UPLC-MS/MS同时测定四种食品基质中痕量四氢大麻酚、大麻二酚和大麻酚

建立了UPLC-MS/MS同时测定食品中痕量四氢大麻酚、大麻二酚、大麻酚3种大麻素的检测方法,样品经甲醇提取,提取液过HLB固相萃取柱净化,经过Athena C18-WP色谱柱（2.1×150 mm,3 μm）分离,以甲醇-水流动相梯度洗脱,电喷雾负离子扫描,多反应监测模式检测。以基质配标法消除基质效应,THC-D3内标法定量。该方法在0~10 μg/L浓度范围内线性相关系数（r2）大于0.999。大麻二酚（Cannabidiol,CBD）和大麻酚（Cannabinol,CBN）的LOD为0.03 μg/kg,LOQ为0.1 μg/kg。四氢大麻酚（Tetrahydrocannabinol,THC）的LOD为0.15 μg/kg,LOQ为0.5 μg/kg。考察了三种大麻素在四种不同食品基质中的加标回收率,在1 LOQ、5 LOQ、10 LOQ的加标水平下,三种大麻素的加标回收率为81.1%~114.7%。相对标准偏差（RSD）为0.25%~4.63%（n=6）。结果表明,该方法稳定性好、灵敏度高,适用于常见食品基质中三种大麻素的同时测定。     

高效液相色谱-串联质谱同时检测黑巧克力中的五种大麻酚

基于巧克力和大麻酚类物质的物理化学性质,本文通过对前处理方法和检测方法的优化,建立了一种巧克力中五种大麻酚的高效液相色谱-串联质谱检测方法。并通过精密度、重复性以及加标回收等实验对方法的有效性进行了验证。结果表明,五种大麻酚在0.05~5.0 μg/mL浓度范围内有良好的线性关系,线性相关系数R2≥0.997,定量限（LOQ,S/N=10）为0.15 mg/kg;日内和日间精密度的相对标准偏差RSDs值<5%,说明该方法具有良好的精密度和稳定性;在三个加标水平（1.25、2.50、5.00 mg/kg）下的回收率为91.8%~109.0%,RSDs<5%,说明该方法具有较高的准确性。本方法具有简单、快速、准确等优点,可以为建立巧克力中大麻酚类物质的检测方法标准奠定实验基础,同时为加强国际大麻酚添加食品进出口监管提供技术储备。     

国内外工业大麻食品法律法规及大麻素检测方法研究进展

大麻(Cannabis sativa)是古老的栽培植物, 因含有致幻成瘾成分四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol, THC), 国际上多数国家将THC>0.3%的大麻列为严格禁用的毒品。而工业大麻(THC<0.3%)作为一种低THC, 营养价值高的低毒大麻, 许多国家允许将其添加到食品中。不同国家对工业大麻食品的法律法规和限量标准存在差异。随着工业大麻食品的合法化和普及化, 工业大麻食品种类繁多, 因此关于工业大麻食品中大麻素类物质检测分析尤为重要。本文将从工业大麻食品的法律法规及限量标准和大麻素的检测技术两方面的研究展开论述, 以促进国内工业大麻食品相关产品标准和检验标准的建立和实施。     

基于超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法测定9 种食品基质中3 种大麻素

在优化前处理条件和色谱分离的基础上,建立同时测定橄榄油、牛肉、面包等9 种食品中大麻酚、大麻二酚和Δ9-四氢大麻酚的超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱测定方法。最终选择用乙腈或甲醇提取,EMR或二乙烯苯-N-乙烯基吡咯烷酮（HLB）固相萃取小柱净化,以甲醇和10 mmol/L乙酸铵溶液为流动相,在BEH C18色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）上分离,用电喷雾电离源（正离子模式）,多反应监测模式测定,同位素内标定量。结果表明,该方法在0～200 μg/L质量浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数均大于0.998。方法的检出限（信噪比3）和定量限（信噪比10）分别为3 μg/kg和10 μg/kg。在空白样品中进行3 个水平（1、2、10 倍定量限）的加标回收实验（n＝6）,3 种大麻素化合物的回收率为71.7%～108.5%,相对标准偏差为4.6%～12.4%。本实验建立的方法稳定性好,灵敏度高,能够满足常见食品基质中大麻素的检测要求。     

大麻籽油的毒性分析与测定

本文介绍了大麻籽油的毒性,分析了食用大麻籽油后造成中毒现象的原因,提出油中含多量的以四氢大麻酚(△~9—THC)为代表的酚类物质是造成大麻籽油食后中毒的直接原因,对宁夏地区生产的大麻籽油及大麻籽中所含的主要毒性物质进行了调查测试。     

