杂粮早餐粉对砷致小鼠雄性生殖毒性的缓解作用

以昆明种纯系雄性小白鼠为受试动物,检测杂粮早餐粉对砷致小鼠雄性生殖毒性的影响。砷染毒组小鼠饮用含砷蒸馏水（砷质量浓度为10 mg/L）,早餐粉干预组小鼠在饮用含砷蒸馏水的同时分别灌胃7.15 g/100 mL和14.30 g/100 mL杂粮早餐粉溶液,每3 d一次。实验周期60 d,期间小鼠自由取水。灌胃结束后检测小鼠睾丸组织的抗氧化指标与组织结构,计算精子总数和精子畸形率。结果表明：通过饮水摄入砷能使小鼠睾丸脏器系数下降,睾丸组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力和还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量下降,H2O2含量升高,丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量显著升高（P＜0.05）,睾丸组织结构出现病理性改变,精子总数降低,精子畸形率升高;用杂粮早餐粉干预后,小鼠睾丸脏器系数升高,睾丸组织SOD活力和还原型GSH含量升高,H2O2和MDA含量降低,睾丸组织结构损伤得到缓解,精子总数升高,精子畸形率下降。上述结果表明,所用杂粮早餐粉能降低砷致雄性生殖毒性,对睾丸结构和功能有一定的保护作用,对雄性动物生殖健康具有积极意义。     

淫羊藿生物碱对环磷酰胺引起的雄鼠生殖系统损伤的保护作用

目的:研究淫羊藿生物碱对环磷酰胺致雄性小鼠生殖损伤的保护机制。方法:首先，取40只昆明种雄性小鼠，随机分为空白组、淫羊藿生物碱低、中、高剂量组，考察淫羊藿生物碱对雄性小鼠是否具有生殖毒性；其次，另选40只昆明种雄性小鼠，注射环磷酰胺进行造模，并随机分为环磷酰胺组、环磷酰胺-生物碱低、中、高剂量组。造模成功后，除环磷酰胺组外，各剂量组小鼠灌胃给药30 d。末次给药后处死小鼠，测定不同组别小鼠附睾、睾丸及精子质量等相关指标。检测睾丸组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、睾酮和Bcl-2/Bax蛋白的含量。结果:淫羊藿生物碱对雄性小鼠没有生殖毒性作用。注射环磷酰胺后精子质量和睾丸活性明显下降，小鼠睾丸组织受损严重，证明造模成功。与环磷酰胺组比较，淫羊藿各剂量组给药后，小鼠附睾系数、睾丸系数得到显著提高（P<0.05），精子数量增加、精子活率增加、精子畸形率减少、睾丸组织中SOD活性增强、MDA含量降低、睾酮水平升高、Bcl-2/Bax蛋白的比值升高（P<0.05）。通过睾丸组织切片观察发现，睾丸组织损伤减轻。结论:淫羊藿生物碱对雄性小鼠生殖系统具有一定的保护作用。     

莲房原花青素对极低频电磁场致雄性小鼠生殖损伤的影响

本文研究了莲房原花青素(LSPCs)对极低频电磁场(ELF-EMF)致雄性小鼠生殖系统损伤的预防作用。选用50只雄性ICR小鼠,随机分为对照组,ELF-EMF组和ELF-EMF+30、60、90 mg/kg LSPCs预处理组。LSPCs连续灌胃75 d,灌胃15 d后开始连续辐射60 d。ELF-EMF辐射处理后将小鼠处死,取出附睾、睾丸并称重,求睾体比,检测附睾中精子活率和精子畸形率,测定睾丸组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,观察睾丸组织形态学变化。结果表明ELF-EMF辐射处理后小鼠睾丸组织形态发生严重改变,睾体比、精子活率及睾丸组织SOD活性显著降低,精子畸形率和睾丸组织MDA水平显著增高。经LSPCs预处理后辐射损伤得到改善,其中60、90 mg/kg LSPCs预处理组各项指标与ELF-EMF组相比均达到极显著差异(P0.01)。由此提示LSPCs对ELF-EMF导致的雄性小鼠生殖损伤有明显的预防作用。     

