AB-8大孔树脂分离纯化枸骨叶总黄酮的工艺研究

以静态吸附与解吸为考察指标,利用五因素四水平的正交试验对AB-8 型大孔树脂分离纯化枸骨叶总黄酮的工艺进行研究。结果表明,AB-8 型大孔树脂对枸骨叶总黄酮有较好的纯化效果,最佳纯化工艺条件为吸附液pH4.5、吸附时间4h、解吸液体积与树脂质量之比为25:1(mL/g)、解吸液为体积分数90% 的乙醇、解吸时间2.25h,在此条件下,总黄酮回收率可达90.8%,纯度为33.4%。     

文冠果壳总黄酮分离纯化及稳定性研究

以吸附率和解吸率为评价指标,对大孔树脂分离纯化文冠果壳总黄酮的工艺进行优化,并研究纯化后文冠果壳总黄酮的稳定性。结果表明,文冠果壳总黄酮的最佳分离纯化工艺为:采用XAD-1600树脂,上样液pH=4,上样浓度0.5mg/mL,吸附时间6h,上样流速2BV/h,洗脱液流速3BV/h,洗脱液乙醇浓度40%。该条件下,纯化后总黄酮的纯度为(70.15±1.03)%,回收率为(89.63±1.58)%。稳定性试验表明:文冠果壳总黄酮在低温、酸性、避光条件下性质稳定。     

多聚磷酸盐在猪血清IgG分离纯化中的应用

本实验对多聚磷酸盐分离纯化猪血清IgG进行了研究,其最佳工艺参数为:多聚磷酸盐浓度0.1%(W/V), pH值3.9,反应温度45℃;所得IgG的回收率与纯度分别为60.9%和 64.5%,活性保留率为87.3%.多聚磷酸盐分离纯化猪血清IgG技术适于食品用IgG的工业化生产.     

葛根多糖纯化工艺及其抗氧化性能研究

目的:以葛根为原料,采用大孔树脂法分离纯化葛根多糖,研究其抗氧化性质。方法:通过对葛根多糖吸附及解吸筛选出最优树脂,分析吸附解吸时间、样液浓度、样液pH以及乙醇的体积分数对多糖纯化的影响,在静态分析条件下再运用层析柱法进行动态纯化,对纯化后的葛根多糖进行抗氧化分析。结果:D101树脂分离纯化效果较好,其对葛根多糖静态吸附和解吸最佳工艺条件吸附时间为8 h,解吸时间为3 h,吸附浓度0.75 mg/mL,样液pH6.0,乙醇解吸体积分数为60%,其对动态吸附和解吸最佳工艺条件为上样液质量浓度1.0 mg/mL,解吸剂体积(60%乙醇)51 mL,在此条件下纯化的葛根多糖纯度达到55.34%。经纯化后的葛根多糖对DPPH·和·OH具有较强的清除作用,最大清除率分别为81.74%和85.11%。结论:大孔树脂法纯化葛根多糖工艺条件合理,且纯化效果好,杂质去除率高,纯化后的葛根多糖抗氧化性得到提高。     

野菊花总黄酮的提取与纯化

以野菊花总黄酮含量及回收率等为考察指标,研究野菊花总黄酮提取工艺及大孔吸附树脂分离纯化野菊花总黄酮工艺.结果表明:采取乙醇浸提L9(34)正交试验方法,野菊花总黄酮最佳提取工艺条件为乙醇浓度60%、提取温度80℃、提取时间3 h、提取次数3次.AB-8型大孔吸附树脂对野菊花总黄酮静态饱和吸附量为114.65 mg/g(干树脂),洗脱率94.9%,动态饱和吸附量为94.5 mg/g(干树脂1,总黄酮回收率在92.6%、纯度在90%以上,是实验树脂中分离纯化野菊花总黄酮的最佳大孔吸附树脂.分离纯化野菊花总黄酮最佳工艺条件为AB-8型大孔吸附树脂,洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量为3倍树脂体积,流速3～4 mL/min,上柱总黄酮量与树脂比为1:10.5,上柱液总黄酮浓度为19.8 mg/mL,流速2～3 mL/min,上柱液pH值4～5,冲洗杂质用水体积2～3 BV.     

