油茶籽多糖分离纯化和结构分析

以120min、50℃、1:3的料液比提取多糖粗品,并采用Sevage法对得到的油茶籽多糖粗品进行脱蛋白,再通过DEAE-纤维素、SephadexG-100柱层析进一步纯化,得到三种类型(CPSⅠ、CPSⅡ、CPSⅢ)的油茶籽多糖。油茶籽多糖样品的水溶液在紫外-可见光260nm(核酸)和280nm(蛋白质)处无明显吸收,但在190nm到210nm之间有多糖特征吸收峰。通过柱层析标准样品分析,可以得出CPSⅠ的分子量大约为256035Da,CPSⅡ的分子量大约为10290.3Da,CPSⅢ的分子量大约为3590Da。薄层色谱分析初步推断CPSⅠ由半乳糖和木糖组成;CPSⅡ由果糖和木糖,以及另一种不明的单糖组成;CPSⅢ由半乳糖组成。通过红外光谱分析推测CPSI可能是含有磷酸基团的多糖;CPSII和CPSIII都含有纯的醇基团,且CPSII中的一元醇、二元醇的含量比CPSIII高,CPSII和CPSIII都含有α糖苷键和β糖苷键。     

红树莓多糖降血脂作用

以红树莓为原料,采用复合酶法对红树莓多糖进行提取,再经过DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析和葡聚糖凝胶柱层析进行分离纯化,并且分别采用高效液相凝胶色谱法和气相色谱法测定分子量和单糖组成,通过动物实验对其降血脂作用进行研究。结果表明:RRP-I分子量为11220.1845 Da,单糖组成为由葡萄糖组成的均一多糖。灌胃RRP-I后的高血脂大鼠,血清中的四项指标TG(甘油三酯)、TC(总胆固醇)、LDL-C(低密度脂蛋白)水平降低,HDL-C(高密度脂蛋白)水平升高。RRP-I低、中、高剂量组大鼠血清中TG、TC和LDL-C水平均呈下降趋势,而HDL-C呈上升趋势,呈现出一定量效关系,表明RRP-I具有降血脂作用。以上结果表明RRP-I可以改善高血脂症大鼠的血脂水平,为红树莓多糖降血脂药物提供理论依据。     

款冬叶总多糖提取优化及其降脂抗氧化作用研究

利用超声波辅助法提取款冬叶总多糖,并研究款冬叶总多糖对高血脂模型小鼠降血脂及抗氧化的作用。利用响应面法对提取工艺条件进行优化,并对总多糖进行纯化;连续4周喂食高脂饲料构建高血脂模型小鼠,设立款冬叶总多糖高、中、低(400、200、100 mg/kg)剂量组对高血脂模型小鼠进行灌胃,另设立空白对照组和模型组,灌胃0.5%的羧甲基纤维素钠溶液(CMCNa),4周后分别测定每组小鼠血清中血脂指标:总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);测定抗氧化指标:肝组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的含量。试验结果表明:料液比为1:26(g/m L),提取时间为34 min,超声温度为69℃,提取次数3次,测得总多糖的得率为1.94%;款冬叶总多糖经纯化处理,测得总多糖的含量为59.8%;款冬叶总多糖可以有效降低小鼠血清中TC、TG和LDL-C浓度,升高HDL-C浓度,说明款冬叶总多糖具有良好的降血脂作用;款冬叶总多糖能降低小鼠肝组织中MDA的含量,提高GSH、T-SOD的含量,说明款冬叶总多糖具有良好的抗氧化作用。     

双孢菇菇柄多糖柱层析纯化及单糖组成

以双孢菇菇柄为试材,首先对经超声提取得到的菇柄多糖进行柱层析分离纯化,然后对柱层析得到的多糖组分别采用紫外光谱和柱层析进行纯度分析,并进行红外光谱分析和单糖组成分析。结果表明,脱蛋白双孢菇菇柄多糖经DEAE Sephadex A-25柱层析纯化共得到4个组分,收集其中两个较多的组分(蒸馏水和0.1 mol/L NaCl洗脱组分),经紫外光谱扫描无核酸和蛋白质,经Sephadex G-200柱层析鉴定均为单一峰。所得两种多糖组分经FT-IR红外光谱分析,均含有多糖特征吸收峰,且均为吡喃糖环β-异构体的多糖。菇柄蒸馏水洗脱多糖组分由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖组成,0.1 mol/L NaCl洗脱组分是由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖、氨基葡萄糖、氨基半乳糖组成。     