双酚A对小鼠睾丸组织的损伤作用及对细胞凋亡的影响

从毒性病理学角度了解双酚A(BPA)对小鼠睾丸组织病理损伤的作用,为研究BPA毒性作用提供形态学依据。方法 选用108只SPF雄性CD-1小鼠,称重后随机分为4个剂量组(0、100、300、600mg/kg BW)。BPA经口染毒8周,取睾丸组织固定,HE及免疫组化染色后进行光镜和电镜观察,并进行半定量统计。结果 BPA染毒8周后与对照组比较,BPA 300、600mg/kg BW组小鼠体重降低,睾丸指数呈现下降趋势。光镜观察发现BPA染毒小鼠睾丸曲精小管支持细胞、各级生精细胞变性坏死、脱落,精子数量减少;透射电镜观察发现BPA引起睾丸生精细胞出现核固缩、顶体囊和顶体帽发育不良或发育畸形,基膜增厚。免疫组化检测结果表明,与对照组比较,BPA染毒组小鼠睾丸组织NF-κB表达量明显升高(P＜0.01);BPA 300、600mg/kg BW剂量组Caspase-3表达量明显升高(P＜0.01)。TUNEL检测表明BPA染毒组小鼠睾丸凋亡阳性信号与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。结论 上述结果表明经口染毒不同剂量BPA对小鼠睾丸组织均产生了不同程度的损伤,诱导睾丸组织细胞凋亡。     

还原型谷胱甘肽对四氧化二氮致小鼠肺损伤的防护作用

目的:探讨还原型谷胱甘肽(GSH)对四氧化二氮(N2O4)吸入致小鼠肺损伤的防护作用。方法:动物模型采取在120 L静式染毒柜内吸入N2O4的方法制作。雄性ICR小鼠64只,随机分为对照组,染毒组,GSH低、中、高剂量干预组(GSH低、中、高剂量+染毒),共五组,对照组8只,其余每组14只。染毒前,干预组分别灌胃GSH(1.25、2.50、3.75 g/kg bw·d),对照组和染毒组灌胃等体积生理盐水,连续7 d,第7 d灌胃1 h后染毒。脱臼处死动物,检测肺组织SOD、GSH-Px活性和MDA含量,观察肺病理改变。结果:与对照组比较,染毒组肺组织SOD、GSH-Px活性和MDA含量均极显著降低(p0.01);与染毒组比较,GSH低、中剂量干预组肺组织SOD和GSH-Px活性均极显著提高(p0.01),GSH低剂量干预组MDA含量极显著提高(p0.01),GSH中剂量干预组MDA含量显著提高(p0.05)。病理切片显示,GSH干预组比染毒组肺损伤程度轻。结论:GSH对N2O4吸入致小鼠肺损伤具有显著防护作用,其作用机制可能与其抑制氧化损伤有关。     

牡丹籽油对环磷酰胺致小鼠遗传毒性和肝损伤的保护作用

通过骨髓微核实验、精子畸形实验和肝损伤保护实验测定小鼠骨髓微核率、精子畸形率,肝组织中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)等指标,探讨牡丹籽油(PSO)对环磷酰胺(CTX)致小鼠遗传毒性和肝损伤的保护作用。结果表明:低、中、高剂量PSO组的骨髓微核率和精子畸形率均显著低于模型组(P 0.05);与模型组相比,PSO低剂量组对AST的降低无显著作用(P 0.05),阳性对照(联苯双酯)组和中、高剂量组对AST、ALT、MDA水平均有显著降低作用(P 0.05),对GSH、GSH-Px、SOD水平的升高作用达到显著水平(P 0.05)。说明牡丹籽油对环磷酰胺致小鼠遗传毒性和肝损伤有明显的保护作用。     

原花青素对反式脂肪酸致雄性小鼠生殖损伤的保护作用

目的 研究原花青素(proanthocyanidins, PC)对反式脂肪酸(trans fatty acids, TFA)致雄性小鼠生殖损伤的保护作用。方法 以昆明成年雄性小鼠为实验对象, 60只小鼠随机分为5组: 正常对照组、TAF组、低、中、高剂量PC保护组, 实验结束后, 测定相关指标。结果 PC可以使小鼠生精细胞数量减少, 使其活率、活力升高, 从而降低畸形率; 经PC保护的染毒的小鼠睾丸乳酸脱氢酶同工酶(lactate dehydrogenase, LDH-X)、γ-谷氨酰转肽酶(glutamyl transpeptidase, γ-GGT)的活性均增加, 表明PC能拮抗TFA致睾丸酶的损害作用; 小鼠睾丸组织的丙二醛(malonic dialdehyde, MDA)含量在给予TFA染毒后明显增高, 说明TFA能对小鼠睾丸组织造成损伤作用, 而经PC保护后, 能降低TFA引起睾丸损伤小鼠MDA含量, 表明PC可明显抑制TFA所致自由基导致的睾丸脂质过氧化损伤作用, 提高机体清除氧自由基能力; 超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、γ-谷氨酰转肽酶(glutamyl transpeptidase, γ-GGT)活力降低, 而经PC保护后逐渐升高, 反映脂质过氧化产物在睾丸组织内大量堆积从而造成的生殖损害。结论 TFA染毒可以导致雄性小鼠生殖系统损伤。PC干预能够改善TFA致雄性小鼠生殖损伤的作用。     