大孔吸附树脂对葵仁多酚的分离富集

针对酸液浸提葵仁后所得的多酚粗提液(主要含3-O-咖啡酰奎尼酸、4-O-咖啡酰奎尼酸和5-O-咖啡酰奎尼酸),研究大孔吸附树脂对其分离富集的工艺条件。考察9种大孔吸附树脂的吸附解吸性能,筛选出XDA-1树脂用于分离纯化。结果表明:经超滤初步纯化后,粗提液纯度可由4%提高到15%;将此超滤液进一步进行树脂吸附,其优化后的吸附工艺条件为进料液多酚浓度2.0mg/mL、pH 3.0、上样流速2BV/h、上样量30倍床体积(BV);吸附结束后,先采用10%(V/V)的乙醇进行部分去杂,然后用50%(V/V)的乙醇以4BV/h的流速进行洗脱收集。经树脂分离纯化后所得的多酚,其回收率为82.3%,纯度由15%提高到77%。联合超滤和大孔吸附树脂分离是一种从葵花籽提取液中回收CQA的高效经济方法。     

接枝不同金属配基的pH敏感型聚合物的制备及对木瓜蛋白酶的纯化

本文以四种丙烯酸类单体合成了一种pH敏感型聚合物(PMDMN)。该聚合物连接金属螯合剂(IDA)后与Cu~(2+)或Fe~(3+)通过配位键形成聚合物PMDMN-Cu或PMDMN-Fe。首先对聚合物的红外光谱、等电点及回收率进行了测定。其次,探讨了PMDMN-Cu、PMDMN-Fe对木瓜蛋白酶粗酶的吸附条件,包括pH、时间及NaCl浓度。通过对洗脱液的酶活回收率的测定,考察了咪唑、盐酸胍、EDTA及其浓度配比的洗脱效果。最后通过SDS-GAGE对最优洗脱条件的酶液纯度进行了验证。结果显示:接枝金属配基前后的等电点分别为5.15或5.08,回收率皆大于95%(5个吸附-洗脱循环后);PMDMN-Cu、PMDMN-Fe最适吸附pH值均为7.0,并于120 min和210 min达到吸附平衡,最大吸附量分别为5.09 mg、4.58 mg,NaCl浓度的增加能一定程度增加木瓜蛋白酶的吸附量。在洗脱方案中,0.5 mol/L咪唑+1.0 mol/L盐酸胍具有最好的洗脱效果,洗脱率皆接近95%,同时不会造成金属配基的泄露。SDS-PAGE显示PMDMN-Cu和PMDMN-Fe都能大幅度提高木瓜蛋白酶的纯度,纯化倍数分别为4.29和4.48。     

药桑红色素纯化工艺研究

对药桑红色素的纯化工艺进行了研究,比较了AB-8、D-101、氧化铝、聚酰胺(14-30目)、聚酰胺(100-200目)五种吸附剂对药桑红色素的静态吸附-脱附性能,结果表明:AB-8大孔树脂对药桑红色素具有较强的选择性,在相同试验条件下,吸附量大,且易被解吸。在此研究的基础上进行了AB-8大孔树脂分离纯化药桑红色素的最佳工艺研究,比较了原料液浓度,NaCl浓度,原料液pH值,洗脱剂浓度,洗脱剂pH值等对树脂静态吸附-解吸的影响,并在静态试验的基础上,进行了动态吸附-解吸试验的研究,以确定最佳吸附、解吸流速,结果表明,AB-8大孔树脂对药桑红色素分离纯化最优吸附条件为:原料色素液pH值为2.04,吸光度为0.567,吸附流速1mL/min;最优洗脱条件为:洗脱剂(乙醇)浓度95%,pH值为1,洗脱流速0.8mL/min。此工艺条件能够较好地分离纯化药桑红色素。     

大孔吸附树脂纯化花椒叶总黄酮的研究

通过比较八种大孔吸附树脂的吸附和解吸性能,发现大孔吸附树脂D101对花椒叶黄酮的纯化效果最佳。采用动态法对样品液吸附的流速、pH条件、解吸液乙醇浓度和解吸液流速进行了研究。同时采用高效液相色谱法进行分析表征了分离纯化的效果。实验结果表明,大孔吸附树脂D101对花椒叶总黄酮的最佳吸附解吸条件为:样品液pH为4、吸附流速为2BV/h、解吸液60%乙醇,解吸流速2BV/h。经纯化后花椒叶黄酮纯度由23.2%提高到了56.4%。     

藜麦糠黄酮的分离纯化及成分测定

以超声辅助法提取藜麦糠黄酮粗提物为原料,采用大孔树脂进行吸附与解吸附。考察了7种树脂对藜麦糠黄酮的吸附与解吸附性能,借助静态吸附动力学实验筛选最优纯化藜麦糠黄酮的树脂。结合静态与动态吸附解吸实验得出最优纯化条件:样液浓度0.5mg/mL,上样量35mL,上样液pH 6.0,乙醇浓度75%,乙醇溶液体积180mL。在此条件下分离纯化后,藜麦糠中黄酮纯度从13.0%增加到68.0%,回收率为77.4%。表明用HPD950大孔树脂对藜麦糠黄酮分离纯化有良好的效果。对纯化后的藜麦糠黄酮样品进行高效液相色谱分析,样品中槲皮素、槲皮苷、芦丁和异槲皮素4种成分得到确认。     