石花菜多糖的分离纯化及单糖组成分析

以石花菜为原料,对石花菜多糖进行分离纯化,并对纯化后多糖组分的理化性质及单糖组成进行分析。利用复合酶法提取石花菜多糖并采用Sevage法脱蛋白,通过DEAE-52离子交换柱层析及Sephadex G-200凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化,按峰收集主要的多糖组分GAP1,对其总糖、蛋白质、糖醛酸及硫酸基质量分数进行测定,并采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)对多糖进行衍生化,通过高效液相色谱法测定其单糖组成。结果表明:石花菜粗多糖经柱层析后收集得到主要多糖组分GAP1,其总糖质量分数为92. 56%,糖醛酸质量分数为44. 53%,硫酸基质量分数为6. 92%,不含蛋白质; PMP柱前衍生高效液相色谱法测得GAP1主要由鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和L-岩藻糖6种单糖按照不同比例缩合而成,各单糖物质的量比为1. 00∶1. 00∶4. 45∶27. 31∶2. 27∶1. 88。     

雪莲果多糖降血脂及降血糖活性的研究

本文采用预防性高血脂动物模型实验方法考察雪莲果中提取多糖的降血脂活性。分别对小鼠的体重,血清总胆固醇(TC),三酰甘油(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)进行了测定。结果发现:雪莲果多糖对小鼠体重增长无显著性影响;雪莲果粗多糖和纯多糖极显著降低高血脂小鼠血清TC、TG和LDL-C含量(p0.01);雪莲果纯多糖显著提高小鼠血清中HDL-C含量(p0.05),并且纯多糖能极显著降低小鼠肝脏TG和TC含量(p0.01)。表明雪莲果中糖类成分对高脂饮食所致小鼠血脂升高有明显抑制作用,且纯多糖的效果优于粗多糖,能有效预防高血脂症。采用小鼠高血糖模型降糖实验方法考察雪莲果多糖的降血糖活性。结果显示:雪莲果粗多糖低、中剂量组空腹血糖值显著降低(p0.05),证明雪莲果多糖体内降血糖效果。     

油茶籽多糖降血糖作用的初步研究

研究了油茶籽多糖对糖尿病小鼠的降血糖作用。对正常小鼠和四氧嘧啶造模的高血糖小鼠分别给予油茶籽多糖腹腔注射,GOD-POD法测定小鼠血糖值,研究不同组别油茶籽多糖的降血糖效果,并用DPPH法研究油茶籽多糖清除自由基能力,探讨油茶籽多糖降血糖作用的机理。结果表明:油茶籽多糖具有一定的降血糖作用,其中,CPS精品降血糖效果最好;油茶籽多糖可不同程度的提高自由基清除力。     

余甘多糖分离纯化及其分子结构的研究

分离纯化余甘多糖(Pe Ps),并研究其理化性质和结构特征。采用热水浸提法提取余甘粗多糖,经DEAESephadex A-25柱层析分离得到两种不同多糖组分。综合运用硫酸-苯酚、硫酸-咔唑、碘-碘化钾等化学分析方法对多糖的理化性质进行分析;采用高效液相色谱法鉴定组分的均一性及其分子量(Mw),并用气相色谱法测定组分的单糖组成;利用紫外光谱、红外光谱、旋光度研究多糖组分的结构特征。结果表明:余甘粗多糖经纯化分级后得到两种均一的多糖组分:Pe PsⅠ和Pe PsⅡ。经鉴定,Pe PsⅠ为含有吡喃的中性还原糖,而Pe PsⅡ为含有糖醛酸的吡喃酸性还原糖;两者对热稳定,不溶于有机溶剂,不含蛋白质和氨基酸;比旋光度[α]D20分别为+68°、+108°;分子量分别为1.49×105、1.51×105u。Pe PsⅠ主要是由L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-木糖等5种单糖构成;而Pe PsⅡ主要是由L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-半乳糖3种单糖构成。     