滇橄榄叶羟基酪醇对CS2致小鼠睾丸组织损伤的保护作用

目的:研究从滇橄榄叶中提取的羟基酪醇（hydroxytyrosol from Phyllanthus emblica Linn leaves,PHT）对二硫化碳（carbon disulfide,CS₂）致小鼠睾丸组织损伤的保护作用。方法:实验小鼠随机分为对照组（蒸馏水）、CS₂染毒组（50 mg/m3）和3个PHT干预组（450、150、50 mg/kg）,4周后计算睾丸脏器系数、检测精子质量、测定睾丸组织匀浆中的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）含量并观察睾丸组织病理切片,采用Western blot实验检测睾丸组织中凋亡相关因子蛋白的表达情况。结果:经过干预后,PHT高、中剂量组睾丸脏器系数均高于CS₂染毒组（P<0.01）,且PHT高剂量组与对照组间无统计学差异（P>0.05）;各PHT剂量组精子计数和精子活动率均高于CS₂染毒组（P<0.01）,但低于对照组（P<0.01）;各PHT剂量组精子畸形率低于CS₂染毒组（P<0.01）,且PHT高剂量组与对照组的精子畸形率无统计学差异（P>0.05）;观察睾丸组织病理切片发现,与CS₂染毒组相比,各PHT剂量组的睾丸组织形态均得到了改善,其中PHT高剂量组与对照组的病理切片在镜下未观察到明显差别;氧化应激指标与凋亡相关因子蛋白的表达情况表明,各PHT剂量组睾丸组织中MDA含量均低于CS₂染毒组（P<0.01）,PHT高剂量组与对照组间MDA含量无显著差异（P>0.05）;各PHT剂量组睾丸组织中SOD和GSH-Px活性高于CS₂染毒组（P<0.05）,但低于对照组（P<0.01）;与CS₂染毒组相比,PHT高、中剂量组睾丸组织中Bax和Caspase-3表达降低,Bcl-2表达升高（P<0.01）,且各剂量组与对照组间也存在差异（P<0.05）。结论:CS₂可以引起小鼠睾丸氧化损伤,且PHT可以针对CS₂所致的睾丸组织损伤发挥拮抗作用,其机制可能与PHT的强抗氧化性维持了部分抗氧化酶的活性,缓解了氧化损伤,从而减少了细胞凋亡因子的形成有关。     

龙葵碱对雄性小鼠睾丸毒性的初步研究

目的初步探讨龙葵碱的睾丸毒性。方法选择雄性昆明小鼠行体内精子畸形实验;体外原代培养建立睾丸支持细胞测试系统,用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度龙葵碱对支持细胞的细胞毒作用,计算半数抑制浓度(IC50)。结果体内实验显示,龙葵碱致使受试小鼠精子畸形;2.75μmol/L龙葵碱即对睾丸支持细胞产生毒作用,随着龙葵碱剂量增加,细胞毒作用增强,IC5022.29μmol/L。结论龙葵碱可致雄性小鼠精子畸形,干扰雄性小鼠生精功能,对雄性小鼠睾丸有毒作用。     

除草剂百草枯对大鼠及胎儿的毒性研究

本实验研究了除草剂百草枯对大鼠及其胎儿毒性作用。结果表明,雄性大鼠一次性接1/10LD50、1/5LD50和1/2LD50的百草枯不会引起雄性生殖细胞的突变;百草枯在1/10LD50、1/20LD50和1/40LD50的剂量下不能影响雄性大鼠精子活率的改变和精子畸形率的上升,却可以影响睾丸组织中碱性磷酸酶(AKP或ALP)的活性,对睾丸造成一定程度的损伤;百草枯可导致大鼠胎儿特殊循环系统动脉管(DA)的收缩,对其存在毒性作用,并且动脉管内径与染毒剂量剂量之间存在显著的剂量-效应关系。     