固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定食用植物油中大麻酚、大麻二酚和Δ9-四氢大麻酚

为有效提高食用植物油中大麻素类化合物的风险监测水平,建立一种固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱同时测定食用植物油中的大麻酚、大麻二酚和Δ9-四氢大麻酚的方法,并通过方法检出限、定量限、不确定度、加标回收率和精密度等对该方法的准确性进行了验证。结果表明：在以5 mL乙腈提取两次、EMR-Lipid固相萃取柱为净化柱、水和甲醇为流动相梯度洗脱、Agilent Pursuit 3 PFP色谱柱(3μm, 2.0 mm×150 mm)分离,负离子模式下电离、多反应模式监测、基质标准曲线同位素内标法定量条件下,大麻酚、大麻二酚、Δ9-四氢大麻酚在5～200 ng/mL质量浓度范围内均呈现良好的线性关系,检出限均为10μg/kg,加标回收率为84.27%～100.30%,相对标准偏差为1.2%～3.9%;实际样品测定中发现部分食用植物油中存在大麻素类化合物。该方法操作简单、快速、准确度高,适用于食用植物油中大麻酚、大麻二酚、Δ9-四氢大麻酚的测定。     

固相萃取-气相色谱质谱法测定食品中9 种大麻素

建立了测定橄榄油、猪肉、面包等食品中包括合成大麻在内9 种大麻素的气相色谱-质谱分析方法。样品经甲醇和乙腈提取、固相萃取净化以及HP-5MS毛细管色谱柱分离，使用电子电离源、选择离子监测模式以及外标法定量。结果表明：该方法在10～500 μg/L质量浓度范围内有良好线性关系，相关系数均大于0.999 2；方法的检出限（信噪比为3）和定量限（信噪比为10）分别为1～15 μg/kg和2.5～50 μg/kg。对不同样品基质进行1、2、10 倍定量限3 个水平的加标回收实验，9 种大麻素化合物的回收率为65.2%～117.9%，相对标准偏差为2.0%～12.7%。该方法灵敏度高、检测速度快、适用性强，对发现和控制我国食品中大麻素类物质的残留、制定检测标准和采取相应的管理措施具有一定的理论和现实意义。     

基于气相色谱-质谱和超高效液相色谱的火麻油中萜烯类、大麻素类成分分析

基于气相色谱-质谱和超高效液相色谱分析方法,对火麻油中特色的萜烯、脂肪酸和大麻素类化学成分进行分析,并利用数据软件进行主成分分析。结果表明,云南火麻油中含有较为丰富的特征风味性萜烯类成分,如β-石竹烯、β-月桂烯、柠檬烯等;火麻油中脂肪酸含量丰富,尤其亚麻酸和亚油酸接近黄金比例,营养价值高;在不同品种、不同工艺火麻油中均检测到微量、多种大麻素成分,脱壳工艺使火麻油中大麻素成分含量明显降低,冷榨工艺更适合火麻油加工。通过本研究对我国火麻油的食品安全性进行讨论并提出建议。最后对萜烯和大麻素进行主成分分析,找出其中的重要区分物质,对4种火麻油样本进行完美地区分与鉴定。     

大麻二酚检测方法的研究进展

大麻二酚(cannabidiol,CBD)是一种非精神活性大麻素,不具有成瘾性,并且现代药理学证明,大麻二酚具有诸如抗癫痫、抗焦虑、镇静等多种药理学活性,表明大麻二酚是一种具有广阔应用前景的活性天然产物。工业大麻又名火麻、胡麻、线麻等,为大麻科(Cannabaceae)大麻属(Cannabis)的一年生草本植物。工业大麻应用广泛,作为优质的植物蛋白和植物油脂来源,备受食品加工、保健品、化妆品等行业的青睐。工业大麻在我国使用历史悠久,中国古代医书《黄帝内经》《本草纲目》均有对工业大麻入药的记载。在工业大麻的种植及加工过程中,大麻二酚不断累积和代谢,因此,大麻二酚的检测对工业大麻原料及制品的品质评价及安全控制具有重要意义。本文分类介绍了近年来国内外文献报道的大麻二酚检测方法,对这些方法的应用特点和检测效果进行综述,并对我国未来大麻二酚检测技术的发展趋势进行展望,以期为相关研究提供借鉴。     

大麻籽油中Δ~9—四氢大麻酚的含量测定

本文报导了一个测定大麻籽油中△~9——四氢大麻酚含量的微量分析方法。大麻籽油中的△~9——四氢大麻酚用甲醇——石油醚提取,然后通过活性氧化铝柱层析净化,气相色谱测定。该方法平均回收率为88％,变异系数4.1％。     