红托竹荪多糖的提取分离及组成研究

本文对红托竹荪(Dictyophora rubrovalvata)多糖的提取、纯化和单糖的组成成分进行了研究。红托竹荪子实体经热水提取、乙醇沉淀得多糖(Dr)粗品,多糖粗品经脱蛋白,乙醇分级沉淀、Sephadex G-15葡聚糖凝胶柱层析纯化得Dr-1,Dr-2,Dr-3三个级分,应用薄层层析技术,确定该三个级分均由半乳糖、葡萄糖、甘露糖和木糖组成。     

蛹虫草固体发酵培养基多糖的分离纯化及组成分析

为研究蛹虫草固体发酵培养基中多糖的分离纯化及组成,本实验利用水提醇沉法与Sevage法相结合,得到蛹虫草固体发酵培养基粗多糖(CMSMP).经DEAE-cellulose 52柱层析分离得到纯化蛹虫草固体发酵培养基多糖组分(CMSMPI)后,采用紫外光谱、醋酸纤维素薄膜电泳和Sephadex G-150凝胶柱层析鉴定其纯度,高效液相色谱及红外光谱分析其组成、结构.结果表明,CMMSP1为均一多糖,且由木糖、阿拉伯糖和葡萄糖三种单糖组成.同时红外光谱显示,CMSMP1具有典型多糖吸收峰.     

仿刺参肠道多糖的纯化及理化分析

目的：对仿刺参肠道多糖进行纯化,并对纯化产物进行理化分析。方法：使用葡聚糖凝胶(G-100)层析柱分离出两种仿刺参肠道多糖,选取其中多糖A进行研究。使用葡聚糖凝胶(G-100)柱层析法和琼脂糖凝胶电泳法进行纯度检测,葡聚糖凝胶(G-200)柱层析测定分子质量,高效液相色谱法确定其单糖组分,并结合红外吸收光谱法与核磁共振对其结构进行初步检测。结果：实验所得纯化产物多糖A为均一组分,主要含有氨基糖醛酸、氨基半乳糖盐酸盐和岩藻糖3种单糖,并含有少量的氨基葡萄糖、半乳糖。其中岩藻糖有α和β两种构型,以α-岩藻糖硫酸酯残基、β-岩藻糖硫酸酯残基形式存在。分子质量约为18.8×104D。结论：该纯化产物多糖A为一种酸性多糖,推测其为硫酸软骨素类。     

美味牛肝菌胞外多糖的分离纯化及组分分析

主要对美味牛肝菌发酵产生的胞外多糖(BeBEP)进行了分离纯化和组分的分析。方法:采用DEAE-纤维素柱层析和SephadexG-100凝胶柱层析对BeBEP进行分离纯化,得到的主要成分BeBEPⅢa,用紫外光谱和醋酸纤维素薄膜电泳方法进行纯度鉴定,红外光谱进行结构分析,高效液相色谱法分析单糖组分。结果表明:BeBEPⅢa为均一组分,存在吡喃糖苷,由D-木糖、D-甘露糖和D-半乳糖三种单糖组成,摩尔比为3.1∶63.3∶1.0,其中主要以D-甘露糖为主。     

金针菇子实体多糖均一组分FVP60-C2制备及单糖组成分析

金针菇子实体经水提醇沉得水溶性粗多糖,再经DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱和凝胶柱层析纯化,得到均一多糖FVP60-C2;采用高效液相色谱、紫外-可见光光谱全扫描和傅里叶变换红外光谱研究其理化性质;样品经三氟乙酸水解,乙酰衍生化后,用单糖标准品作对照,用气相色谱分析其单糖组成。结果表明:FVP60-C2为均一多糖,平均分子质量为1.429×104D;其是由岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,各单糖的物质的量比为0.74:0.21:1.36:1.00:1.31。     