英国红芸豆抗氧化肽组分对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用

为了探究英国红芸豆抗氧化肽组分的抗氧化作用,采用超滤、葡聚糖凝胶G-15层析技术对碱性蛋白酶酶解英国红芸豆抗氧化蛋白质制备的抗氧化产物进行分级,研究抗氧化活性较高的组分对H₂O₂损伤的PC12细胞的影响。结果表明:抗氧化肽组分BRKBAPC-2能缓解H₂O₂对PC12造成的细胞生长抑制作用,随着肽浓度的提高,细胞内活性氧（ROS）水平,丙二醛（MDA）含量及乳酸脱氢酶（LDH）胞外活力均有所降低,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力以及还原型谷胱甘肽（GSH）含量均具有所提高,尤其BRKBAPC-2浓度为200 μg/mL时,ROS水平为32.53%,MDA含量为0.96 nmol/μg prot,LDH胞外活力为202.12 U/L,与模型组相比,均极显著降低（P<0.01）;SOD活力为（555.48±3.64）U/mg prot,CAT活力为（14.77±1.30）U/mL,GSH含量为（140.88±8.19）μmol/g prot,与模型组相比,均极显著提高（P<0.01）,此外,其可抑制线粒体膜电位的降低,改善细胞周期的阻滞情况,阻止细胞凋亡关键酶Caspase-3和Caspase-9的激活。可见,抗氧化肽组分BRKBAPC-2对H₂O₂引起的PC12细胞氧化损伤具有一定的保护作用。     

戊糖片球菌P36对HepG2细胞抗氧化能力影响的初步研究

目的:研究戊糖片球菌P36对HepG2细胞抗氧化能力的影响。方法:将培养的HepG2细胞分为3组:空白对照组(不加H₂O₂)、模型组(加入H₂O₂)和乳酸菌组(加入戊糖片球菌P36和H₂O₂)。细胞培养至12 h和24 h时分别测定其上清液和细胞裂解液的抗氧化活性。利用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)对HepG2细胞进行染色,在荧光显微镜下观察不同组细胞核形态的变化。结果:添加戊糖片球菌P36 12 h后,与模型组相比,细胞上清液中的总抗氧化力(total antioxidant capacity,T-AOC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力和过氧化氢酶(catalase,CAT)活力均显著提高(p<0.05)。细胞裂解液中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力也显著提高(p<0.05);与模型组相比,添加P36 24 h后,细胞上清液中的抗氧化酶活力均显著增加(p<0.05),还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量分别显著降低(p<0.05),细胞裂解液中的SOD活力显著降低了19.76%(p<0.05)。加入戊糖片球菌P36 24 h后,与模型组相比,HepG2细胞受损程度降低,大部分细胞状态趋于正常。结论:戊糖片球菌P36可以提高氧化应激状态下HepG2细胞的抗氧化能力。     

顺铂诱发大鼠睾丸毒性的机制及葡萄籽原花青素的防护作用

目的：探究葡萄籽原花青素（grape seed proanthocyanidin extracts,GSPE）对顺铂（cis -diamminedichloroplatinum,CDDP）诱发大鼠睾丸氧化损伤和细胞凋亡的防护作用。方法：将40 只大鼠随机分为空白对照组、CDDP模型组、GSPE低剂量组（200 mg/（kg•d））、GSPE高剂量组（400 mg/（kg•d））。分别以蒸馏水和相应剂量的GSPE对大鼠连续灌胃15 d,灌胃10 d后一次性腹腔注射CDDP,剂量为7 mg/kg,空白对照组注射相同剂量的生理盐水。注射CDDP后第5天处死大鼠,检测精子指标、大鼠睾丸组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）与谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）与丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,流式细胞仪检测大鼠睾丸细胞凋亡率,并观察睾丸组织在光镜下形态的变化。结果：CDDP模型组大鼠睾丸和附睾的质量、附睾精子的浓度和活动度、GSH-Px、SOD活力以及GSH含量均显著降低,而MDA水平和睾丸细胞凋亡率显著升高。预防性口服GSPE显著改善了CDDP引起的大鼠睾丸质量减小、功能减弱以及氧化应激、脂质过氧化和细胞凋亡这些不利影响。结论：GSPE对CDDP诱发的大鼠睾丸毒性有剂量依赖性防护作用,其机制很可能与抑制体内氧化应激及细胞凋亡有密切关系。     