Development and validation of LC-MS/MS method with QuEChERS clean-up for detecting cannabinoids in foods and dietary supplements

ABSTRACT

a rapid and simple liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method was developed and validated for the determination of cannabidiol (CBD) and Δ⁹-tetrahydrocannabinol (THC) using a QuEChERS (Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged, and Safe) clean-up for a variety of foods and dietary supplements (DS). QuEChERS is widely used in extraction or clean-up procedures to eliminate interference of matrices such as sugars, organic acids, lipids, and fatty acids. The samples were categorised into three types, and various pretreatment methods were compared for each type. In all types, the QuEChERS was superior and selected as the final pretreatment method. The optimised method was validated for specificity, limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), linearity, recovery, precision and accuracy. All of the validation results met the requirements of the international guidelines for all types of samples. The validated method was applied to 30 commercial food samples, CBD was detected in 17 samples, with 2 of them detected below the LOQ level and the rest detected in a range of 70 μg/kg to 31305 mg/kg (3.1%, w/w). Meanwhile, THC was detected in 14 samples; 2 of them were detected below the LOQ level and the rest detected in a 0.08–98.62 μg/g range. These results indicated that the validated method can be successfully applied for the determination of cannabinoids in a variety of samples. Furthermore, it will be useful for controlling the illegal distribution of cannabinoids.     

酶辅助溶剂法提取火麻叶中大麻二酚工艺条件的优化

为了研究从火麻的植物叶中利用酶辅助以及溶剂萃取方法制备富含大麻二酚的浸膏,考察了加热预处理方式、酶的种类、酶解的时间、酶量、料液比以及萃取时间等因素对浸膏得率的影响,并利用气相色谱方法对浸膏中的大麻二酚含量进行了表征。确定了最佳的工艺条件：火麻叶在100 ℃的烘箱中加热处理2 h;采用的复合植物水解酶（Viscozyme L）和酸性蛋白酶的复合物进行酶解,用量分别为物料的0.5%,酶解时间1 h;料液比1∶20（g∶mL）,萃取时间3 h。在此工艺条件下,浸膏得率达到5.40%,大麻二酚含量为56.11 mg/g。     

响应面法优化酶解低温榨取汉麻籽油工艺

将汉麻籽仁进行低温初榨,初榨饼粉碎,利用Viscozyme L植物水解酶和Protex 6L碱性蛋白酶依次酶解初榨饼粉,再进行低温复榨。低温初榨条件为温度50 ℃、榨膛压力3.5 MPa,获得初榨饼残油率21.6%。酶解复榨条件：初榨饼粒度60 目,Viscozyme L植物水解酶添加量3.0%（质量分数）,酶解时间4.5 h;通过响应面法优化后,Protex 6L碱性蛋白酶添加量1.1%、pH 10、酶解时间2.8 h、温度52 ℃、榨膛压力3.5 MPa条件下低温复榨,获得出油效率65.0%。对比分析了酶解低温复榨汉麻籽油基本理化指标和植物大麻素及生育酚的含量。研究结果表明：酶解低温复榨具有出油效率高、理化指标稳定、功能性成分对油相迁移性增强等优点。该方法为汉麻籽油工业化生产提供了新的理论依据与途径。     

Effects of supercritical and liquid carbon dioxide extraction on hemp (Cannabis sativa L.) seed oil

The increase in the popularity of hemp-based products is mainly linked to the presence of non-psychoactive cannabinoids that provide relief from aches, pain and anxiety. In this study, hemp seed oils were produced by two innovative and environmentally friendly extraction techniques: supercritical and liquid carbon dioxide (CO₂) extraction. The chemical composition of the two oils was analysed and compared with that of a control oil obtained by solvent (n-hexane) extraction. Both oils obtained by liquid and supercritical CO₂ extraction presented interesting compositions: they contained large amounts of cannabinoids, polyphenols and tocopherols and were less oxidised than the control and contained a large amount of hexanal, which provided a pleasant aroma. The maximum cannabinoid content was found in the oil obtained by liquid CO₂ extraction (71.51 mg of cannabidiol per kg of oil and 113.92 mg of cannabinol per kg of oil). Carotenoids were prevalent in the oil obtained by supercritical CO₂ extraction (61.00 mg kg⁻¹ of oil).     