皱盖疣柄牛肝菌多糖LRP-Ⅰ和LRP-Ⅱ结构表征及抗氧化活性分析

采用热水浸提皱盖疣柄牛肝菌多糖,纯化后得到两种精制多糖LRP-Ⅰ和LRP-Ⅱ,用多种色谱手段对两种多糖进行结构表征,并探索两种多糖的抗氧化活性差异。结果表明:红外光谱显示多糖LRP-Ⅰ和LRP-Ⅱ在构型上属α型吡喃己糖,具明显多糖吸收峰;水解后高效液相色谱显示LRP-Ⅰ单糖组成为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、木糖和岩藻糖,单糖摩尔比为0.68:0.10:2.87:0.28:0.12,LRP-Ⅱ单糖组成为甘露糖、葡萄糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖,单糖摩尔比组成为1.69:2.30:2.06:0.10:1.04;高效凝胶渗透色谱检测LRP-Ⅰ分子量为1.98×104 Da,LRP-Ⅱ分子量为8.38×106 Da;甲基化衍生物气质联用分析LRP-Ⅰ和LRP-Ⅱ糖苷键类型,主要连接键型均有→1,4)-葡聚糖、→1,3)-甘露聚糖和→1,3)-木聚糖;扫描电镜显示,LRP-Ⅰ呈散片状、带状和丝状,LRP-Ⅱ呈致密网孔状。抗氧化活性表明,在多糖浓度为1~10 mg/mL时,LRP-Ⅰ和LRP-Ⅱ对ABTS和DPPH自由基有良好清除作用,LRP-Ⅰ的清除效果优于LRP-Ⅱ。本研究为了解皱盖疣柄牛肝菌多糖的活性机制提供了重要参考。     

一种具有自由基清除活性的酸性苦瓜多糖的分离纯化及单糖组成分析

苦瓜粗多糖(MCP)经DEAE-纤维素凝胶柱层析及Sephadex G-100凝胶柱层析纯化后,得到多糖组分MCP Ia,经紫外光谱分析及醋酸纤维素薄膜电泳法纯度检验,结果表明MCP Ia是单一组分。HPLC分析其单糖组成为L-鼠李糖、D-木糖、D-果糖和D-半乳糖,单糖物质的量比为4.4:2.3:1:5.7,另外,MCP Ia还可能含有葡萄糖;MCP Ia红外光谱表明:苦瓜多糖存在分子内和分子间的氢键,分子中存在C—H键伸缩振动,存在—OH的变形振动,存在呋喃糖苷吸收峰,是典型的多糖类化合物。     

胀果甘草酸性多糖的分离纯化、结构分析及免疫活性测定

目的分离纯化胀果甘草多糖,并对得到的3种酸性多糖组分结构及免疫活性进行分析。方法采用水提醇沉法提取胀果甘草粗多糖,经离子交换柱层析和凝胶柱层析分离纯化,高效凝胶渗透色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)、红外光谱法(infrared spectroscopy,IR)、气相色谱法(gas chromatography,GC)和气相-质谱法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)分析其结构,采用H~3-胸腺嘧啶核苷掺入法(H~3-Td R)测定其对小鼠淋巴细胞增殖的影响。结果胀果甘草根及根茎经水提醇沉、离子交换柱层析和凝胶柱层析分离纯化后,得到3种相对分子量大于2.0×10~6 Da的均一酸性多糖组分Gi P-B1、Gi P-C1和Gi P-D1。结构和免疫活性的研究结果表明,这3种多糖组分均是由阿拉伯糖(Ara)、鼠李糖(Rha)、半乳糖(Gal)、半乳糖醛酸(Gal A)以不同摩尔比组成的酸性杂多糖,多糖的主链均由1,4-Galp A和1,2-Rhap残基构成,支链由1,5-连接的Araf和1,3-连接的Galp构成,支链分支点位于Rhap残基的O-4位。3种多糖在体外对小鼠脾细胞增殖均有促进作用,与空白对照组均有显著性差异(P0.05),其中糖醛酸含量最高的Gi P-D1促脾细胞增殖作用最高。结论从胀果甘草中分离纯化的3种酸性多糖为均一组分,具有一定的免疫增强活性。     

