分分析

对冬虫夏草(Cordyceps sinensis)液态发酵菌丝体的主要化学成分进行了分析.冬虫夏草液体发酵菌丝体中粗蛋白和粗脂肪的含量分别为24.53%和6.69%;腺苷含量为0.3755mg/g,D-甘露醇含量为88.80mg/g,胞内多糖含量为133.9mg/g,麦角甾醇含量为1.80mg/g.冬虫夏草液态发酵菌丝体主要成分含量与天然虫草相似.     

蜂头虫草无性型——蜂头层束梗孢活性成分分析

测定了蜂头虫草无性型——蜂头层束梗孢(Hymenostilbe sphecophila Kob)HS01胞外多糖含量、5种核替代谢量和氨基酸含量。结果表明,胞外多糖含量最高可达1.75 g/L,胞内多糖含量最高可达2.423%;发酵液与菌丝体中均含有尿苷、鸟苷、肌苷、胸腺嘧啶核苷和腺苷5种核苷,其含量均高于对照品冬虫夏草生药;HS01发酵菌丝体与天然虫草生药在氨基酸种类上一致,但氨基酸总量和人体所必须氨基酸总量明显高于冬虫夏草生药,氨基酸总量为8.330 mg/g。     

冬虫夏草液体发酵培养的研究进展

冬虫夏草是一种名贵的中国传统药用真菌,因其自身众多且独特的药用价值,已成为国内外学者研究的热点.由于野生虫草生长条件的局限性以及人类的过度采集,目前,野生自然资源已经面临枯竭.利用人工发酵冬虫夏草菌来获得与天然冬虫夏草化学组成成分以及药理作用基本相同的菌丝体,成为当下解决虫草资源短缺的一种最可行的方法.本文介绍了冬虫夏草菌株的分离、发酵条件的控制、发酵菌丝体与天然虫草中活性成分的比较以及发酵滤液的应用,为冬虫夏草的液态发酵培养提供参考.     

冬虫夏草发酵余液活性成分分析及胞外多糖抗肿瘤活性研究

冬虫夏草是一种名贵药材,目前国内已实现人工发酵生产,但相关的产品多以菌丝体为主,胞外多糖的研究还鲜有报道。冬虫夏草发酵余液浑浊呈黑褐色,具有浓郁的蜂蜜样香味略酸。本实验以虫草发酵余液为材料,硫酸苯酚法测多糖含量,容量法测虫草酸含量,高效液相色谱法测定虫草素的含量,MTT法检测样品对Hela细胞的抑制活性。结果证实虫草发酵余液含有一定胞外多糖、虫草酸和虫草素,其中胞外多糖具有一定的抗肿瘤活性。     

冬虫夏草化学成分及其药理活性的研究

冬虫夏草由中华虫草菌的子座和僵死的虫草蝙蝠蛾幼虫组成,是一种十分珍贵的保健品和药品。化学研究证实,核苷类(虫草素、腺苷等)、甾醇类(麦角甾醇及其衍生物等)、多糖类物质,以及甘露醇、氨基酸是冬虫夏草具有重要保健和药理作用的物质基础。现已知冬虫夏草具有免疫调节、抗癌、调节内分泌、抗菌、促进造血、抗病毒和护肝、镇静和抗惊厥作用;此外,还可用于心血管系统、呼吸系统和肾脏等疾病的调节和治疗。野生冬虫夏草、人工菌丝体及其活性发酵产物是功能食品的重要资源。     

冬虫夏草菌的分离、鉴定及菌丝体多糖含量测定

对存在于那曲冬虫夏草中的冬虫夏草菌进行分离鉴定,并测定其菌丝体多糖含量。于新鲜那曲冬虫夏草子座中初步分离得到冬虫夏草菌,用梯度划线法进一步纯化,并进行菌落形态观察及ITS序列分析,经液体发酵后,采用苯酚-硫酸法测定菌丝体多糖含量。结合菌株的形态和ITS序列鉴定结果,将菌株CC-109鉴定为Verticillium sp.,经测定菌丝体多糖含量为3.742%。     