超高效液相色谱-串联质谱法分析测定食用植物油中痕量δ9-四氢大麻酚

以电喷雾离子源(ESI)为电离源,在负离子采集模式下建立食用植物油中δ9四氢大麻酚(δ9-THC)超高效液相色谱-质谱/质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。实验以甲醇为提取剂,经中性氧化铝固相萃取柱净化、Waters ACQUITYTM UPLC BEH-C18(2.1mm×100mm,1.7μm)色谱柱分离后以UPLC-MS/MS多反应监测模式进行分析。方法检出限和定量限分别为0.15μg/kg和0.45μg/kg。实验以δ9-氘代四氢大麻酚(δ9-THC-D3)为内标物,采用内标法定量。3个添加水平,平均回收率为68.0%～110.0%,相对标准偏差为8.8%～18.1%。本方法能够满足食用植物油中δ9-四氢大麻酚痕量检测的要求。     

响应面法优化超临界CO2萃取汉麻叶精油工艺

采用超临界CO₂萃取技术进行汉麻叶精油的提取,通过单因素实验和响应面法优化汉麻叶精油提取工艺,将萃取压力（X₁）、萃取温度（X₂）、萃取时间（X₃）、CO₂流量（X₄）作为影响因子,以汉麻叶精油萃取率为评价指标进行响应面分析。结果表明,结合提取工艺的实际可操作性和便利性,确定最佳提取工艺为萃取压力29 MPa、萃取温度49 ℃、萃取时间3.4 h、CO₂流量13 mL/min。最终实际汉麻叶精油萃取率为0.283%,与理论值0.281%相接近,预测值与真实值的实际偏差为?0.71%。综上,超临界CO₂萃取法在汉麻叶精油提取方面,具有实用和开发价值,可为以后汉麻叶精油的开发利用提供理论参考。     

脂溶性茶多酚对火麻仁油的抗氧化作用研究

以过氧化值(POV)作为油脂氧化程度的评价指标,采用Schaal烘箱法,研究天然抗氧化剂脂溶性茶多酚(LTP)在火麻仁油中的抗氧化作用,并比较LTP与合成抗氧化剂叔丁基对苯二酚(TBHQ)、二丁基羟基甲苯(BHT)在火麻仁油中的抗氧化效果。结果表明:LTP在火麻仁油中具有良好的抗氧化作用,且抗氧化效果与添加量有关,最适添加量为100 mg/kg。在相同添加浓度(100 mg/kg)条件下,经7 d 60℃强化氧化后,LTP、TBHQ及BHT对火麻仁油过氧化值抑制率分别为50.9%,75.7%和11.2%。     

Hemp (Cannabis Sativa L.) Extract: Anti-Microbial Properties,Methods of Extraction,and Potential Oral Delivery

ABSTRACT

The evolving public and regulatory outlook concerning the health and nutritional properties of industrial hemp (Cannabis sativa L.) products has prompted recent research to focus on developing new methods for isolation and oral delivery of bioactive constituents present in hemp extracts. While cannabinoid extracts derived from hemp are renowned for the psychoactive and medicinal properties of the cannabinoids; however, other functional properties attributed to the nutritional value of the hemp seed oil, and, the anti-microbial properties of hemp extract are often overlooked. Isolation of the bioactive compounds from hemp and conversion into products that can be useful for a variety of applications, ranging from nutritional supplements to antimicrobials, as well as new developments in the delivery of medicinal bioactives, are areas of considerable interest for both the cannabis and hemp industries. This review examines these topics and moreover, critiques methods used for the extraction of cannabinoids and hempseed oil bioactives. Finally, novel advances in technologies designed to use nano-carriers for oral delivery of cannabinoids are introduced with the goal to highlight the latest developments in hemp extract processing and delivery.     

植物油基鱼罐头中矿物油污染物高灵敏检测方法的建立

本文建立了植物油基鱼罐头中矿物油（MOH）的高灵敏测定方法并调查了部分市售商品的MOH含量。方法采用皂化反应、环氧化反应进行提取和净化，以高效液相色谱-气相色谱联用法（HPLC-GC）分级、富集和定量检测。结果表明:所建立的植物油基鱼罐头中饱和烃矿物油（MOSH）和芳香烃矿物油（MOAH）测定方法的定量限（LOQ）为0.5 mg/kg，加标回收率为90.0%~106.0%，精密度（RSD）为1.6%~12.7%，满足欧洲联合研究中心（JRC）关于高油脂食品中矿物油的分析要求。应用该方法检测了北京地区10个市售鱼罐头产品，发现所有样品均含有MOSH，含量为2.6~53.7 mg/kg，其中5个检出MOAH，含量为0.7~5.5 mg/kg；谱图分析表明这些罐头的MOH污染与其植物油和鱼肉来源密切相关。