喷施外源EBR和H2O2对低温胁迫烟苗恢复生长期生理特性的影响

  目的  探讨表油菜素内酯（EBR）和过氧化氢（H₂O₂）对低温胁迫后烟草幼苗生理和生长特性的影响。  方法  以烤烟品种K326为材料,研究低温胁迫后喷施外源表油菜素内酯（EBR,0.01 mg/L）和过氧化氢（H₂O₂,340 mg/L）对烤烟苗期抗氧化酶（SOD、POD、CAT）活性、渗透调节物质、丙二醛（MDA）和生物量的影响。  结果  （1）烟草苗期低温胁迫（CK1）4 d与正常生长（CK2）烟株相比SOD活性降低,POD、CAT活性升高,MDA、可溶性糖和脯氨酸含量上升,可溶性蛋白含量下降,生物量降低;（2）低温胁迫结束后,喷施外源EBR（T1）和H₂O₂（T2）相比低温对照（CK1）,恢复生长12 d烟苗SOD、POD、CAT活性分别提高61.87%和47.37%、239.06%和193.11%、168.07%和139.63%,MDA含量分别降低60.00%和50.00%,渗透调节物质含量和生物量显著增加;（3）喷施外源EBR（T1）和H₂O₂（T2）与正常生长（CK2）烟株相比,在恢复生长8 d和12 d时SOD、POD、CAT活性与可溶性糖含量无显著差异,MDA含量降低,脯氨酸含量显著上升。  结论  喷施外源EBR（0.01 mg/L）和H₂O₂（340 mg/L）能加快低温胁迫后烤烟K326幼苗的生理和生长恢复进程。      

马齿苋多糖对四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:探讨马齿苋多糖对CCl₄诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:采用CCl₄建立小鼠急性肝损伤模型。随机将60只小鼠分成正常组、模型组、联苯双酯组(200 mg/kg·d)、马齿苋多糖低、中、高剂量组(1.5、3、6 g/kg/d),连续给药7 d后,除正常组小鼠外,其他各组小鼠腹腔注射0.2%CCl₄花生油10 mL/kg;采用ELISA法检测血清中AST、ALT和ALP含量及肝组织匀浆液中MDA、SOD、GSH和GSH-Px活性,HE染色观察肝组织病理学变化,Western Blot检测肝脏组织细胞核内Nrf-2和HO-1蛋白的表达水平。结果:与模型组比较,马齿苋多糖低剂量组能够显著性降低血清中ALP含量(P<0.05),同时显著性升高肝组织匀浆液SOD水平及Nrf-2蛋白表达水平(P<0.05);马齿苋多糖中剂量组能够显著性降低肝脏指数、血清中AST、ALT含量及肝组织匀浆液中MDA水平(P<0.05),同时显著性升高肝匀浆液中GSH、GSH-Px水平(P<0.05),极显著性降低血清中ALP含量和升高肝组织匀浆液中SOD水平及Nrf-2和HO-1蛋白表达(P<0.01);马齿苋多糖高剂量组能够显著性降低肝脏指数和血清中AST含量(P<0.05),同时显著性升高肝组织匀浆液中GSH和GSH-Px水平(P<0.05),极显著性降低血清中AST、ALP、MDA含量(P<0.01),同时极显著性升高肝组织匀浆液中SOD水平及Nrf-2和HO-1蛋白表达水平(P<0.01);另外,肝组织病理学观察结果表明,马齿苋多糖可以减轻CCl₄对肝脏的病理损伤。结论:马齿苋多糖对CCl₄诱导的肝损伤有一定的保护作用,其机制与激活Nrf-2/HO-1信号通路有关。     

β-氨基丁酸诱导烟草抗碱初步研究

为探究外源BABA对提高烟草抵抗碱胁迫能力的机理。以云烟87为材料,从抗氧化系统,离子平衡和基因表达等方面来研究不同浓度BABA对碱胁迫下烟草幼苗的调节作用。结果表明:外源施加0.2mmol/L和0.5mmol/L BABA能促进碱胁迫下烟草幼苗根长和鲜重的增加;提高GSH、ASA、叶绿素和类胡萝卜素含量,降低脯氨酸和H₂O₂含量;增强超氧化物歧化酶、抗坏血酸还原酶、过氧化物酶和过氧化氢酶活性;降低烟草丙二醛含量和相对电导率来减轻碱胁迫对细胞膜损伤,提高有机酸含量缓解高pH毒害;降低Na+吸收,提高K+吸收来降低离子毒害。相对定量PCR表明:BABA可以诱导NtCaM和ABC转运蛋白家族基因表达来调节信号传导和物质转运;诱导GSH1和PROX1表达上调,促进GSH合成和脯氨酸代谢。以上结果表明:BABA诱导烟草抗碱是从抗氧化系统、有机酸合成、离子转运和基因表达等多方面综合作用的结果。