珊瑚菌液体发酵条件优化及其胞内多糖的组成研究

研究了珊瑚菌液体发酵的适宜培养条件,探讨了珊瑚茵菌丝体胞内多糖的单糖组成.结果表明:最适发酵培养条件为马铃薯40 g/L、葡萄糖15g/L、蛋白胨20 g/L、维生素B10.02 g/L,初始pH 5.2,时间14 d,所得茵丝体为42.6 g/L.采用水提醇沉的方法得到珊瑚菌茵丝体胞内多糖组分RFPF30,RFPF60,RFPF80.对其单糖组成进行分析后发现RFPF30主要由甘露糖、葡萄糖及少量半乳糖组成,RFPF60主要由葡萄糖、少量甘露糖和少量半乳糖组成,RFPF80主要由甘露糖和葡萄糖组成.     

贝叶多孔菌菌丝体发酵及其成分分析研究

简单介绍了贝叶多孔菌的生理功能及目前有关它的产品价格昂贵的原因 ;同时 ,还报道了贝叶多孔菌菌丝体的深层发酵及有效成分提取和分析。分别从菌丝体及发酵清液中提取得到了灰树花多糖和胞外多糖 ,同时还测定了菌丝体成分 :灰树花多糖 7.82 % ,蛋白质 2 1 .7% ,总糖 ,灰分6.0 5% ,其中菌丝体灰树花多糖及总糖含量明显多于子实体 ,这样就可用丝体代替子实体用于制备灰树花多糖。     

发酵虫草菌丝体多糖提取条件优化及其结构分析

采用响应面法优化蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的提取工艺,并对提取所得多糖的结构进行初步分析。结果表明:发酵虫草菌丝体多糖提取最佳工艺条件为提取温度98.0℃、提取时间4.5 h、液固比25∶1(mL/g),该条件下多糖得率为9.69%。菌丝体多糖主要由中性糖(84.7%)和糖醛酸(9.5%)组成。采用高效体积排阻色谱、红外光谱扫描和离子色谱对多糖结构进行光谱分析和单糖组成分析,结果表明该多糖主要为分子质量61.6 kD的单一色谱峰且可能呈吡喃环结构。另外,菌丝体多糖由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和半乳糖醛酸组成,其物质的量比为2.5∶31∶36∶1∶15∶4。研究成果可为日后发酵虫草菌丝体多糖精细结构与活性研究以及产品开发提供一定理论依据。     

冬虫夏草菌丝体深层发酵技术的研究

从野外采集的冬虫夏草菌种,经鉴定属巴西虫草(CordycepsbrasiliensisHenn),分离、纯化后获得GC-88-4菌株,利用该菌株进行深层发酵培养,成功地培养出巴西虫草菌丝体粉.实验结果证实:巴西虫草菌丝体粉所含有效成份D-甘露醇、麦角甾醇、虫草多糖、氨基酸、微量元素等的含量与天然冬虫夏草(CordycepssinensisSacc)相近,有提高实验动物免疫功能等药理作用.     

桦褐孔菌子实体与菌丝体营养成分比较分析

将液体培养的菌丝体与野生子实体烘干磨粉处理,对其营养成分测定分析,结果表明：菌丝体粗多糖含量（7.43 g/100 g）显著高于子实体粗多糖含量（2.31 g/100 g）,二者均由果糖、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、甘露糖和半乳糖7 种组成;凯氏定氮法测得子实体粗蛋白含量为6.69 g/100 g,菌丝体粗蛋白含量为21.08 g/100 g;全自动氨基酸分析仪测得子实体含14 种氨基酸,菌丝体含16 种氨基酸;原子吸收分光光度计测得桦褐孔菌中含有大量K、Fe、Ca、Zn、Mg元素,少量Na、Mn、Se。研究结果表明桦褐孔菌的菌丝体营养成分比较丰富,可以代替子实体应用于食品及药品行业中,缓解子实体这种珍稀野生资源的不足。     

细脚拟青霉深层发酵菌丝体核苷类成分分析

以已知核苷为标样,并以冬虫夏草生药作对比,利用反相高效液相色谱法对细脚拟青霉RCEF0441 深层发酵菌丝体中核苷类化学成分进行分析。结果表明,细脚拟青霉RCEF0441 菌丝体中主要含有胞苷、尿苷、鸟苷、肌苷、胸苷和腺苷6 种核苷,其中胞苷的含量为冬虫夏草生药的3 倍左右,肌苷和鸟苷的含量则分别是冬虫夏草生药的7 和9 倍左右,尿苷和腺苷的含量也显著高于对照品冬虫夏草生药(p<0.05)。     

