酪蛋白酶解制备酪蛋白磷酸肽研究 Ⅰ.过程分析与优化

以 pH－ stat技术跟踪间歇搅拌反应釜中酪蛋白—碱性蛋白酶抑制备酪蛋白磷酸肽 (CPPS)过程特性,利用水解度 (DH)表征其反应历程。分析了温度 (T)、 pH值、底物浓度 ([S])、酶浓度 ([E])及时间 (t)等参数对 DH的影响,并通过多元线性回归求得其关联式,确定出最适酶解条件为： T=40℃, pH=10, [E]=0.2％, [S]=2.5g/L, t=30min。     

不同酶解条件下酪蛋白酶解产物特性的阶段性研究

以底物浓度（[E]）、酶用量（[E]/[S]）、水解温度（T）、水解时间（t)和pH值5个因素作为因变量，采用五元二次正交旋转组合设计确定酪蛋白的水解条件，分析了不同酶解条件对酪蛋白水解度、蛋白回收率、三氯乙酸氮溶解指数、氨基氮含量的影响。结果表明，在不同酶解条件下获得的酶解产物的水解度、蛋白质回收率、三氯乙酸氮溶解指数、氨基氮含量差异较大，且酶解产物的水解度与蛋白质回收率、三氯乙酸氮溶解指数、氨基氮含量间均呈显著相关关系。     

酶解蚕蛹蛋白制备蚕蛹活性肽工艺条件优化

以经超临界CO2萃取除去大部分蚕蛹油的脱脂蚕蛹蛋白质为原料,研究不同酶种类制备蚕蛹活性肽的酶解效果,选用碱性内切蛋白酶水解蚕蛹蛋白质制备活性肽,研究水解温度、酶用量([E]/[S])、底物浓度([S])和pH值等因素变化时水解度DH随时间的变化规律,结果表明,以DH为考察指标得到该碱性内切蛋白酶水解蚕蛹蛋白质的适宜条件为:水解时间300 min,酶用量[E]/[S]为0.3%,[S]为8%,pH值9.5,水解温度50℃,此时DH为22.66%,酶解物主要由小肽分子组成.     

固定化瑞士乳杆菌蛋白酶酶解乳清蛋白生产ACE抑制肽的条件优化

以乳清浓缩蛋白WPC-80为原料,研究固定化瑞士乳杆菌蛋白酶酶解WPC-80生产血管紧张素转化酶（angiotensinⅠ-converting enzyme,ACE）抑制肽的工艺条件。通过单因素试验和响应面方法研究了酶解温度、酶解pH值、底物与酶质量比（[S]/[E]）、酶解时间对固定化瑞士乳杆菌蛋白酶制备ACE抑制肽的影响,确定了酶解乳清蛋白制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为：温度37 ℃、pH 7.5、[S]/[E]＝15%、酶解时间8 h。在此条件下,酶解产物的水解度为（6.05±0.36）%,ACE抑制率为（59.54±0.61）%。     

双酶法制备葵花籽肽的工艺研究

利用双酶法水解葵花籽分离蛋白（SPI）制备葵花蛋白肽,探讨各因素对水解度（Degree of hydrolysis,DH）和肽含量的影响,目的在于确定葵花蛋白肽制备的最佳酶解条件。结果表明：最佳酶解条件为底物浓度5.0?10-2 g/mL,温度为53.5 ℃,pH 8.5,按照[E/S]为1.0?10-2 g/g加Alcalase 2.4 L,酶解104 min,调整pH为7.5,按照[E/S]为0.44?10-2 g/g添加Flavourzyme酶解120 min。此工艺得到水解液中肽含量为4.25 mg/mL,DH为30.97%,与单酶法相比,肽含量显著提高。     

碱性蛋白酶水解制备蛋黄降压肽工艺条件优化

以经超临界CO2萃取除去大部分蛋黄油和卵磷脂的鸡蛋蛋黄蛋白质为原料,选用碱性蛋白酶水解该蛋白质制备蛋黄降压肽(ACEI),用高效液相色谱(HPLC)测定酶解产物对血管紧张素酶(ACE)的抑制活性(IP)。研究了不同水解温度、酶用量([E]/[S])、底物浓度([S])和pH值时蛋白质水解度(DH)随时间的变化规律,并进一步考察了不同DH产物的氮溶解指数(NSI)及对ACE抑制活性(IP)。结果表明,获得具有较高活性和较好溶解性的产物需控制蛋白质DH在16%～20%之间,以IP为考察指标得到该碱性蛋白酶水解鸡蛋蛋黄蛋白质制备降压肽的适宜条件为:水解时间300min,水解温度45℃,[E]/[S]为50AU/kg,[S]为7%,pH值9.5,此时DH为16.3%,NSI值为89.09%,水解物对ACE的IP值可达到68.28%。     

不同酶解因素对酪蛋白酶解产物水解度的影响

以底物浓度([E])、酶用量([E]/[S])、酶解温度(T)、酶解时间(t)和pH值五个因素作为因变量,采用五元二次正交旋转组合设计确定酪蛋白的水解条件,以水解度(DH)作为考察指标,分析了不同酶解条件对水解度的影响.分析结果表明在试验设定条件下,酪蛋白酶解产物的水解度介于9.74%和24.02%之间,在五个试验因素中,酶解温度对酪蛋白酶解产物水解度的影响最大,酶用量次之.降维分析显示底物浓度与反应时间、酶用量与反应时间、酶解温度与时间等之间的交互作用对酶解产物的水解度均有一定影响.     

酪蛋白酶解制活性肽的工艺条件

选用胰蛋白酶水解牛乳酪蛋白制备活性肤.以水解度(DH),水解速度,水解时间(t)和分子量分布为指标,探讨对酶的底料浓度(E/S),底物浓度比(S),水解温度(T),水解时间(t),4个因数时酶解效果的影响,确定最佳条件组合:水解温度40℃,底物浓度:6%,酶底物浓度比:2%,水解时间:120 min.     

蛋白酶水解啤酒糟蛋白动力学研究

为了研究蛋白酶水解啤酒糟蛋白的动力学性质,采用pH-stat法,以蛋白酶对啤酒糟中提取的蛋白进行水解处理.探讨了底物浓度[S]、酶与底物浓度比[E]/[S]和反应时间t对产物水解度DH的影响.建立了[S]及t同DH间的数学模型.通过不同底物浓度加碱量随水解时间的变化速度,测定出蛋白酶水解啤酒糟蛋白的K_m值.     

鸡肉多肽酶解条件的研究

探索鸡肉多肽酶解的最佳条件。以鸡肉、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶为原料,酶解液中多肽浓度和最终多肽得率为指标,采用单因素和正交实验筛选鸡肉多肽酶解的最佳条件。结果：木瓜蛋白酶用量2．50％（[E]／[S],W/W）,底物浓度9％（[S]）,pH7．70,水解温度60℃,水解时N4h,多肽得率为58．22％。结论：木瓜蛋白酶能有效水解鸡肉获得鸡肉多肽,其酶解鸡肉多肽的得率比胰蛋白酶高。