大孔吸附树脂纯化艾草总黄酮及其抗氧化活性研究

确定艾草总黄酮初步分离纯化的最佳工艺条件及抗氧化活性。比较6种大孔吸附树脂的静态吸附和解吸附效果,确定最佳吸附树脂并考察其上样液浓度、上样液pH值、吸附温度、上样速度、洗脱流速、洗脱用量对艾草总黄酮吸附及解析附性能的影响。结果表明：AB-8大孔吸附树脂的综合效果最佳,其最佳工艺条件为：上样液浓度为2.5 mg/mL,上样液pH值为4,吸附温度为20℃,上样速度为1.5 mL/min,选用80%乙醇进行洗脱,洗脱流速为1.5 mL/min,洗脱剂用量为100 mL。在此吸附和解吸条件下,艾草总黄酮的纯度由36.1%上升至75.43%,纯度提高了近2倍,纯化效果良好。抗氧化试验结果表明：艾草总黄酮具有一定的抗氧化活性,是一种潜在的天然抗氧化剂。     

大孔树脂分离川麦冬须根中总黄酮和总皂苷的工艺研究

目的:筛选最适于纯化川麦冬须根中总黄酮和总皂苷的大孔树脂,并获得最优分离参数。方法:以川麦冬须根为原料,吸附率和解吸率为指标,采用静态吸附实验对9种大孔树脂进行筛选,确定吸附与解吸性能最佳的品种。再通过动态吸附探索各分离参数,研究上样液浓度和体积、上样液pH和流速,洗脱液浓度、洗脱流速和体积对吸附与洗脱效果的影响。结果:D101树脂对川麦冬须根中总黄酮和总皂苷均有较好的吸附和解吸效果,其最佳纯化工艺条件:上样液浓度(总黄酮含量为0.73 mg/mL,总皂苷含量为2.67 mg/mL),上样pH为5,上样体积为4个柱床体积(BV),上样流速为2 mL/min;上样后,以5 BV 70%的乙醇进行洗脱,洗脱流速为2 mL/min。纯化后皂苷的纯度由3.3%上升为45%,回收率达到90%;黄酮纯度由0.77%上升为12%,回收率达到88%。结论:D101树脂适合富集分离川麦冬须根中总黄酮和总皂苷,该工艺简单,富集精制效果好,可用于工业化生产。     

AB-8型大孔吸附树脂分离纯化鼠曲草总黄酮工艺

采用AB-8型大孔树脂对从鼠曲草中提取的总黄酮产物进行分离纯化研究。考察各种因素对树脂吸附和洗脱效果的影响。通过实验得到最佳吸附工艺条件为上样液流速2BV/h、上样液pH4.5、上样液质量浓度1.7mg/mL;最佳洗脱工艺条件为洗脱液体积分数为60%乙醇、洗脱液流速1BV/h和洗脱液用量1.8BV。分离纯化后的总黄酮产品纯度可达35.42%。     

牛乳过敏原β-乳球蛋白分离纯化方法优化及IgG结合能力分析

目的 优化分离纯化方法,获得高纯度、高得率且具有良好IgG结合能力的β-乳球蛋白(β-lactoglobulin, β-Lg)。方法 以超速离心脱脂、等电点沉淀、硫酸铵沉淀为前处理方法,通过Sephadex G-75凝胶柱层析、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析纯化β-Lg,并对纯化条件进行优化,结合SDS-PAGE与LC-MS/MS对β-Lg进行鉴定,采用Western blot对其IgG结合能力进行验证。结果 凝胶层析最佳洗脱条件为0.02 mol/L pH 6.8 Tris-HCl+0.15 mol/L NaCl,流速0.4 mL/min;阴离子交换层析最佳洗脱条件为0.05 mol/L pH 6.5 Tris-HCl+0~0.5 mol/L NaCl,流速0.5 mL/min;结合SDS-PAGE与LC-MS/MS鉴定,该条件下获得的终产物为β-Lg;该方法获得的β-Lg得率为54.89%,纯度为100%(SDS-PAGE),且具有良好的IgG结合能力。结论 本研究建立了一种简单、可重复的β-Lg分离纯化方法,在获得高纯度β-Lg的同时保持良好的IgG结合能力,为后续牛乳过敏及脱敏研究提供技术支撑。     