蛹虫草的稳定碳同位素和脂肪酸研究

本文旨在对冬虫夏草替代品的脂肪酸组成和稳定碳同位素比值及其变异规律开展研究。采用元素分析-同位素比值质谱仪(EA-IRMS)先对8种冬虫夏草替代品(包括6种蛹虫草和2种虫草菌丝体)和1个冬虫夏草子座样品的稳定碳同位素比值进行测定,再采用化学方法将其中性油脂和极性油脂进行高效分离,并采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对中性油脂和极性油脂的脂肪酸组成进行测定;最后将检测结果与作者之前报道的冬虫夏草数据进行对比分析。对比研究表明,不同冬虫夏草替代品在稳定碳同位素比值、粗脂肪含量和脂肪酸组成上存在明显差异;冬虫夏草替代品的粗脂肪和不饱和脂肪酸含量低于冬虫夏草,显现出冬虫夏草的不可替代性;稳定碳同位素比值和脂肪酸组成是冬虫夏草替代品掺杂判识的两类重要标志。     

古尼拟青霉小孢变种核苷类成分分析

以已知核苷为标样,并以冬虫夏草生药作对比,利用反相高效液相色谱法对古尼拟青霉小孢变种RCEF0864菌丝体和发酵液中核苷类化学成分进行分析,结果表明古尼拟青霉小孢变种RCEF0864菌丝体中主要含有胞苷、尿苷、鸟苷、肌苷、环磷腺苷和腺苷等6种,其中腺苷和尿苷的含量均为冬虫夏草生药的3倍左右,肌苷和鸟苷的含量则分别是冬虫夏草生药的7倍和10倍左右,尿苷的含量也高于对照品冬虫夏草生药。古尼拟青霉小孢变种RCEF0864发酵液中主要含有尿苷、胞苷、胸苷、肌苷、环磷腺苷和腺苷等6种核苷类物质,其中,腺苷和胞苷的含量均高于对照品冬虫夏草生药。     

冬虫夏草菌丝体镇咳、祛痰及抗菌消炎作用的研究

本文主要目的为研究冬虫夏草菌丝体镇咳、祛痰及体内外抗菌消炎作用。选用二月龄雌性昆明种小鼠，随机分为空白对照、低剂量（0．5g/kg.bw）和高剂量（1．0g/kg.bw）三组，连续灌胃17天和27天后分别进行镇咳、祛痰和体内抗炎实验；同时还研究了冬虫夏草菌丝体的体外抗菌作用。结果表明：与对照组比较，低剂量虫草菌丝体能降低浓氨水致咳小鼠的咳嗽次数44．4％（P＜0．05），延长咳嗽潜伏期108．1％（P＜0．01），并能降低二甲苯致耳廓肿胀厚度40．2％（P＜0．05）；高剂量虫草菌丝体能降低浓氨水致小鼠的咳嗽次数49．4％（P＜0．01），延长咳嗽潜伏88．4％（P＜0．01），提高酚红排泌量75．0％（P＜0．01）并降低二甲苯致耳廓肿胀厚度36．4％（P＜0．05）。体外抗菌实验显示：虫草菌丝体具有抑制金黄色葡萄球菌、肺炎球菌和乙型链球菌的作用。结果提示冬虫草菌丝体具有镇咳、祛痰和抗菌消炎作用。     