冬瓜多糖的提取和纯化研究

冬瓜多糖具有许多重要的生理功能,研究了其提取和纯化方法。依次经热水浸提、无水乙醇沉淀和盐酸脱蛋白三步骤得到冬瓜粗多糖。冬瓜粗多糖经凝胶柱层析得纯多糖。红外(IR)光谱分析表明该多糖具有β-D-吡喃糖苷键,凝胶渗透色谱法(GPC)测得其分子量约为22800。紫外(UV)吸收光谱分析和苯酚—硫酸法分析表明所得冬瓜多糖具有较高的纯度。薄层层析(TLC)分析表明冬瓜多糖是由半乳糖、葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖和鼠李糖这6种单糖组成。     

薤白多糖的分离纯化及组成分析

采用DEAE-纤维素离子交换柱层析和SephadexG-150凝胶柱层析,对薤白粗多糖(PAM)进行了分离纯化;利用醋酸纤维素薄膜电泳和凝胶过滤法鉴定精制薤白多糖纯度;硅胶薄层层析分析精制多糖的单糖组成。结果表明:DEAE-纤维素柱分别用水、0.1mol.L-1NaCl、0.5mol.L-1Na0H洗脱分得三种级分,即水洗级分(PAM-I)、盐洗级分(PAM-II)和碱洗级分(PAM-III);这三种级分再经过SephadexG-150柱进一步分离纯化,得三个主要级分PAM-Ib、PAM-IIa及PAM-III’;经醋酸纤维素薄膜电泳和凝胶过滤法鉴定,它们为均一的多糖;硅胶薄层层析分析显示,PAM-Ib主要由半乳糖和葡萄糖组成,PAM-IIa主要由半乳糖、葡萄糖、果糖、木糖和鼠李糖组成,PAM-III’主要由半乳糖、葡萄糖和木糖组成。     

款冬总皂苷提取优化及其降脂抗氧化作用研究

探讨了超声波辅助提取款冬总皂苷以及款冬总皂苷对高血脂模型小鼠降血脂及抗氧化的作用。利用响应面法将工艺条件优化,并对总皂苷进行纯化;连续4周喂食高脂饲料构建高血脂模型小鼠,设立款冬总皂苷高、中、低(100,200和400 mg/kg)剂量组对高血脂模型小鼠进行灌胃,另设立空白对照组和模型对照组,灌胃0.5%的羧甲基纤维素钠溶液(CMC-Na),4周后分别测定每组小鼠血清中血脂指标:总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);测定抗氧化指标,肝组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的含量。试验结果表明:料液比为1︰43(g/m L),提取温度为51℃,提取时间为13min,提取次数2次,得率为5.22%。款冬叶总皂苷纯化后纯度为60.4%;款冬总皂苷可以有效调节其血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C浓度,且降脂作用与剂量呈依赖关系;款冬总皂苷能降低其肝组织中MDA的含量,提高GSH、T-SOD的含量,说明款冬总皂苷具有良好的抗氧化作用。得到款冬总皂苷的最佳提取工艺稳定可行;款冬总皂苷可以降低高血脂模型小鼠的血脂水平,且具有一定的抗氧化的效果。     

莲子红衣多糖的分离纯化及结构表征

以莲子红衣为实验对象,将其中的多糖进行分离、纯化并表征结构。采用酶提醇析法提取莲子红衣粗多糖,选择DEAE-C阴离子交换树脂和Sephadex G-25凝胶柱层析,从莲子红衣粗多糖中分离纯化得到中性多糖和酸性多糖两种组分。经凝胶渗透色谱测定,中性和酸性多糖的重均分子质量分别为3.78×104 D和4.94×104 D,纯度分别为91.16%和90.24%。中性多糖组分由葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖4 种单糖组成;酸性多糖组分由葡萄糖、木糖、半乳糖、岩藻糖、阿拉伯糖5 种单糖组成。红外光谱证明两种多糖中均含有糖类特征吸收峰,且为α构型的吡喃型多糖。核磁共振氢谱检测又进一步证实了两种多糖均为α构型。