大孔树脂纯化马兰总黄酮树脂吸附特性及工艺的研究

研究大孔树脂纯化马兰总黄酮树脂吸附特性及工艺条件及参数。文中分别进行静态吸附、静态解吸、静态吸附动力学过程(Lagergren准一级动力学方程)、静态吸附等温曲线(Langmuir和Freundich等温吸附方程)、动态吸附实验,从7种大孔树脂中筛选用于马兰总黄酮分离的最佳树脂,并系统研究最佳大孔树脂分离纯化的吸附性能和最优洗脱参数。结果表明:D101型大孔树脂为分离马兰黄酮类组分最佳树脂,其分离的最佳工艺为总黄酮浓度为9.36 mg/mL的样液,以3 BV/h的流速,控制pH值为4～5上柱,用75%乙醇以3 BV/h用量进行洗脱,可获得样品总黄酮纯度达70%以上。     

大孔吸附树脂纯化无花果总多糖工艺

研究大孔树脂分离纯化无花果总多糖工艺.以树脂的吸附率和解吸率作为评价指标,讨论影响总多糖分离纯化的几个条件,结果显示:AB-8树脂具有较好的吸附能力,最佳柱纯化条件:吸附液pH值为8.0、洗脱流速为1 mL/min、洗脱剂浓度为0.01 g/L.将洗脱液浓缩,真空干燥即得高纯度无花果总多糖纯度达90%以上,为纯化无花果多糖的一种好方法.     

AB-8型大孔吸附树脂分离纯化了哥王总黄酮

通过考察各种因素对树脂吸附和洗脱效果的影响,确定AB-8型大孔吸附树脂分离纯化了哥王总黄酮的最佳工艺参数。最佳工艺参数为上样液浓度1.5 mg/mL、上样液流速2 BV/h、上样液pH 5.4、洗脱液浓度70%乙醇、洗脱液流速1 BV/h和洗脱液用量为80 mL,分离纯化后的总黄酮产品纯度可达20.60%。     

AB-8大孔树脂对槐花总黄酮吸附性能研究

目的：探讨AB-8大孔树脂对槐花中总黄酮静态和动态的吸附性能。方法：用微波辅助法得到粗提液,利用分光光度法测定样品中黄酮含量,考察吸附剂用量、粗提液浓度、pH值、吸附时间等条件对吸附结果的影响。结果：AB-8树脂对槐花中总黄酮具有较好的吸附性能。静态吸附最佳条件：树脂与提取液比为1:20(g/ml)、25℃、pH5～6、粗提液中的黄酮含量0.10～0.17mg/ml、恒温振荡70min、70%乙醇洗脱,在此条件下,黄酮总回收率为71.94%;动态吸附的最佳条件为：提取液上样质量浓度0.045～0.070mg/ml、pH5、以0.2ml/min的流速通过径高比为1:8的层析柱,70%的乙醇4BV洗脱,在此条件下,黄酮总回收率为39.32%。结论：AB-8树脂较适于分离纯化槐花总黄酮。     

凝胶过滤层析一步纯化MC-LR Fab的方法及吸附机制初探

为高效制备高纯微囊藻毒素(MC-LR)Fab片段,采用木瓜蛋白酶酶解腹水中纯化获得的单克隆抗体,利用该Fab片段与凝胶过滤层析介质结合的特殊现象分离酶解混合物。通过单因素实验考察流动相中离子强度和pH对Fab片段在柱中保留行为的影响,结合Fab片段等电点(pI)及聚集性质分析二者结合机制。结果表明,腹水经protein G纯化得到纯度大于90%的IgG,IgG经木瓜蛋白酶酶解,主要产物为Fab片段、Fc片段和少量IgG,酶解混合物经凝胶过滤层析一步纯化获得纯度为94.5%,回收率为51%,对MC-LR抑制率为94%的Fab片段。Fab片段pI为6.02,由于表面较强疏水性产生聚集,疏水吸附导致Fab片段与凝胶过滤层析介质结合,降低流动相中离子强度,减弱疏水作用同时提高pH增强离子排阻作用可使Fab片段消除吸附,实现了Fab片段的高效制备。     

麻栎叶黄酮的大孔树脂分离及其对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用

研究麻栎叶黄酮的大孔吸附树脂分离纯化工艺,并考察其对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。通过大孔树脂静态吸附动力学实验,在确定大孔树脂类型的基础上,探索其最佳纯化工艺,结果表明,X-5是适用于麻栎叶黄酮吸附分离的较理想的树脂类型。X-5大孔吸附树脂分离纯化麻栎叶黄酮的最佳条件为:上柱液浓度52.79μg/mL左右,上柱液量为50mL,上柱液流速为0.5mL/min,上柱液pH为5。用95%乙醇进行洗脱,洗脱液流速为1.0mL/min,洗脱液量为30mL。在上述最佳条件下,X-5大孔吸附树脂分离纯化麻栎叶黄酮的纯度达58.33%。麻栎叶黄酮具有很强的抑制α-葡萄糖苷酶活性,IC为13.11μg/mL。