生姜皮多糖的分离纯化及其结构组成分析

以生姜皮为原料,经热水浸提法,乙醇醇沉得到生姜皮粗多糖。再经DEAE-纤维素-52阴离子交换柱和Sephadex?G-100凝胶柱对所得粗多糖进行层析纯化,得到3种水溶性生姜皮多糖(GE-1、GE-2、GE-3)。利用高效液相色谱与蒸发光散射检测器联用测定各多糖组分的分子质量,利用柱前衍生高效液相色谱法分析各多糖组分的单糖组成,通过紫外光谱扫描、红外光谱扫描进一步分析各组分多糖结构。结果表明3种纯化多糖组分总糖含量分别为(98.06±0.15)%、(97.41±0.42)%、(97.89±0.22)%,分子质量分别为462、194 k D和376 k D。GE-1的单糖组成主要为甘露糖、葡萄糖、木糖,含有微量的半乳糖,其物质的量比为1.25∶6∶1;GE-2的单糖组成主要为甘露糖、葡萄糖和岩藻糖,其物质的量比为2.51∶9.25∶1;GE-3的单糖组成主要为甘露糖、核糖、半乳糖、阿拉伯糖,其物质的量比为17.39∶1∶1.89∶1.23。紫外光谱扫描结果显示3种多糖组分无明显的核酸和蛋白质吸收峰,红外光谱结果分析得出GE-1、GE-2和GE-3含有多糖类物质的特征吸收峰。     

沙棘多糖分离纯化及抗氧化活性

分离纯化沙棘多糖（sea buckthorn (Hippophae rhamnoides) polysaccharides,SBP）,并对其单糖组分、结构表征及体外抗氧化活性进行分析。通过水提醇沉、Sevag法除蛋白得到沙棘粗多糖,利用DEAE-52纤维素柱对其进行分离纯化得到中性多糖SBP-I和酸性多糖SBP-II、SBP-III 3 种组分。单糖组分结果表明,SBP-I由物质的量比为1.18∶1∶2.20∶32.17∶1.45的阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖组成;SBP-II由物质的量比为1∶0.28∶1.02∶0.20的木糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖组成;SBP-III由物质的量比为1∶2.15∶0.28的木糖、葡萄糖及半乳糖组成;红外光谱测定表明,3 种组分均具有多糖的特征吸收峰;体外抗氧化实验结果表明,粗多糖及3 种纯化多糖组分均具有较好的抗氧化性且随样品质量浓度的增加抗氧化活性也随之升高,抗氧化能力大小顺序为：VC＞SBP-III＞SBP-II＞SBP-I＞粗多糖。     

人工虫草多糖对小鼠CCl4肝损伤的保护作用

目的：研究人工虫草不同部位多糖及固体培养残基多糖对小鼠CCl4肝损伤的保护作用。方法：取健康的雄性小鼠60只,按体质量随机分成6组：正常对照组、急性CCl4肝损伤模型组、虫草子实体多糖组、菌丝体多糖组、固体培养残基多糖组和阳性药物组,每组10只。用紫外分光光度法测定比较血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量,测定肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总蛋白(TP)含量,并对肝细胞的组织形态学进行观察。结果：虫草多糖子实体、菌丝体和固体培养残基多糖组,能显著抑制CCl4引起的小鼠血清ALT、AST活性及肝脏MDA含量的升高,以及肝脏SOD含量的降低,并能显著减轻CCl4引起的肝小叶内的灶性坏死。结论：虫草多糖子实体、菌丝体和固体培养残基多糖组对小鼠化学性肝损伤具有保护作用,人工虫草子实体多糖效果最优,其次为菌丝体多糖,再次为固体培养残基多糖。     

蛹虫草及其培养基中主要核苷类成分的分析比较

采用高效液相色谱法测定虫草中的核苷类成分,优化后的色谱条件为YMC-Polyamine 柱(250mm × 4.6mm,5μm);采用梯度洗脱,流动相：乙腈- 水(V/V)：0～15min 为90:10,15～20min 为86.5:13.5,20～30min 为75:25,30～35min 为70:30;流速：1mL/min;柱温：30℃;检测波长：259nm;进样量：10μL。结果表明：胸腺嘧啶、虫草素、尿嘧啶、腺苷、腺嘌呤、尿苷、鸟嘌呤、次黄嘌呤均能得到较好分离,该方法稳定性好、精密度高、重现性好,适用于虫草中的核苷类成分的分析。经分析发现,蛹虫草子实体核苷类物质组成大致相似,但含量差异非常显著,同时发现蛹虫草培养基残基及固体发酵产物中虫草素含量较高,其他核苷类成分很少,因此认定蛹虫草培养基残基及固体发酵产物是非常优良的分离纯化虫草素的原料。