草鱼鱼鳞胶原蛋白肽的制备及分析

草鱼鱼鳞为淡水产品副产物。我们用木瓜蛋白酶水解草鱼鱼鳞并优化酶解条件,运用Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳和凝胶渗透色谱确定所得胶原蛋白肽的分子量,并分析了其中的氨基酸组成。结果表明,最佳酶解条件为:酶解温度60℃、酶添加量8%(质量分数)、酶解时间2 h、pH 5.0、料液比1∶30(g/mL)。所得的胶原蛋白肽分子量小于500 u,其中主要含有甘氨酸、丙氨酸、羟脯氨酸、精氨酸和天冬氨酸。     

Alcalase碱性蛋白酶酶解蛋清制备抗氧化活性肽

研究Alcalase碱性蛋白酶酶解鸡蛋蛋清制备小分子活性肽.确定酶解的最佳工艺是:酶解pH值为9.0,酶解温度为70℃,底物浓度[S]为4.5%,酶加入量[E]/[S]为6%.水解时间4 h,水解度达到33%.采用化学发光法研究蛋清肽混合物的抗氧化性,结果表明,不同浓度和水解度的蛋清肽混合物均具有清除活性氧和抗脂质氧化的能力.随着蛋清肽混合物浓度增大,清除能力增大,抗氧化性增大.不同水解度的蛋清肽混合物,其清除活性氧和抗脂质氧化能力稍有不同,但区别不大.用葡聚糖凝胶SephadexG-15测定水解物分子量分布,结果表明水解产物中的主要成分是分子量集中在1300u的寡肽.     

咸蛋清蛋白深度酶解工艺优化研究

以咸蛋清为原料,用酸性蛋白酶对其进行酶解,以蛋白回收率和水解度为指标,通过单因素实验考察了酶解时间、加酶量、pH和酶解温度对咸蛋清深度酶解的影响,优化了咸蛋清蛋白深度酶解工艺,并对最佳工艺条件下获得的咸蛋清蛋白酶解液进行肽分子量分布的测定。研究结果表明:咸蛋清蛋白深度酶解最佳工艺条件是:稀释后的咸蛋清调节pH至4.0,酸性蛋白酶的加酶量为0.3%(E/S),温度为55℃,酶解时间为48h;此最佳工艺得到的咸蛋清蛋白酶解液中肽分子量主要为3000u以下,其中分子量为1000~3000u占49.28%,分子量为1000u以下占35.73%。     

牛肉酶解物的Tricine-SDS-PAGE电泳分析

用Tricine-SDS-PAGE电泳法对牛肉酶解物的分子量进行了测定，结果表明产物的分子量分布在1060～24000范围，分子量在5000以下的低分子蛋白成分含量约75％。     

蛋清肽的制备及其对保加利亚乳杆菌促生长的作用

研究Alcalase碱性蛋白酶酶解蛋清制备蛋清肽和蛋清肽对保加利亚乳杆菌生长的影响。结果表明：通过Box-Behnken设计确定酶解的最佳工艺为：底物质量浓度4.5 g/100 mL、酶解pH 9.0、酶解温度64 ℃、加酶量（[E]/[S]）5.0%,此条件下,酶解3 h后水解度达21.89%。蛋清肽可显著促进保加利亚乳杆菌生长,当添加体积分数3.0%、酶解3 h的蛋清肽（分子质量主要集中在1 513 u）时,其促生长效果最好,此时,与未添加蛋清肽组相比,活菌数提高了1（lg（CFU/mL））。     

中国毛虾酶解产物的分子量分布及ACE抑制活性

利用胃蛋白酶酶解中国毛虾制备具有血管紧张素转化酶抑制活性的酶解产物,并采用凝胶色谱法探讨酶解产物的分子量分布。结果表明:在45℃、pH2.5、酶量2%(w/w)、酶解4h、底物浓度20%(w/v)条件下,中国毛虾酶解产物的ACE抑制率高达85.9%;Sephadex G-15葡聚糖凝胶色谱图上出现5个吸收峰,其中高ACE抑制活性组分的分子量在1320～311之间,IC50为0.77mg/mL。     

啤酒酵母蛋白酶解物分子量分布研究初探

凝胶层析分离经胰蛋白酶酶解啤酒酵母后得到的多肽粗粉,并采用SDS-PAGE电泳测定啤酒酵母多肽分子量,发现其中含有16～26、5、1.4kDa等三种不同分子量水平的蛋白组分,酶解得率分别为27.08%、11.55%、17.99%.     

大豆蛋白酶解肽蛋白Tricine-SDS-PAGE分离体系的建立

为建立和优化大豆蛋白酶解肽蛋白Tricine-SDS-PAGE分离技术,从凝胶的浓度、凝胶中乙二醇的使用、上样缓冲液中甘油的浓度、上样量、染色方法等多个方面对Tricine-SDS-PAGE分离效果进行比较研究.结果显示:凝胶质量分数T为18％、交联度C为5％并加入30％(体积分数)乙二醇能分离分子质量低至1.7 ku的大豆多肽,在含30％甘油的上样缓冲液中大豆酶解肽能得到较好的分离,上样量为20μg的分离效果较理想,考马斯亮蓝G-250染色方法能提高大豆低分子多肽电泳的分辨率,同时利用改进的Tricine-SDS-PAGE电泳技术对不同蛋白酶酶解液的分子质量分布进行了分析.研究结果表明,通过优化的Tricine-SDS-PAGE电泳技术能够获得较高分辨率的大豆蛋白酶解肽电泳图谱.     

扇贝边活性肽的分离及其对羟自由基的清除活性研究

目的:确定扇贝边酶解产物中对羟自由基(·OH)具有清除作用的活性肽的分布及活性肽分子量的大小。方法:采用葡聚糖凝胶G-25和G-200分别对扇贝边酶解产物进行分离,用标准分子量作为参照,检测各分离组分对羟自由基的清除率及活性肽分子量的大小。结果表明:枯草杆菌蛋白酶酶解扇贝边的酶解产物中,有两个分离组分具有羟自由基清除活性,其对应的活性肽分子量为8000Da和1800Da,这两种活性肽对羟自由基的清除率分别为73.6%和64.3%;木瓜蛋白酶酶解扇贝边的酶解产物中,也有两个分离组分具有羟自由基清除活性,其对应的活性肽分子量为9000Da和1400Da,这两种活性肽对羟自由基的清除率分别为72.7%和66.1%。结论:用枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解扇贝边所得的酶解产物中分别含有两种对羟自由基具有清除作用的活性肽。     

复合酶法制备植物小分子肽的研究

以大豆蛋白、花生蛋白为原料进行合理配比后,采用动态超高压均质预处理,再采用复配酶(木瓜蛋白酶与胰蛋白酶)和复合风味蛋白酶进行两步复合酶解.结果显示,超高压均质后,酶解度可提高2%-3%.最优条件为:超高压均质压力为60MPa;木瓜蛋白酶和胰蛋白酶按1:1复配,复配酶水解温度60℃,pH6.5,酶用量250U/g,底物浓度5%;复合风味酶水解温度55℃,pH6.0,酶用量200U/g.高效液相凝胶色谱法测定纯化后的小分子肽,分析表明分子量主要集中在3000Da以下.